摘要:

摘要:血细胞形态学检验是血液病基础诊断与常规血液学检验的重要项目,是最基本的简便实用的检查方法.血细胞形态学检验主要包括骨髓及外周血细胞形态检验两部分.

摘要:目前血液分析仪已成为全血细胞计数(complete blood count,CBC)的必备仪器,它不但减轻了工作人员的劳动强度,提高了实验结果的准确性,还提供了更多的相关实验指标,对疾病的诊断和鉴别诊断起了重要的作用.

摘要:近年来,间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)以其易于在体外分离培养、高增殖潜能等生物学特性,已经成为备受关注的治疗载体.本文探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hUCMSC)的分离培养及其生物学特性.

摘要:婴肝综合征(neonate hepatitis syndrome,NHS)常见病因是巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)的感染,新生儿及婴儿出现肝脾大、黄疸、肝功能损害、小头畸形以及感觉、运动、神经和精神障碍等脑瘫症状.

摘要:目的 探讨血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregates,PLA)的检测对急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者的意义.方法 用双标记流式细胞术检测65例ACI患者和24例对照组的PLA、血小板-中性细胞聚集体(PNA)、血小板-淋巴细胞聚集体(PLyA)、血小板-单核细胞聚集体(PMA),用血液凝集仪检测血小板聚集率(PAR),用ELISA法检测可溶性P选择素(sP-sel),用免疫散射比浊法检测C-反应蛋白(CRP).结果 ACI患者PLA(4.12±1.17)%、PNA(4.09±1.27)%和PLyA(4.28±1.09)%与对照组[分别为(4.10±0.99)%、(3.98±1.12)%、(4.01±1.98)%]无显著差异,PMA治疗前(11.54±1.88)%高于治疗后(8.40±2.74)%,P＜0.01;治疗后又显著高于对照组(6.69±1.74)%,P＜0.01,治疗前PMA水平与PAR、sP-sel、CRP正相关(r=0.554、0.447和0.514,均P＜0.05).结论 PMA是反映ACI患者血小板活化的良好指标,并能反映机体炎症水平,在ACI的发生和发展过程中起着重要作用.

摘要:目的 了解耐头孢西丁的产质粒介导AmpC酶的肺炎克雷伯菌的耐药性及其AmpC酶基因型别.方法 对49株耐头孢西丁肺炎克雷伯菌用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,用平皿琼脂倍比稀释法检测产酶株的药物敏感性,提取质粒用多重PCR技术检测质粒介导的AmpC基因型,设计引物进行结构基因的全长扩增和测序.结果 29株肺炎克雷伯菌(发生率59.2%)产质粒介导AmpC酶;其中检出DHA型16株,CIT型6株,EBC型7株,发现新的基因型2种,自命名为ACT-3和MIR-4,GenBank登录号分别为EF125013和EF587233.产质粒介导AmpC酶的菌株耐药性严重,且呈多重耐药,但对亚胺培南和美罗培南全部敏感.结论 肺炎克雷伯菌中质粒介导AmpC酶发生率高,以DHA-1型为主,并在国际上首次报道2株新基因.治疗相关感染以碳青酶烯类抗生素为首选药物.

摘要:

摘要:目的 建立自身猝灭荧光探针定量PCR技术检测HCV方法.方法 构建重组质粒pMD18-T-HCV5'NCR作为标准品,并通过Sigma在线软件设计自身猝灭探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价.结果 建立了自身猝灭荧光探针的定量PCR方法,线性为101～1010copies/μl;灵敏度达50 copies/μl;批内CV为6.1%,批间CV为6.5%,日间CV为6.8%;特异性为100%,与其他肝炎病毒无交叉反应.与紫外定量方法比较,结果差异无显著性,且高度相关.结论 以自身猝灭荧光探针建立的HCV荧光定量PCR检测方法,灵敏度高、特异性强,为新型试剂盒的开发奠定了基础.

摘要:目的 研究慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓间质干细胞(MSCs)生长活性及干细胞因子(SCF)表达水平,探讨MSCs在CML发病中的作用.方法 以慢性期CML患者为实验组,健康人为对照组,抽取骨髓液行MSCs体外培养,动态观察细胞形态并进行计数、绘制生长曲线;取第3、4代MSCs提取总RNA,逆转录,real-time PCR法检测SCF mRNA表达水平.结果 慢性期CML患者骨髓MSCs生长活性较健康人无明显差别;实验组MSCs表达SCF mRNA水平较对照组明显高(P＜0.05).结论 CML患者骨髓MSCs异常表达SCF参与CML发病,对其检测有指导诊断意义.

摘要:涂片抗酸染色镜检仍是结核病诊断的经典方法.因此,寻找一种易于控制实验条件和标准化操作的抗酸染色方法非常必要.我们用水浴蒸汽加热代替原火焰加热进行抗酸染色,具体操作方法报道如下.

摘要:目的 研究核磷蛋白A型突变体基因转染对人髓性白血病细胞系体外增殖的影响.方法 构建含核磷蛋白A型突变基因(NPM-mA)的真核表达质粒pEGFPC1-NPM-mA,选择NPM-mA阴性、抑癌基因p14ARF有无缺失的两株人髓性白血病细胞KG-1a和K562作为靶细胞,将pEGFPC1-NPM-mA重组质粒和pEGFPC1空质粒分别转染白血病细胞,以未转染组为对照.用RT-PCR和免疫组化来分析转染细胞目的基因mRNA和蛋白质的表达.采用台盼蓝拒染法计数活细胞,绘制转染前后生长曲线,观察细胞体外生长的改变.结果 转染后的两种白血病细胞株表达NPM-mA mRNA,胞浆内NPM-mA蛋白阳性,符合NPM突变蛋白胞质移位的特点.细胞生长曲线显示,转染NPM-mA质粒的KG-1a细胞较空质粒转染和未转染组细胞生长速度明显加快,而转染NPM-mA质粒的K562细胞则较对照组细胞生长明显受抑制(P＜0.05).结论 NPM-mA基因稳定转染可影响白血病细胞的增殖活性,在无ARF缺失时NPM-mA突变体可促进白血病细胞体外生长.

摘要:传统诊断系统性红斑狼疮(SLE)的免疫学指标主要有抗双链DNA(dsDNA)抗体、抗Sm抗体、抗核抗体(ANA).前两者特异性好,而敏感性差.

摘要:目的 诱导家蝇产生抗菌活性肽,鉴定其抗菌活性.方法 家蝇经针刺损伤感染大肠埃希菌,免疫诱导24h后制成组织匀浆,经低温盐析、超速离心、Sephadex G50层析、RP-HPLC等技术分离纯化抗菌肽.K-B法和稀释法测定抗菌活性.结果 家蝇体内含有抗菌活性成分,家蝇经损伤免疫诱导后分泌抗菌肽的量明显增加,经分离纯化得到了一个色谱纯的抗菌活性肽.该抗菌肽对标准菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)和金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)均有抗菌活性,其MIC分别为2.4 μmol/L、3.6 μmol/L和4.8 μmol/L.结论 免疫诱导可促进家蝇抗菌肽的分泌,分泌的抗菌肽有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有抑制作用.

摘要:

摘要:目的 探讨DNMT3B和肝癌发生的关系.方法 用实时荧光定量RT-PCR方法分析正常肝细胞系、肝癌癌旁细胞系及肝癌癌细胞系中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达谱,以及DNMT3B表达抑制后在肝癌细胞系SMMC-7721中出现表达上调的与肿瘤发生相关的基因PDCD4和MBD3的表达.结果 DNMT1,DNMT3A,DNMT3B在肝癌细胞系中存在高表达的趋势,表达水平一致性的明显高于肝癌癌旁和正常肝细胞系,提示这些酶与肝癌的发生相关.结论 DNMT3B表达抑制后肝癌细胞系SMMC-7721中与肝癌发生相关的MBD3和PDCD4基因表达水平上调,表明DNMT3B沉默后,诱导了下游肿瘤抑制基因的过表达,推测DNMT3B在肝癌发生中通过某种机制调控下游肿瘤抑制基因的表达.

摘要:目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎(RA)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析90例RA患者及95例正常对照组的TGF-β1基因启动子-509C/T多态性.结果 RA组与正常对照组-509C/T基因型频率分布有显著差异(P＜0.05),-509 CC基因型RA组高于对照组(33.3%vs 21.1%),而-509TT型明显低于正常对照组(21.1%vs 36.8%);RA患者组-509位点的等位基因频率与正常对照组也有显著差异(P＜0.01),RA组C等位基因频率显著高于对照组(56.1%vs42.1%),T等位基因频率低于对照组(43.9%vs 57.9%).结论 TGF-β1基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎显著相关.

摘要:目的 建立总甲状腺素(TT4)时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)竞争检测法.方法 用羊抗鼠IgG包板,对应的抗T4抗体(Anti-T4)为竞争抑制抗体,用Eu3 标记T4-BSA做标记物,以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,竞争法TrFIA检测人血清中的TT4.结果 TT4-TrFIA的灵敏度达6.895 nmol/L(1.000 nmol/L=0.7778 ng/ml);批内CV为4.12%～5.62%,批间CV为5.58%～8.61%;特异性好;平均回收率为99.16%;线性范围在11.0～300.0 nmol/L之间;热稳定性好;与TT4微粒子酶免疫分析技术(MEIA)比对,相关系数达0.9544.结论 建立的TT4-TrFIA法具有灵敏度高,特异性强,稳定性好,测定范围宽,检测时间短和非放射性等优点,具有良好的应用价值.

摘要:目的 了解湖北省汉族正常人群中MICA等位基因的分布,为研究MICA基因与疾病的关系提供实验基础.方法 采用PCR-SSP方法对193例湖北地区汉族正常人群MICA基因外显子2～4的多态性进行分析.结果 MICA各等位基因分布频率存在差异,其中以MICA*00801/02等位基因频率最高(33.7%),其次为MICA*010(18.4%)、MICA*00201/020(13.9%)和MICA*01201/02(9.6%),频率最低的是MICA*005(0.5%)和MICA*027(0.5%).结论 湖北地区汉族人群MICA等位基因的构成与其他人群之间存在差异,有自己的分布特征.

摘要:有关肝硬化患者血清LPS、TNF-α和NO水平的研究报道不多,我们对此进行了探讨.现将研究结果报告如下.

摘要:目的 探讨单细胞PCR用于妊娠前HLA诊断分型.方法 分别采用碱、蛋白酶和冻融裂解法制备单细胞DNA模板,然后采用多重PCR分别扩增HLA-A,HLA-B基因的第2、3外显子和第2内含子区域,HLA-DrB1基因的第2外显子区域.结果 酶裂解法可有效制备单细胞DNA模板,单细胞DNA扩增成功率95%,所设计引物可有效扩增HLA-A、B和DrB1序列,全部操作可在6 h内完成.结论 本研究建立的巢式多重PCR技术对单细胞HLA分型具有较高的扩增效率,操作时间短,可望应用于临床妊娠前诊断.

摘要:目的 建立检测pokemon基因表达的实时荧光定量PCR的方法,用以研究pokemon在白血病细胞、多种肿瘤细胞株及胃癌组织中的表达水平.方法 通过RT-PCR、T-A克隆、real-time PCR等方法精确测定并比较pokemon基因在白血病细胞、人结肠癌细胞株(SW480)、人胃癌细胞株(SGC)、人肺癌细胞株(LTEP)、人髓系白血病细胞株(U937)、人前列腺癌细胞株(PC3)、人宫颈癌细胞株(HELA)、人内皮细胞株(UEVC-304)、健康人外周血单个核细胞(PBMC)、胃癌组织中的表达水平.绘制pokemon基因real-time PCR的标准曲线.结果 急性淋巴细胞白血病(ALL)中pokemon的表达显著高于急性粒细胞白血病(AML)和慢性粒细胞白血病(CML)及健康人PBMC(P＜0.05);SW480中的表达量明显高于SGC、LTEP、U937、PC3、HELA和UEVC-304(P＜0.05);胃癌组织表达量高于胃癌旁组织,阳性率为5/7.结论 建立的测定pokemon基因表达的real-time PCR方法稳定、准确,pokemon基因可以作为某些肿瘤的一个新的靶点,其表达水平的检测可作为判断某些肿瘤发生的参考指标.

摘要:精子活力与生育关系密切,精子运动速度减慢是不育症的原因之一.本文报告精子制动抗体水平高低与精子活力的关系,探讨男性不育的病因与治疗依据.

摘要:目的 研究香加皮提取物杠柳苷对Stat5信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法 MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察肿瘤细胞的周期变化和凋亡,western blot法检测杠柳苷作用前后人肝癌细胞株SMMC-7721细胞内Stat5蛋白质表达.结果 杠柳苷明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,使细胞周期停滞在G2/M期,并能够诱导SMMC-7721细胞凋亡.杠柳苷作用后,细胞核内的Stat5蛋白量降低而胞浆中的量未见明显改变.结论 香加皮杠柳苷能够抑制Stat5信号转导通路,进而抑制SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡.

摘要:目的 通过对98例血小板增多症患者血象、骨髓铁染色及铁代谢结果的回顾性分析,了解血小板增多患者在确立诊断时机体的含铁状况,协助鉴别诊断.结果 血小板＜800×109/L的患者中缺铁性贫血占40.8%;而血小板≥800×109/L的患者中原发性血小板增多症占81.5%,其中有2例患者铁蛋白水平低于正常值(占9.1%),而血清铁水平正常.结论 对于血小板数在(400～800)×109/L的患者,继发性血小板增多的可能性更大;血小板计数≥800×109/L的患者中绝大部分可以诊断为原发性血小板增多症,但仍需要排除可伴有血小板增多的其他骨髓增殖性疾病(如慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症等)以及同时合并反应性血小板增多的情况.

摘要:动力及吲哚是鉴定细菌的2项重要指标.在半固体培养基中加入氯化三苯基四氮唑(TTC),细菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚与TTC作用,生成玫瑰吲哚而呈红色.

摘要:目的 探讨磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)基因在膀胱移行细胞癌表达及临床意义.方法 采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测27例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱对照组中PLCε mRNA表达,分析其与膀胱病理学特征的关系.结果 PLCεmRNA在膀胱移行细胞癌的表达显著高于正常膀胱组织(P＜0.01),PLCε的表达和膀胱移行细胞癌分期有关(P＜0.05)而与分级无关(P＞0.05).结论 PLCε基因在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,可能是未来检测膀胱移行细胞癌一种新的有价值的肿瘤标志物,同时也可能成为膀胱肿瘤生物学治疗中一个新靶点.

摘要:流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)是由脑膜炎奈瑟菌感染人体后引起的急性呼吸道传染病,冬春季发病率高,传染性强,病死率高[1].

摘要:目的 建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达.方法 根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR Green Ⅰ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18S rRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标.结果 线性范围为5.0×103～5.0×109copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%～8.71%,批间CV为1.52%～12.38%.食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18S rRNA浓度的对数比值(-x±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P＜0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调.结论 RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性.

摘要:我所STD实验室发现,4例梅毒患者血清使用TPPA法进行抗HIV抗体初筛检测时出现对照孔和致敏孔双凝集现象,而ELISA法进行抗HIV抗体初筛检测及省艾滋病确认实验室检测结果均为阴性.

摘要:目的 研究氨基苯酚硼酸(APB)和克拉维酸(CA)检测阴沟肠杆菌ESBLs的效果.方法 将单酶抑制剂CA加入到底物头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)和双酶抑制剂CA/APB加入到底物CAZ、CTX,检测61株阴沟肠杆菌ESBLs,利用PCR检测此61株菌的ESBLs基因,比较酶抑制剂增强试验检测和基因检测阴沟肠杆菌ESBLs的结果.结果 用CAZ和CTX为底物,单酶抑制剂CA分别检测到产ESBLs菌28株、14株;双酶抑制剂CA/APB分别检测到产ESBLs菌28株、44株;PCR检测到ESBLs基因阳性47株.结论 用双酶抑制剂增强试验可检测阴沟肠杆菌ESBLs.

摘要:目的 建立测定血液中碳氧血红蛋白(HbCO)含量的方法.方法 采用双波长吸光度比值法测定血液中HbCO含量,以HbCO饱和度＞10%为CO中毒诊断标准.结果 还原血红蛋白(Hb)的最大吸收峰波长在431.5 nm处,HbCO的最大吸收峰波长在421.5 nm处,健康人血液中HbCO饱和度平均1.65%.结论 采用双波长吸光度比值法检测血液中HbCO含量,简便易行,适用于急性CO中毒的快速诊断.

摘要:目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇铁储备的变化及其与胰岛素抵抗的关系.方法 1 152例孕妇按血糖筛查和糖耐量试验结果筛选出GDM孕妇42例(GDM组),随机选择糖耐量正常孕妇42例(normal glucose tolerence,NGT组),分别测定2组孕妇的空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)、血清铁蛋白(SF)、血清可溶性转铁蛋白受体(sTfR)以及sTfR与SF对数的比值(sTfR/lgSF),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)以评价胰岛素抵抗,并对两组孕妇的相应指标作对比和相关分析.结果 GDM和妊娠期糖耐量受损(GIGT)的患病率分别为3.65%和11.81%;与对照组相比,GDM组的FPG、FIns、SF和HOMA-IR明显升高,而sTfR、sTfR/lgSF明显下降,其间差异有显著意义(P＜0.05);GDM组孕妇血清sTfR/lgSF水平与FIns和HOMA-IR呈负相关(r值分别为-0.534、-0.620,均P＜0.05).结论 铁储备与GDM患者胰岛素抵抗密切相关,可作为GDM防治新的着眼点之一.

摘要:

摘要:目的 理性化地设计我室肿瘤标志物检测方法室内质量控制的个性化方案.方法 依据美国CLIA'88能力验证计划(PT)及欧洲各质控组织建议的分析质量要求确定适合我室的常见肿瘤标志物的临床允许总误差(TEa),以长期室内质控数据计算不精密度(CV%)和参加卫生部临床检验中心的PT结果确定不准确度(bias%),应用Westgard网站推荐的几个质控工具分别绘制方法决定图并评价方法的性能,根据检测方法过程能力和稳定性进行质控方法的初步选择,并用功效函数图确认质控方法的性能和达到特定质量保证水平时不同质控方法需要检出的临界误差大小,同时建立操作过程规范图.结果 各肿瘤标志物均可根据其分析方法性能特征选择合适的个性化的质控方案进行室内质控.结论 通过Westgard网站质控工具的使用,建立适合本室肿瘤标志物检测方法的质控方案,既保证肿瘤标志物测定结果能够满足临床的质量要求,又能达到节约质控成本的目的,通过积极查找并解决一些不满意方法存在的问题,可进行持续质量改进.

摘要:目的 比较血清蛋白质电泳自制质控品和Helena质控品的性能,探讨自制质控品在血清蛋白质电泳室内质量控制中的应用.方法 用美国Helena SPIFE 2000全自动快速电泳分析系统,分别测定Helena质控品和自制质控品的批内精密度、凝胶板间的差异、自制质控品的日间精密度和稳定期.结果 自制质控品与Helena质控品相关性好,电泳后蛋白质各组分的批内CV均小于5%;2种质控品在琼脂糖凝胶板间的CV也均小于5%;自制质控品的日间CV除α1球蛋白7.36%、β球蛋白5.50%外,其余均小于5%.结论 自制质控品的性能符合室内质量控制的要求,可在常规工作中应用.

摘要:我科今年初购买了一台DX-800贝克曼生化分析仪,该仪器配套消泡剂NO FOAM,价格昂贵,我们应用国产的消泡剂磷酸三丁脂(TBP)来代替原装进口液,其消泡抑泡功能以及对检测结果的影响方面与进口原液相比没有明显的差异.

摘要:目前,血栓与止血的检测方法已由筛查发展到诊断试验;由手工检测发展到自动化仪器检测;由观察试验的终点发展到观察试验的功能;由一个试验一种方法发展到一个试验多种方法检测;由单个基因突变分析发展到基因总体分析等,现以系统生物学分析技术和多参数仪器检测为例作一叙述.

摘要:血栓与止血相关疾病有不断上升的趋势,血栓与止血的检验技术、诊断项目及其评估体系也都随之有新的发展. 1 新技术及其应用 血栓与止血检验是从不同环节了解血栓与止血相关疾病的发病原因及病理过程,试验项目有筛查试验和确诊试验.

摘要:系统性红斑狼疮(SLE)可导致人体多系统、多器官的损伤.肾脏是SLE发展中极易累及的器官,狼疮性肾炎常是SLE患者死亡的主要原因.

摘要:随着干细胞生物学研究的发展以及对肿瘤发病机制认识的不断深入,越来越多的证据显示肿瘤可以看作是干细胞生长调控机制失调产生的异常组织.

摘要: