猪链球菌2型二肽酶Ⅳ的克隆、表达及酶活性鉴定
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R446.1

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国家自然科学基金项目(30670105、30600533、30671848),江苏省自然科学基金项目(BK2007013、BK2006014).


Cloning, expression and identification of gene encoding dipeptidyl peptidase of Streptococcus suis serotype 2
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    目的克隆表达猪链球菌2型二肽酶Ⅳ(DPPⅣ)编码基因,分析表达产物的免疫原性,并测定其酶活性。方法采用PCR法,从四川资阳中毒性休克综合征病人分离株05ZYH33基因组扩增DPPⅣ的编码基因dpplV。构建重组表达质粒pET32a-dppIV,转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,产物通过SDS—PAGE鉴定,并用western blot检测其抗原活性;最后对表达产物进行亲和层析纯化,测定其在不同pH、温度下的酶活性。结果dppIV基因在原核细胞中得到高效表达,在最适温度和pH下具有最强酶活性。结论我国猪链球菌2型毒力株05ZYH33含有dppIV基因,在原核系统高效表达的重组蛋白具有良好的免疫原性和酶活性。

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引用本文

季红峰 潘秀珍 郑峰 王长军 朱进 唐家琪.猪链球菌2型二肽酶Ⅳ的克隆、表达及酶活性鉴定[J].临床检验杂志,2007,(6):438-440

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  • 收稿日期:2007-04-16
  • 最后修改日期:2007-09-06
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