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摘要:摘要：目的：评价Ion Torrent测序技术检测Ⅰ型神经纤维瘤(NF1)基因及其突变类型的可行性。 方法：提取12例NF1患者的外周血DNA，用Ion Torrent个体化基因测序仪(PGM)对患者NF1基因进行测序，用Sanger测序法验证NF1基因相应的突变位点，Ion Torrent PGM检测后覆盖缺失的外显子样本用Sanger测序法重新检测。 结果：检测到10例患者存在NF1基因致病突变，其中2种无义突变，5种小缺失或插入突变，1种错义突变，2种剪接突变。2例患者未检测到致病突变。 结论：Ion Torrent测序技术检测含有大量外显子的NF1基因快速、准确；NF1基因突变可导致氨基酸密码子提前终止。

摘要:摘要：目的：用念珠菌烯醇化酶（Eno）、果糖二磷酸醛缩酶（Fba1）及烟曲霉硫氧还蛋白还原酶（TR）3种基因重组蛋白质，建立检测这3种蛋白质特异性抗体的蛋白质芯片法，并进行临床应用评价。 方法：用重组Eno、Fba1和TR作为固相抗原构建蛋白质芯片。对芯片制备及血清中相应抗体测定的反应条件进行优化。对方法的重复性、稳定性及特异性进行考察，并测定临床确诊的侵袭性念珠菌病（IC）、侵袭性曲霉病（IA）患者血清中的相应抗体。 结果：蛋白质芯片以硝酸纤维素膜为固相载体，以Tris-HCl为载样液，重组Eno、Fba1、TR最适点阵浓度分别为0.5 mg/mL、0.04 mg/mL和1.0 mg/mL，用含50 g/L脱脂奶粉的PBS溶液封闭，待测血清稀释度为1∶10。抗Eno抗体和抗Fba1抗体诊断IC的敏感性和特异性分别为67.6%（71/105）和96.5%（299/310），64.8%（68/105）和90.3%（280/310）；联合检测抗Eno抗体和抗Fba1抗体，可将敏感性提高至81.0%。抗TR抗体诊断IA的敏感性为71.4%（30/42），特异性为98.1%（366/373）。 结论：建立了同时检测两种真菌的3种不同抗体的蛋白质芯片方法，敏感性尚可，可用于高危人群的筛查。

摘要:摘要：2013年是HBV表面抗原（HBsAg）发现五十周年。HBsAg的定性测定一直是判定HBV感染的依据，但近年来其定量检查受到临床高度重视，主要原因是定性检查只能反映HBV感染是否存在，而定量检测才能反映病情，指导治疗，判断预后。HBsAg与反映病毒复制的HBV DNA合成途径不同，二者在血清中的表达水平并不平行，这在核苷酸类似物（NAs）的抗病毒治疗时表现尤为突出。因此，为有效控制慢性乙肝（CHB）的病情发展，优化抗病毒治疗策略，追求患者临床结局的改善，HBsAg定量与HBV DNA定量的联合检测已成为肝病专家的共识，并被纳入各种诊断、治疗的方案中。

摘要:摘要： 如何满足临床对严格管理抗菌药物、控制耐药菌和及时诊治感染性疾病的急切需求？如何缩短微生物检验回报时间（TAT），实现微生物检验标本信息在线监控和可追溯性？传统（或手工）临床微生物检验方法和技术如何满足临床需求？临床微生物实验室数字化与信息化建设将可应对上述挑战，它包括分析前用自动化细菌培养平板接种仪，分析中用全自动血培养仪、全自动细菌鉴定和全自动药敏仪以及基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱；分析后用实验室信息管理系统（LIS）、相应的微生物检验的专用软件系统和智能化中间件连接各仪器发出检验报告或在线让临床医师随时查阅微生物检验状态。检验科可从实际情况出发，先局部后全面逐步实现临床微生物实验室的自动化、标准化、数字化和信息化建设。

摘要:摘要：临床微生物检验由于检验项目与标本种类多、检验环节复杂、检验数据多样等特点，一直难以实现检验的自动化和管理的信息化。本文介绍了一种用于临床微生物检验的信息系统平台，通过对微生物检验仪器和检验信息的网络化管理，实现对标本接收、检验流程、检验结果回报以及微生物检验结果的统计分析的信息化管理。通过各种数据接口与医院信息管理系统和其他微生物数据库系统进行数据交换，实现医院范围内的微生物检验信息自动化，为感染性疾病的诊断、治疗、预后提供及时、准确的检验依据。

摘要:摘要： 我院实验室信息系统(LIS)在设计及升级过程中创造性构建了“离线应急处理系统及应急预案”、“二级审核程序”和“让步标本处理方案”三大特色管理模块，分别在增强LIS应急处理能力、提高检验报告符合率和提升检验质量等方面发挥了重要作用。

摘要:摘要：20世纪90年代末，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）技术开始用于病原菌鉴定，目前已逐步用于临床微生物检验工作，对临床感染性疾病的快速诊断意义重大。本文阐述MALDI-TOF-MS技术鉴定微生物的原理和流程、在临床微生物鉴定中的应用和对微生物检验结果回报时间（TAT）改进的作用。

摘要:

摘要:摘要：目的：建立一种基于气阀控制的多通道微流控芯片系统，实现高通量、低成本、快速检测大肠埃希菌O157:H7。 方法：采用集成多条反应通道和控制气阀的微流控芯片，用气阀控制芯片通道内反应的顺序，在通道交叉处构建出10个检测区。然后以免疫荧光技术为检测手段，检测水和粪便标本中的大肠埃希菌O157:H7。 结果：成功建立了一种基于气阀控制的多通道微流控芯片系统，并应用于大肠埃希菌O157:H7的快速检测。此芯片一次可同时检测10个样本，单个样本检测时间少于10 min、试剂消耗量仅为0.5 μL，对大肠埃希菌O157:H7的最低检测限为1×10³ CFU/mL。检测大肠埃希菌O157:H7组的荧光信号（4 122±164）与大肠埃希菌ATCC 25922（2.67±0.45）及伤寒沙门菌（3.33±0.94）比较，差异有统计学意义（t分别为35.78和30.79，P均<0.01）。批内精密度为5.2%。将本法用于模拟临床样品中大肠埃希菌O157:H7的测定，敏感性和特异性分别为62%和100%，与培养法的总体符合率为81%。 结论：于气阀控制的多通道微流控芯片系统可实现高通量、低成本、快速检测大肠埃希菌O157:H7，有望成为一种高效和快捷的新检测方法。

摘要:摘要：目的：对PCR法直接检测标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐药基因mecA的可靠性进行评估。 方法：用经细菌表型鉴定的70株临床标本分离株进行方法学评估，其中MRSA 22株，非MRSA 48株，检测其最低检测限、重复性、灵敏度和特异性。同时对269份临床标本，包括67份痰液、82份血液、68份尿液以及52份无菌体液进行PCR检测和细菌表型鉴定，分析结果符合率。 结果：PCR法的最低检测限为5×10⁴ CFU/mL；菌数5×10⁶和5×10⁴ CFU/mL标本的批内变异系数（CV）为0.81%、0.94%，批间CV为1.48%、2.03%；检测经表型鉴定的菌株，敏感性和特异性均达到100%。痰液标本PCR检测和细菌表型鉴定符合率为98%，血液、尿液和其他体液标本均为100%。 结论：PCR法检测mecA耐药基因，方便、快速且最低检测下限和重复性等性能指标均比较理想，与表型鉴定符合率较高，适于临床应用。

摘要:摘要：目的：建立定量检测HBsAg的化学发光磁微粒免疫分析法。 方法：2株抗HBs单克隆抗体分别标记吖啶衍生物和生物素化，生物素化的抗HBs通过链霉亲合素包被到磁珠上形成致敏磁珠。将待测标本加入吖啶标记的抗HBs（吖啶-抗HBs）与致敏磁珠的体系中，形成致敏磁珠-HBsAg-吖啶标记抗HBs夹心复合物，磁性分离清洗。重复加样1次，磁性捕获分离后激发吖啶衍生物发光，用化学发光分析仪检测光强度，计算标本中HBsAg的浓度。 结果：该法线性方程为Y=0.919X+4.28，相关系数r²为0.99，线性范围为0.019 7~250.00 IU/mL。灵敏度可达0.020 7 IU/mL。0.1、3.2和40 IU/mL样本各重复测定10次的变异系数（CV）值分别为2.70%、4.40%和2.70%。与Abbott公司HBsAg定量检测试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法) 检测40份标本浓度的线性相关方程为Y=0.980 8X+0.209 9，r²=0.99，两法结果差异无统计学意义（t=1.519，P＞0.05）。以10、50、100和200 IU/mL作为检定点，各检定点相对偏差分别为0.18%、1.50%、1.71 %和1.81%。 结论: 建立的方法有较高的灵敏度、合适的线性，同时具备良好的可重复性，与Abbott公司试剂盒检测结果高度相关。

摘要:摘要：目的：探讨2型糖尿病肾病（DN）患者血清25羟基维生素D［25-(OH)D］和C 反应蛋白（CRP）变化及临床意义。 方法：选择2型糖尿病（T2DM）患者148例，体检健康者50例，依据尿清蛋白/肌酐比值（UACR）将T2DM患者分为正常清蛋白（Alb）尿组（UACR<30 mg/g Cr）、微量Alb尿组（UACR 30～299 mg/g Cr）和大量Alb尿组（UACR≥300 mg/g Cr）。用电化学发光法检测血清25-(OH)D，免疫散射比浊法检测CRP，同时检测患者相关生化指标，分析 25-(OH)D与CRP及其他实验指标的相关性。 结果：正常Alb尿组、微量Alb尿组和大量Alb尿组血清25 (OH)D依次降低（P<0.01），微量Alb尿组和大量Alb尿组血清25-(OH)D较正常Alb尿组和健康人对照组降低（P<0.01）。正常Alb尿组、微量Alb尿组和大量Alb尿组血清CRP依次升高，较健康人对照组差异均有统计学意义（P均<0.01）。血清25-(OH)D随病程增加而降低（P<0.01）；而CRP有增高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。血清25-(OH)D与CRP、肌酐（Cr）、尿酸（UA）、磷（P⁵⁺）及UACR呈负相关（r分别为－0.396、－0.198、－0.179、－0.228、－0.793，P均<0.05），与肾小球滤过率（eGFR）呈正相关（r=0.281，P<0.01）。 结论:血清25-(OH)D降低与DN患者肾损伤程度相关，可能参与DN发生与发展。

摘要:摘要:目的：观察糖耐量减低（IGT）患者血清胎球蛋白A（fetuin-A）水平变化的意义。 方法：用ELISA法检测63例IGT患者、61例2型糖尿病（T2DM）患者及42例糖耐量正常（NGT）者血清胎球蛋白A水平；测定体质指数（BMI）、腰臀比（WHR）、空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2hPBG）、糖化血红蛋白A1c（HbA1c）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、空腹胰岛素（FIns）及C反应蛋白(CRP)；用稳态模型计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。 结果：IGT组血清胎球蛋白A［中位数（四分位数］水平［298.1（242.4，347.5）μg/mL］高于NGT组［251.6（197.3，304.8）μg/mL］，P＜0.05，低于T2DM组［345.1（308.7，393.9）μg/mL］，P＜0.05；IGT组中，血清胎球蛋白A水平与FBG（r=0.385，P＜0.01）、2hPBG（r=0.432，P＜0.01）及LDL-C（r=0.187，P＜0.05）呈正相关，与年龄（r=－0.516，P＜0.01）呈负相关,与其他指标无相关性（P＞0.05）。 结论：胎球蛋白A与糖脂代谢紊乱有相关性，可能通过调节糖脂代谢参与T2DM的发生发展。

摘要:摘要：目的：验证在PCR反应体系中加入牛血清清蛋白（BSA）可否提高小鼠骨肉瘤模型floxed Rb1基因杂合子和纯合子的检出率与准确率。 方法：以小鼠骨肉瘤模型子代小鼠基因组DNA为模板，进行Rb1基因的PCR基因分型。对在PCR反应体系中添加适量浓度(0.16 mg/mL)的BSA与不加BSA的PCR基因分型结果相比较。PCR引物序列涵盖Rb1基因外显子19两侧或3′端的LoxP序列。 结果：反应体系中添加BSA后，可成功获得PCR扩增条带：单一650 bp 或247 bp（野生型）、单一700 bp 或295 bp（floxed Rb1基因纯合型）以及650 bp和700 bp（或247 bp 和295 bp）混合条带（floxed Rb1基因杂合型），而反应体系中未加BSA的则无PCR扩增条带产生。 结论：BSA可显著提高floxed Rb1基因的扩增效率，增加了该基因杂合子和纯合子的检出率并排除了假阴性结果，对于难以扩增的靶基因序列的PCR基因分型具有借鉴意义。

摘要:摘要:目的：探讨融合肽CTP-OD1和CTP-OD2对伊马替尼（imatinib）敏感和耐药的慢性粒细胞白血病细胞株（K562、K562G01）的促凋亡生物学效应及其分子机制。 方法：将CTP-OD1、CTP-OD2融合肽分别处理K562和K562G01细胞，用瑞氏染色和DAPI染色检测两种细胞的凋亡形态学变化；western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及pBcr-Abl、pStat5、pCrkL变化。 结果：CTP-OD1和CTP-OD2处理K562和K562G01细胞后，胞浆出现空泡，细胞核碎裂，染色质浓缩、边缘化；western blot结果表明，与阴性对照组相比，融合肽处理组Bax蛋白表达上调（P<0.05），Bcl-2、pBcr-Abl、pStat5、pCrkL蛋白均表达减少（P均<0.05）。 结论：CTP-OD1和CTP-OD2通过抑制Bcr-Abl激酶活性促进imatinib敏感株K562和耐药株K562G01细胞凋亡。

摘要:摘要：目的：探讨miR-544a对肺癌细胞的侵袭和转移能力的影响及其分子机制。 方法：用miRNA芯片对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D进行miRNA谱系分析，并用荧光定量PCR验证其miR-544a表达水平；用Targetscan软件预测miR-544a的靶基因；Transwell实验观察细胞的侵袭转移能力的变化； western blot验证其表达。 结果：miRNA芯片及荧光定量PCR结果显示，与95C细胞（1.00±0.00）比较，miR-544a在95D细胞中表达上调（2.95±0.26，t=12.94，P<0.05）；Transwell实验结果显示，95C转染miR-544a mimic后增加（32.00±1.00，q=18.67,P<0.01），95D转染miR-544ainhibitor后，侵袭和转移能力降低（11.00±1.00，q=13.67, P<0.01）；Targetscan软件预测E 钙粘连素（CDH1）可能为miR-544a的靶基因；western blot显示，95C转染miR-544amimic 后，CDH1表达下调，vimentin表达上调（0.202±0.017，0.574±0.009，q分别为63.86, 9.45，P均<0.01）；而 95D转染miR-544a inhibitor后，CDH1表达上调，而vimentin表达下调(0.769±0.014，0.320±0.020，q分别为18.67, 5.99，P均<0.01）。 结论：miR-544a可能通过下调CDH1和上调vimentin的表达来促进肺癌细胞的侵袭和转移。

摘要:摘要：目的：探讨壳聚糖（chitosan scaffold，CS）支架与细胞的生物相容性，为CS的体内安全应用提供实验依据。 方法：采用细胞形态学和MTT法评价CS支架对人胃腺癌细胞系BGC 823生物学特性的影响。在细胞培养液中分别加入不同浓度的明胶固化CS支架浸提液，倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化，计数并绘制生长曲线；用MTT法检测并计算细胞相对增殖率。 结果：不同浓度的CS支架浸提液对体外培养的各组细胞形态无明显影响，对细胞增殖抑制不明显（P均＞0.05），不同浓度CS支架浸提液的细胞毒性均为0~1级。 结论：CS支架与BGC-823细胞有良好的生物相容性，有望成为理想的医用生物材料。

摘要:摘要：目的：检测男性不育症患者精浆全基因组微小核糖核酸(miRNAs)表达谱，筛选差异表达的miR-106b，探讨其作为男性不育症分子诊断指标的可行性。 方法：收集163例男性不育症患者及126例正常生育男性精浆，分别混合；用Solexa测序技术分别检测弱精症、非梗阻性无精症和正常生育男性的混合精浆中692种miRNAs的表达，用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）对表达异常的miR-106b在单个样本中逐一进行验证。 结果：Solexa测序结果显示，19种miRNAs在不育症患者精浆中的表达量与健康男性相比变化＞2倍，miR-106b在弱精症和无精症患者中分别上调了6.89倍和2.61倍。qRT-PCR结果表明，弱精症组miR-106b含量［中位数（四分位数）］为719.35(518.49,1 183.39) fmol/L，与正常生育组的291.35(148.83,421.56)fmol/L比较，明显升高（U=91.00, P<0.0l）；无精症患者miR-106b的含量则明显降低，为60.07(18.38,292.52)）fmol/L（U=195.00, P<0.0l）。ROC曲线分析显示，miR-106b诊断弱精症和无精症的曲线下面积(AUC^ROC)分别为0.844 (95% CI, 0.734~0.954)和0.720 (95% CI，0.575~0.864)；鉴别弱精症和无精症的AUC^ROC为0.902 (95% CI，0.822~0.982)。 结论：男性不育症患者精浆miR-106b表达水平与正常生育男性存在明显差异，有望成为男性不育症诊断和鉴别诊断的辅助指标。

摘要:摘要：目的：分析江苏地区人群21-羟化酶基因(CYP21A2)拷贝数变异情况，统计CYP21A2基因大片段缺失/转换突变的携带者频率。 方法：收集400例体检健康者外周血标本，用多重连接依赖探针扩增技术（MLPA)进行CYP21A2基因拷贝数检测，对检测发现的大片段缺失/转换突变样本进行位点特异性PCR-酶切多态分析和基因全长测序分析。 结果：400例健康人中389例携带2拷贝CYP21A2基因；11例存在拷贝数变异，其中携带3拷贝CYP21A2基因的个体共10例（2.5%)，CYP21A2基因大片段缺失/转换突变携带者1例（0.25%)。对10例携带3拷贝CYP21A2基因的样本测序分析，发现5例携带p.Gln318X致病突变。结论：江苏地区人群3拷贝CYP21A2基因的携带者频率较高加索人群低，携带者筛查具有一定检出率。

摘要:摘要： 为了更好地适应国际标准管理规范对医学实验室的要求，本文从ISO 15189:2007版与ISO 15189:2012版的不同之处入手，对2012年新版相关条款作详细的解读。并以此作为切入点，旨在加深对实验室质量和能力认可体系的认识。

摘要:摘要：目的：分离和确认2株耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌(E.coli)携带新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)基因。 方法：用法国生物梅里埃公司API20E生化鉴定条和Vitek 2全自动细菌鉴定仪和配套GNS卡鉴定出2株耐亚胺培南和美罗培南的E.coli；并对其进行亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验、IP/IPI E-test试条法协同试验检测金属β-内酰胺酶，对目的菌株进行NDM-1基因PCR特异性扩增，扩增产物测序鉴定；对目的菌株进行质粒接合转移试验分析其耐药机制。结果：2株测试菌亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验、IP/IPI E-test试纸条法协同试验均为阳性，PCR扩增及测序证实为携带NDM-1耐药基因；体外药敏试验除对多黏菌素B和替加环素敏感外，其他广谱抗菌药物包括头孢菌素类、β-内酰胺类加酶抑制剂类、碳青霉烯类、氨基糖苷类和喹诺酮类均呈现高水平耐药，2株接合子E.coli对所有β-内酰胺类药物的MIC值高于受体菌E.coli J53，其中对美罗培南和亚胺培南MIC均提高了8倍以上，头孢他啶及头孢曲松则提高了64倍以上。结论：海南地区出现携带NDM-1基因的E.coli，该基因可在不同菌株之间传递。

摘要:摘要：目的：观察云南保山地区契丹人后裔ABO、Rh血型分布情况。 方法：采集323例研究对象静脉血，进行ABO、Rh血型鉴定。 结果：A、B、O、AB血型表型频率分别为0.424 1(137/323)、0.176 5(57/323)、0.291 0(94/323)、0.107 4(35/323)；Rh（D）阴性占0.93%（3/323），民族指数为1.14。 结论：保山契丹人后裔红细胞血型系统具有南方民族特点。

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