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摘要:目的 回顾性分析Platelia Aspergillus EIA法检测血清半乳甘露聚糖（GM）对侵袭性曲霉病（IA）的诊断价值。方法 根据诊断标准回顾性地将诊断分为确诊、临床诊断、拟诊及排除IA，并根据患者的基础疾病及是否接受影响免疫功能的药物分为：恶性血液病及造血干细胞移植术后（HSCT）组（A组），使用了影响免疫功能药物但非恶性血液病及HSCT患者组（B组），非恶性血液病及HSCT且未使用影响免疫功能药物的患者组（C组），分析GM实验在各组患者中的以及总的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。 结果 781例患者，最终确诊8例，临床诊断33例，拟诊189例，排除IA 551例。230例不能排除真菌感染的患者中160例GM阳性，阳性率69.6％，其中确诊6例，临床诊断24例，拟诊130例。GM实验总的敏感性、特异性、阴性预测值分别为73.2%、81.7%、97.6%。在不同类型的患者中敏感性和特异性存在差异，A组的敏感性、特异性分别为85.7%、88.4%，B组为81.2%、81.4%，C组为45.5%、78.7%；不同类型的患者GM试验结果的吸光率指数（AI）的中位数分别为A组2.78，B组1.82，C组0.585；A组、B组与C组的敏感性、特异性和AI值分布上有显著差异（P<0.05）。至少68.0%真菌培养阳性患者GM阳性时间早于培养阳性2~11d。结论 Platelia Aspergillus EIA法检测GM对IA高危患者尤其是恶性血液病及HSCT患者、使用了影响免疫功能药物的其他患者有早期诊断价值，连续监测患者的GM水平，有助于了解疾病的进展程度、对治疗的反应性及预后；但在非血液病且未使用影响免疫功能药物的患者中其诊断价值有限。

摘要:目的 建立检测人血清中抗烟曲霉特异性抗体的ELISA法，评估该法在侵袭性烟曲霉病（IA）诊断中的价值。方法 用沙氏液体培养基震荡培养烟曲霉，TCA/丙酮沉淀法分离菌体蛋白和培养上清中的分泌蛋白。用烟曲霉播散感染的家兔血清及确诊IA患者血清，分别与菌体蛋白和分泌蛋白进行免疫印迹分析，选择反应强的分泌蛋白作为包被抗原，建立测定抗烟曲霉特异抗体的ELISA，并对方法的精密度和特异性进行考察、确定cut off值。对实验动物模型血清以及5例确诊、24例临床诊断为IA的患者血清样本进行测定，并与血清半乳甘露聚糖（GM）测定结果进行比较。结果 免疫印迹结果显示培养获得的烟曲霉分泌蛋白与感染动物和病人血清均呈现强反应，以其作为包被抗原建立的ELISA法精密度良好，批内CV＝12.0%，批间CV＝8.1%；阻断试验证实此法对烟曲霉抗体具特异性。依据200份健康人血清测定结果，取吸光度（A）值1.03 作为cut-off值。健康人抗体阳性率为2.0%（4/200），IA患者阳性率41.4%（12/29），二者差异显著（P＜0.01）。2例临床诊断病人血清GM试验阴性，但抗体阳性，占8.3%（2/24）。实验感染的家兔均在感染后1周内测出抗体，且抗体滴度快速上升。结论 建立了检测抗烟曲霉分泌蛋白抗体的ELISA法，在IA早期诊断中具有潜在应用价值。

摘要:目的 建立流式微球技术检测血小板特异性自身抗体方法，并对方法学及临床应用进行初步探讨。方法 用包被抗血小板膜糖蛋白（GP）Ⅰb、Ⅱb、Ⅲa、Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体的微球捕获与血小板GP结合的特异性抗体，加入FITC标记羊抗人IgG抗体后用流式细胞仪检测分析。结果 特发性血小板减少性紫癜（ITP）组4种单抗荧光强度比值与非ITP血小板减少组和正常对照组有显著性差异（P＜0.01）；若将ITP组患者4种单抗荧光强度比值分别大于正常对照组上限1.37、1.24、1.48和1.19判断为阳性，则流式微球技术检测血小板特异性自身抗体的敏感性为73.17%，特异性为94.3%；4种单抗联合检测总体敏感性明显高于改良间接单抗特异的血小板抗原固定试验（MAIPA）（P＜0.05)，且大于各单个抗体检测敏感性。结论 流式微球技术可以简便、快捷的检测血小板膜糖蛋白特异性抗体，联合检测多种自身抗体可以提高检测阳性率，对于ITP的诊治具有一定的临床价值。

摘要:目的 评价杂交捕获二代（HC-II）和实时荧光定量PCR （real-time PCR）两种人乳头瘤病毒（HPV）检测法的一致性；探讨两法筛查宫颈癌及其癌前病变的敏感性和阴性预测值; 为实时荧光定量PCR试剂盒的应用提供临床资料。方法 对877名就诊的妇女用HC-II和real-time PCR两种方法检测HPV，并进行宫颈液基细胞学检查(LCT)，其中任一结果异常者再进行组织病理检查。结果 877名妇女中有804名两种HPV检测法结果一致，总符合率达91.7%，一致性检验Kappa值为0.792。在对高级别宫颈上皮内瘤样病变（CIN）的检测中，HC-II和real-time PCR的敏感性分别为96.7%和94.6%，阴性预测值分别为99.5%和99.2%。结论 real-time PCR与HC-II 检测具有很好的一致性，可用于宫颈癌及其癌前病变的筛查。

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摘要:目的 检测、分析SLE患者血清氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。方法 采用ELISA检测47例SLE患者和42例健康对照者血清ox-LDL, 同时对受检者常规血脂水平进行测定。 结果 SLE患者ox-LDL水平显著高于对照组[（143.40±65.36) mg/L vs (65.77±26.19) mg/L, P<0.01], 总胆固醇、三酰甘油、LDL-胆固醇 (LDL-C) 和载脂蛋白B (apo B) 等常规血脂水平也明显升高。以对照组ox-LDL水平的x±s值为cut off 值, SLE组37例高于此值（敏感性78.7%），健康对照组6例异常（特异性85.7%)。多因素分析显示, 患者组ox-LDL水平与LDL-C显著正相关。结论 SLE患者血清ox-LDL水平升高，检测ox-LDL水平有助于预测SLE患者As的发生风险。

摘要:目的 探讨人血清CA125和人附睾蛋白4（human epididymis protein 4,HE4）水平在卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断中的价值。方法 测定187例女性血清标本，其中卵巢癌92例,卵巢良性疾病39例，健康体检女性56例，用微粒子酶免疫法（MEIA)和ELISA法分别测定血清CA125和HE4含量。结果 卵巢癌组CA125和HE4水平明显高于其他两组，差异有统计学意义（P<0.01）。健康对照组和良性疾病组HE4比较差异无统计学意义（P>0.05）。以卵巢良性疾病作参照，单独检测血清HE4水平对卵巢癌诊断的敏感性为57.6%，低于单独检测CA125的77.2%；但其特异性为97.0%，高于CA125的85.0%。以二者其中之一高于参考值即视为阳性时，联合检测HE4和CA125对卵巢癌诊断的敏感性为94.6%，特异性可达85.0%。结论 联合检测血清CA125和HE4有助于卵巢良恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断。

摘要:目的 探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者抗核抗体（ANA）特殊荧光模型特点及其诊断价值。方法 对62例PBC患者血清及515例对照血清用欧蒙公司试剂检测ANA特殊荧光模型及其滴度并用免疫印迹法确认。结果 62例PBC患者中49例有ANA的特殊荧光模型，阳性率为79.0%，与对照组比较有统计学意义(P<0.05)，而且83.7%的特殊荧光模型都为≥1000的高滴度。特殊荧光模型混合模型的靶抗体检出率要高于单一特殊荧光模型。 结论 ANA的特殊荧光模型与PBC密切相关，尤其是其中的混合模型（≥2种的特殊荧光模型）对于PBC具有重要诊断价值。

摘要:目的 以虾蛋白为抗原检测研究对象血清虾过敏原特异性IgE，为研制诊断试剂提供实验基础。方法 制备刀额新对虾提取物作为过敏原，包被酶联反应板，用间接ELISA法检测1301例健康人、135例疑似虾过敏症患者血清中的特异性IgE，统计分析不同人群对虾过敏原的特异性IgE反应。结果 1436例血清中，虾过敏原特异性IgE阳性183例（12.74%），其中，学生阳性率为6.95%(61/878)，教职工阳性率15.60%(66/423)，疑似虾过敏者阳性率41.48%(56/135)，不同人群阳性率有极显著差异(χ2 =129.24，P＜0.01)。结论 以虾提取物为过敏原检测血清特异性IgE有诊断价值，可为虾类食物过敏症的诊断和防治提供实验室指标。

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摘要:目的 构建针对转酮醇酶样基因1（TKTL 1）特异性小干扰RNA（siRNA）真核表达载体并检测其沉默效应。方法 采用人U6 SnRNA启动子，分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的TKTL1靶序列的反向重复序列，置于pEGFP-C1-U6质粒载体中，构建成TKTL1短发夹环RNA，产生重组质粒pEGFP-C1-U6/TKTL1，分别用PstⅠ和SalⅠ酶切鉴定及测序分析，并将重组质粒转染人结肠癌细胞株LoVo，通过RT-PCR检测TKTL1基因表达水平的变化。结果 酶切鉴定与DNA测序分析证明TKTL1基因的siRNA表达载体构建正确，RT-PCR结果表明TKTL1基因的表达水平明显降低。结论 成功构建了针对TKTL1基因的siRNA表达载体，转染LoVo细胞后可显著抑制TKTL1基因表达。

摘要:目的 原核表达人sCR1分子胞外区，制备多克隆抗体，建立双抗体夹心ELISA法。方法 提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a- sCR1。转化大肠埃希菌，用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白，以其免疫家兔制备抗血清。经纯化并鉴定特异性后建立双抗体夹心ELISA法检测血清中sCR1水平，探讨其对慢性病毒性肝炎及活动性SLE患者的诊断价值。结果 研制的兔抗人sCR1多克隆抗体ELISA法效价为125 000,纯度和特异性较好。30例健康献血者血清中sCR1为（39.8?±7.9）ng/ml；22例慢性病毒性肝炎患者为（48.5±24.7）ng/ml；9例活动性SLE患者为（36.3±17.6）ng/ml。结论 制备的兔抗人sCR1抗体效价及特异性较好，用其建立的双抗体夹心ELISA法有望用于临床血清学的诊断。

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摘要:目的 对链霉亲合素（Streptavidin，SA）预包被酶联反应板的优化方法进行研究，比较干法、湿法包被的优越性。方法 通过对包被缓冲液、SA浓度、17种市售反应板的比较试验，得出SA包被的较优条件。结果 选择洁特高亲和力板，采用碳酸缓冲液干法包被，37 ℃温育16 h至全干，达最佳包被效果，此时SA浓度为2 μg/ml。干法包被的孔间差2.95%，批间差7.37%，37℃保存7 d结合生物素的效果无显著改变。生物素结合量为1 ng/孔，是国产SA预包被反应板的5倍。结论 用干法预包被SA优于传统的湿法包被，效果等同甚至超过现有进口SA预包被板。

摘要:目的 研究一氧化氮（NO）供体（硝普钠，SNP）对大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响及其机制。方法 大鼠睾丸间质细胞原代培养12 h后，用不同浓度的SNP（0,10^-8,10^-6,10^-4 mol/L）分别处理4、8、12 h，用化学发光法检测细胞上清睾酮（T）水平的变化；western blot法分析间质细胞内3β-HSD（3β-羟基类固醇脱氢酶）和annexin 5（膜联蛋白5）的变化。结果 10^-4 mol/L的SNP处理间质细胞8 h后，睾酮水平较对照组上升23%(P<0.05)；10^-6 mol/L的SNP处理12 h后，睾酮水平较对照组上升28%（P<0.05)，10-^-4 mol/L 的SNP处理12 h，较对照组升高37% (P<0.05)。western blot结果显示，SNP的刺激对3β-HSD的表达无显著影响。不同浓度的SNP刺激间质细胞4 h和8 h后，annexin 5表达量与对照组比较无显著差异(P>0.05)；10^-6 mol/L的SNP刺激12 h后，annexin 5表达量达到最高水平，较对照组升高55%（P<0.05）；10^-4 mol/L的SNP处理12 h，annexin 5表达量较对照组升高48%（P<0.05）。结论 SNP在低浓度范围内促进大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮，且睾酮的分泌对SNP具有时间和剂量的依赖性；SNP刺激睾酮分泌的过程并非通过3β-HSD介导，但可能与annexin 5表达有关。

摘要:目的 研究雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠血管内皮生长因子（VEGF）基因表达的影响，探讨其在治疗类风湿关节炎中的抗血管生成机制。方法 建立大鼠CIA模型，造模成功后灌胃给药，动物分为正常组、模型对照组、沙利度胺组（作为阳性对照）、雷公藤多苷组，采用实时荧光定量PCR法检测大鼠不同组织（肺、心、肝、肾、滑膜）中VEGF的表达，观察雷公藤多苷对VEGF基因表达的影响。结果 雷公藤多苷组、沙利度胺组大鼠各组织中VEGF mRNA均低于模型对照组（P<0.05），与沙利度胺组比较无明显差异（P>0.05）。结论 雷公藤多苷对CIA大鼠VEGF的表达有抑制作用。

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摘要:目的 研究哈尔滨地区铜绿假单胞菌外膜蛋白D2（OprD2）含量改变与亚胺培南（IMP)耐药之间关系。方法 采用超声破碎法提取42株对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌OprD2，进行SDS-PAGE电泳，利用水杨酸盐抑制试验确定OprD2的位置，通过凝胶分析软件分析OprD2的相对含量，并与敏感组对比。 结果 42株对IMP耐药的铜绿假单胞菌中，OprD2完全缺失的有11株，减少的有18株，与敏感组相比OprD2的相对含量明显降低。 结论 哈尔滨地区铜绿假单胞菌OprD2含量的减少或缺失是其对IMP耐药的主要原因之一。

摘要:目的 了解大庆地区革兰阴性杆菌中SHV型ESBLs基因型的分布状况。方法 采用双纸片协同法(DDS)、PCR法，检测ESBL阳性革兰阴性杆菌中的SHV基因。结果 254株临床分离的多重耐药革兰阴性杆菌中共检出26株菌携带SHV基因，分别为SHV-28、SHV-12、SHV-5、SHV-1以及SHV-11五种基因型。携带blaSHV基因的细菌主要为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌。结论 在大庆地区首次检出SHV-28，SHV- 12，SHV-5型ESBLs基因，首次检出SHV-1，SHV-11型β-内酰胺酶基因；大庆地区革兰阴性杆菌携带多种类型SHV型ESBLs基因。

摘要:目的 探讨血液分析仪对低值血小板的计数误差。方法 将Beckman-Coulter LH-750和Sysmex XE-2100全自动血液分析仪检测的120例血小板数≤50×10⁹/L的新鲜血液常规标本，同时用血小板计数参考流式细胞术法测定，用Kappa和相关回归等统计方法分析血液分析仪对其检测的准确性。结果 全自动血液分析仪在血小板计数（0～50）×10⁹/L时，与参考方法血小板计数结果的符合率均＞90%，Kappa值均＞0.80。但在血小板计数≤15×10⁹／L 时，与参考方法结果符合率仅＜75.0%～82.3%，Kappa值95%的可信限下限均＜0.80。结论 全自动血液分析仪对低值血小板计数的准确性较好，但随着血小板数值的降低，其准确性有所下降。当血小板计数≤15×10⁹/L时，血液分析仪对血小板的计数有一定误差，应重视复核，有条件者建议采用流式细胞术（FCM）复核。

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摘要:目的 对BC-3200三分类全自动血细胞分析仪的主要性能进行评价。方法 依照ICSH、CLSI、FDA等标准对BC-3200的本底、携带污染率、重复性、精密度、线性范围、可比性等项目进行评价。结果 本底、携带污染率、重复性均在设定范围内；全血细胞数（CBC）参数有较好的精密度，WBC、RBC、HGB的CV值均小于6%；WBC、RBC、HGB、PLT有良好的线性（相关系数r>0.9980）；与A^c.T diff 2对比，WBC、RBC、HGB、PLT的相关系数r>0.9800；仪器白细胞分类与人工分类比较，淋巴细胞（L%）、中间细胞（Mid%）、中性粒细胞（N%）相关系数r分别为0.9320、0.6143、0.9217。结论 BC-3200性能良好，与A^c.T diff 2及人工分类具有较好的可比性。

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