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摘要:摘要：ISO 15189:2012对技术要求的检验过程分别单独列出了对检验程序确认和验证、测量不确定度的要求，并将其改为强制要求。本文参考相关文件，结合我国实际情况，扼要介绍方法性能评价关键指标的基本概念及不同检测系统的实施方案。对配套系统，实验室应进行验证实验，至少包括精密度、正确度和可报告范围；对非配套系统，实验室应进行确认研究，至少包括正确度、精密度、可报告范围及生物参考区间等。以期为临床实验室更合理地评价和应用检测方法提供参考。

摘要:摘要： 方法学性能验证是风险管理的核心内容之一，它直接影响医学实验室检测结果的可靠性。本文对中国合格评定国家认可委员会现场初评的54家医学实验室评审结果进行分析，按不符合项出现频次的高低，列出《医学实验室质量和能力认可准则》中居于前10位的条款，并对其中与方法学性能验证相关的3个重点条款所涉及的不符合项进行归类总结，寻求相应的解决方法，以帮助医学实验室更好地满足《医学实验室质量和能力认可准则》要求，提升检验质量和能力。

摘要:摘要:目的：分析和讨论目前肌酐（Cr）常规测定和校准中可能遇到的问题及参考测量程序在正确度验证中的作用。 方法：使用血清Cr参考测量程序同位素稀释液相色谱质谱法，以及市售4种Cr酶法试剂和3种苦味酸法试剂组成的7种测定系统同时测定正确度验证样品、质控品和受干扰标本，考察不同性质样品在不同分析系统上的表现。 结果：对于正确度验证样品201211，4种酶法系统与参考方法测定值的相对偏差分别为13.2%、-5.2%、-4.3%和10.2%，3种苦味酸法系统的相对偏差分别为5.0%、28.0%、29.5%。对于正确度验证样品201212，酶法系统的相对偏差分别为3.8%、1.4%、-2.0%和3.0%，苦味酸法系统的相对偏差分别为3.7%、6.0%和10.1%。对于疑似受干扰标本，酶法系统的测定均值为66.40 μmol/L，苦味酸法系统测定均值为102.29 μmol/L。 结论：对低Cr浓度的样品，苦味酸法更易受到特异性等因素的干扰。酶法则可能受到药物、还原性等物质的特殊干扰。应正确运用参考测量程序，重视Cr测定的特异性和干扰问题。

摘要:摘要：目的：观察生化分析仪主要性能指标在仪器校准周期内能否满足医药行业标准YY/T 0654-2008文件的要求。 方法：用生化分析仪检定用标准物质对Hitachi、Olympus系列6台生化分析仪的吸光度正确度、精密度、稳定性、线性范围及杂散光、携带污染率、临床指标精密度等性能进行验证。 结果：用两种方法验证吸光度正确度的结果不同；Hitachi 7180的变异系数（CV）为2.7%、吸光度差值为0.053，其余各仪器的CV低于1.5%，差值低于0.01；各生化分析仪的线性范围较宽，携带污染率均＜0.5%，杂散光及临床指标CV均符合文件要求。 结论：生化分析仪在校准周期内，各主要性能指标基本能满足YY/T 0654-2008文件要求；建议相关行业标准在改版时，写明吸光度正确度验证的具体方法，因不同的操作方法会对结果产生较大影响。

摘要:摘要：目的：建立检测人血清抗白念珠菌烯醇化酶(Eno)IgG类抗体的免疫磁珠法，并评估其在念珠菌血症诊断中的价值。 方法：将Eno重组蛋白耦联至磁性微珠上，以辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗人IgG为二抗，优化免疫磁珠法的反应条件，考察其精密度和特异性。收集经血培养确诊的念珠菌血症患者（n=113）、念珠菌定植者（n=50）、细菌菌血症患者（n=30）和健康人对照者（n=100）血清，用免疫磁珠法测定抗Eno抗体，并与ELISA法结果进行比较。 结果：免疫磁珠法测定抗Eno抗体的批内、批间变异系数（CV）分别为8.2%和14.2%，重组Eno抗原对相应抗体的阻断率为91.6%。以吸光度（A）值0.29为cut off值时，诊断念珠菌血症的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特异性与ELISA法比较无统计学差异，但检测流程从37 ℃ 2.5 h缩短至常温1 h。 结论：免疫磁珠法检测抗Eno IgG类抗体简便、快捷、可靠，在侵袭性念珠菌感染研究中具有潜在的应用价值。

摘要:摘要：目的：建立基于gyrB基因扩增检测结核分枝杆菌复合物（MTC）的荧光定量PCR(FQ-PCR)法。方法：根据gyrB基因设计合成引物和探针，建立并评价TaqMan探针FQ-PCR法，并与基于IS6110序列的FQ-PCR法分别检测50例临床标本，比较两种方法的检测结果。结果：建立的FQ-PCR法标准曲线方程为Y=-3.18X+42.84，相关系数（r²）为0.995、扩增效率为106.25%，其检测灵敏度为10²） CFU/mL；MTC中结核分枝杆菌和非洲分枝杆菌阳性，其他分枝杆菌和4株临床其他细菌均为阴性。批内及批间变异系数(CV)均＜2%，重复性良好。本法与基于IS6110序列的FQ-PCR法对50例临床标本的检测结果差异无统计学意义（χ²）=0.06，P>0.05），一致性好(κ=0.94)。结论:基于gyrB基因扩增的FQ-PCR法灵敏度高、特异性强、重复性好，可用于结核分枝杆菌复合物的早期快速诊断。

摘要:摘要：目的：建立抗风疹病毒IgM类抗体（RV IgM）生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法（BA Mac TrFIA）并评价其分析性能。 方法：用鼠抗人μ链单克隆抗体（抗-μ McAb）作为包被抗体，生物素化RV重组抗原为桥接抗原，链霉亲合素标记铕作为示踪物，配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，测定抗RV IgM抗体，并对其检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、试剂热稳定性进行评价，与同类方法学比对检测1 020例样本，比对实验的一致性分析采用Kappa检验。 结果：本方法检测国家检测限参考品L1、L2和L3的结果均为阳性反应（S/CO≥1.00），批内变异系数（CV）＜15.00%，国家阴性参考品符合率为10/10，国家阳性参考品符合率为5/5；本方法的试剂盒于37 ℃恒温放置6 d后，检测性能无明显改变；与珠海海泰公司试剂结果符合率为98.82%，Kappa=0.96。 结论：本方法灵敏度高，特异性强，精密度好；与同类方法学检测结果相关性好，能满足临床应用需要。

摘要:摘要：目的：探讨初诊2型糖尿病(T2DM)患者血清糖类抗原19-9（CA19-9）与胰岛β细胞功能的相关性。 方法：选择初诊T2DM患者59例，健康对照者（NC）59例，均行口服75 g葡萄糖耐量试验（OGTT）及胰岛素释放试验，分别用稳态模型HOMA-β和HOMA-IR评估胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗程度，检测血清CA19-9及其他生化指标。 结果：T2DM患者血清CA19-9水平［中位数（第25、75百分位数）］为14.48（12.05，19.30）U/mL，高于NC组［5.03（4.37，7.38）U/mL］， P＜0.05。糖化血红蛋白A1c（HbA1c）＞7.0% T2DM患者组、HbA1c＜7.0% T2DM患者组及NC组血清CA19-9水平依次下降（P＜0.05）。血清CA19-9水平与总胆固醇（TC）、空腹血糖（FPG）、OGTT-2 h血糖（2hPG）、HbA1c呈正相关（r分别为0.320、0.786、0.7560.782，P均＜0.01），与空腹胰岛素(FINS)、HOMA-β呈负相关（r分别为－0.438、－0.644，P＜0.05或0.01）。以血清CA19-9为因变量，行多元逐步回归分析，有FPG、HbA1c、HOMA-β进入最后方程（P<0.01）。结论：初诊T2DM患者血清CA19-9水平高于NC组，与FPG、HbA1c和HOMA-β相关，可作为判断T2DM患者胰岛β细胞功能障碍的一种生物学标志物。

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摘要:摘要:目的：报告对临床分离的3株马赛分枝杆菌的种型鉴定和特征分析。 方法：对3株临床分离株进行生化鉴定、16S rRNA和rpoB基因测序鉴定，用微量肉汤稀释法进行药敏实验。 结果：生化鉴定无法确定种型，且光滑型/粗糙型菌落差异明显；16S rRNA鉴定结果显示，其与龟-脓肿分枝杆菌群高度同源（相似度>99.7%），联合rpoB基因测序分析可鉴定为马赛分枝杆菌；药敏试验结果显示，其对万古霉素、利奈唑胺、头孢西丁等耐药，其中粗糙型菌耐药性更强。 结论：马赛分枝杆菌是近年来出现的新型致病菌，其粗糙型感染应予以重视。

摘要:摘要：目的：分析狼疮肾炎（LN）患者的免疫功能指标。 方法：选取65例SLE患者，其中35例并发肾炎为LN组，30例未并发肾炎为SLE无肾炎组，以30例体检健康者作为对照组，同时检测各组外周血T淋巴细胞亚群水平及相关血清学免疫指标。 结果：LN患者组外周血CD4+细胞水平、CD4+/CD8+比值及C3水平明显低于SLE无肾炎组及健康人对照组（P<0.05），IgG、IgM、24 h尿蛋白定量、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）水平明显高于SLE无肾炎组及健康人对照组。 结论：LN患者T淋巴细胞亚群数量及补体水平均显著降低，与肾功能损害相关。

摘要:摘要:目的：观察蛋白质磷酸酶2A癌性抑制因子（CIP2A）在慢性髓细胞白血病（CML）患者外周血单个核细胞中的表达及意义。 方法：收集不同临床分期［CML-CP(慢性期)、CML-AP/BP（加速/急变期）］的41例CML患者和35例体检健康者外周血标本，分离单个核细胞，用RT-PCR检测CIP2A mRNA的表达，并对CML患者进行随访。 结果：CML-CP患者CIP2A mRNA阳性率为63.6％（14/22），CML-AP/BP患者阳性率为68.4％（13/19），两组差异无统计学意义（χ²=0.104，P>0.05）；健康人对照组CIP2A mRNA均为阴性。32例随访患者中,CIP2A mRNA阳性患者的死亡率为47.4％（9/19），阴性患者死亡率为7.7％（1/13），差异有统计学意义（χ²=3.960，P<0.05）。 结论: CML患者外周血单个核细胞中CIP2A呈高表达状态，可能CML发生相关。

摘要:摘要：目的：构建大鼠急性心肌梗死（AMI）模型并初步探讨人脐带间充质干细胞 (hucMSCs) 对大鼠AMI损伤的修复效果。 方法：用小动物呼吸机维持呼吸，开胸后快速挤出大鼠心脏，结扎左冠状动脉前降支，并结合双层荷包缝合法构建模型。经心电图，超声心动图和TTC染色多方面验证。尾静脉注射hucMSCs，观察大鼠AMI损伤修复效果。 结果：成功构建了大鼠AMI模型，建模后成活率高（79.2%）。与模型+PBS组左心室收缩期容积［LV Vol;s(μL):164.73±15.54］和左心室收缩期内径［LVID;s(mm):5.77±0.23］相比，模型+MSCs组［LV Vol;s(μL):116.08±9.06］和［LVID;s(mm):4.96±0.17］明显降低，F分别为75.10和107.96，P均<0.01。与模型+PBS组左心室射血分数［LVEF(%):45.55±3.71］和左心室收缩分数［LVFS(%):23.56±2.38］相比，模型+MSCs组［LVEF(%):53.99±2.32］和［LVFS(%):28.76±1.52］明显增高，F分别为65.80和62.94，P均<0.05。HE染色结果表明，模型+MSCs组细胞损伤程度明显轻于模型+PBS组。 结论：成功构建大鼠AMI模型并初步证明hucMSCs可以促进大鼠AMI损伤修复，为进一步研究其机制奠定了基础。

摘要:摘要：目的：探讨羟基喜树碱（HCPT）对人骨髓增生异常综合征（MDS）细胞系MUTZ-1细胞凋亡中生存素（survivin）基因及蛋白质表达的影响。 方法：MUTZ-1细胞与0、1、2、4 μg/mL HCPT共育6 h，用流式细胞术（FCM）检测其细胞凋亡率，RT-PCR检测survivin mRNA的表达水平，免疫细胞化学及western blot检测survivin蛋白质的表达水平。 结果：MUTZ-1细胞与0、1、2、4 μg/mL HCPT共育后，细胞凋亡率升高,分别为（8.58±0.18）%、（12.10±1.04）%、（14.49±0.87）% 和（27.34±1.38）%（F=158.7，P<0.05）；survivin mRNA 表达水平下调,分别为0.87±0.08、0.76±0.03、0.67±0.03和0.45±0.04（F=97.65，P<0.05）；细胞凋亡率与survivin mRNA表达水平呈负相关（r=-0.85，P<0.01）；survivin蛋白质积分值降低,分别为2.36±0.19、1.50±0.11、1.49±0.18和1.06±0.04（F=14.57，P<0.05）；survivin蛋白质表达减少,分别为0.80±0.09、0.34±0.04、0.25±0.02和0.05±0.01（F=37.42，P<0.05）。 结论：HCPT可能通过下调survivin基因转录及蛋白质表达，诱导MUTZ-1细胞凋亡。

摘要:摘要: 白介素-8（IL-8）是一种具有趋化作用的炎性细胞因子，属于CXC（C为半胱氨酸，X为任意氨基酸）趋化因子家族，与其相应受体白介素-8受体1（CXCR1）、CXCR2结合后，通过G蛋白信号传递链引起生物学效应，诱导中性粒细胞、淋巴细胞等聚集到损伤部位，促进肿瘤细胞的增殖、分化和转移，肿瘤部位血管生成，并与肿瘤细胞耐药密切相关。阻断IL-8信号通路或将成为治疗肿瘤的新措施。本文主要综述了IL-8及其受体CXCR1/2与肝癌的关系。

摘要:摘要： 近年来，中性粒细胞在肿瘤中的作用和意义逐渐为人们所认识。不同类型肿瘤患者肿瘤组织中浸润的中性粒细胞数量增加，与预后不良明显有关。但是对于中性粒细胞在肿瘤发生、发展中的作用机制尚不清楚。研究证实，中性粒细胞具有促肿瘤生长、转移、血管生成和抑制免疫的作用。本文主要综述了肿瘤相关中性粒细胞的研究进展。

摘要:摘要： 细菌生物膜（BF）是细菌在生长过程中附着于固体表面相互粘连并将其自身微菌落聚集缠绕其中形成的膜样物。BF内的细菌可逃逸机体免疫防御机制，抵御抗菌药物的杀伤作用，是导致感染反复发作、迁延不愈的重要原因之一。目前临床常用的抗菌药物对BF的清除作用有限。研究发现，枯草芽胞杆菌成熟的BF产生两种活性物质——D-氨基酸(D-amino acids)和3,3′-二氨基二丙基胺(norspermidine)能破坏BF的结构，若联合敏感的抗菌药物可达到彻底消除BF的目的。BF分散物质的发现可能成为治疗BF所致感染的新靶标，为临床提供新思路。本文就新近发现的这两种活性物质进行综述。

摘要:摘要：目的：对特异性沉淀法提取人血浆中低密度脂蛋白（LDL）进行优化，并用一种新手段来表征LDL粒径大小。 方法：用柠檬酸钠-肝素钠缓冲液特异性沉淀人血浆中LDL；用高分辨率Zeta电位及粒度分析仪测定LDL粒径，用透射电镜（TEM）观察LDL的外观形态，并与超速离心法分离得到的LDL的粒径及外观形态进行对比。 结果：用沉淀法分离得到电泳纯级LDL；沉淀法分离得到的LDL粒径为（31.7±1.1）nm，超速离心法分离得到LDL粒径为（32.9±0.8）nm，差异无统计学意义（t=2.00，P＞0.05）；两法分离的LDL形态相似，均为类圆形。 结论：与超速离心法分离LDL相比，沉淀法是一种简单快速的提取LDL的方法，且纯度较高；用高分辨率Zeta电位及粒度分析仪测定LDL粒径简单、快捷、成本较低。

摘要:摘要：目的：探讨Fas/FasL基因多态性与汉族人群乳腺癌发病风险的关联性。 方法：提取250例乳腺癌患者和250例体检健康者外周血基因组DNA，用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术对Fas基因1377G>A,670A>G和FasL基因844T>C位点多态性进行基因分型，用非条件Logistic回归方法计算风险比（OR）及95%可信区间（95%CI）。 结果：与Fas 1377多态性位点GG基因型相比，GA、AA基因型显著降低乳腺癌的发病风险［校正OR（95%CI）分别为0.44（0.29~0.68），0.29（0.17~0.48），P均<0.01］。与Fas 670多态性位点AA基因型相比，AG、GG基因型显著降低乳腺癌的发病风险［校正OR（95%CI）分别为0.63(0.42~0.94)和0.36（0.21~0.60），P均<0.01］。与FasL 844多态性位点CC基因型相比，TC基因型显著降低乳腺癌的发病风险［校正OR（95%CI）为0.58（0.40~0.84），P=0.012）。 结论：Fas-FasL基因多态性与乳腺癌发病风险相关。

摘要:摘要:目的：研究连续监测血培养系统（CMBCSs）中肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）的自溶特点和影响因素，建立肺炎链球菌培养假阴性的检验方法和预防措施。 方法：选取肺炎链球菌标准株ATCC 6303、ATCC 49619、卫生部2012年4号质控菌（WSB-1204）和6株临床分离株，在Bactec 9120型血培养仪中培养，观察肺炎链球菌在不同时间段的菌体形态差异，比较不同来源菌株、不同血培养瓶等阳性报警时间及报警后自溶死亡时间的差异。同时，采用肺炎链球菌ATCC 6303进行实验，比较快速免疫层析法、乳胶凝集法和16S rRNA基因扩增及测序3种方法对于肺炎链球菌的检测能力。 结果：模拟实验中肺炎链球菌在CMBCSs中阳性报警后可在8~10 h内自溶死亡，自溶死亡的时间受菌株来源、血培养瓶种类、营养条件等多种因素的影响。其中Bactec需氧瓶相对于小儿瓶和厌氧瓶的报警后自溶死亡的时间更短。自溶的肺炎链球菌，直接涂片镜检可能为革兰阴性球菌或难以辨认的细胞碎片，但可采用乳胶凝集法、胶体金免疫层析法和16S rRNA基因扩增及测序的方法进行检测，其最低检测限分别为10⁶ CFU/mL、10⁵ CFU/mL和10⁵ CFU/mL。 结论: 连续监测血培养系统中肺炎链球菌自溶的影响因素较多，采用需氧+厌氧血培养、报警后及时取阳性瓶转种，有利于防止肺炎链球菌假阴性培养的发生，提高血培养的阳性检出率。

摘要:摘要：目的：建立本实验室Beckman Coulter DxI 600化学发光分析仪及其配套试剂检测妊娠妇女促甲状腺素（TSH）和游离甲状腺素（FT4）的参考区间。 方法：将783例妊娠妇女分为妊娠早、中、晚期3组，用Beckman Coulter DxI 600化学发光分析仪及其配套试剂检测TSH、FT4，初步建立其参考区间。 结果：TSH参考区间：妊娠早期0.10～2.86 IU/mL，妊娠中期0.22～3.26 IU/mL，妊娠晚期 0.57～3.72 IU/mL。FT4参考区间：妊娠早期8.94～14.56 pmol/L，妊娠中期7.25～12.78 pmol/L，妊娠晚期 6.31～11.32 pmol/L。 结论：建立了本院妊娠妇女血清FT4和TSH的参考区间，该区间与Beckman Coulter Dx1600说明书提供的参考区间有差异。各实验室应根据不同仪器和人群等建立TSH、FT4参考区间。

摘要:摘要：目的：探讨骨髓细胞形态学、分子细胞遗传学在急性早幼粒细胞白血病(APL)诊断中的价值。 方法：采集62例APL患者骨髓及外周血标本，用细胞化学染色法［瑞-姬氏染色、过氧化物酶染色(POX)、糖原染色（PAS）］检测细胞形态特征；用染色体核型分析检测染色体；荧光原位杂交技术（FISH）检测PML-RARα融合基因。 结果：细胞化学染色结果显示，62例APL患者均以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主；其中典型捆柴状Auer小体46例（74.19%），单个Auer小体12例(19.35%)，无Auer小体的4例(6.45%);亚型分析发现，M3b型患者外周血WBC升高比例高于M3a型 (χ²=15.25，P<0.01)。56例APL患者染色体核型分析结果表明，43例（76.79%）患者染色体核型t(15;17)(q22;q21)易位(单纯型)；4例未见分裂相（7.14%），5例为正常核型（8.93%），附加染色体异常者4例（7.14%）［包括+8异常2例，+21异常1例，i(17q-)1例］；FISH检测结果发现，PML-RARα融合基因检出率为96.43%（54/56），高于染色体异常检出率83.93%（47/56），差异有统计学意义（χ²=4.94,P<0.05）。 结论: 细胞形态学联合分子遗传学检测可以提高APL诊断的准确性。

摘要:摘要：目的：研究临床分离的肺炎链球菌菌株的血清型和重要毒力因子碱基序列的保守情况，为临床肺炎链球菌疫苗的使用和蛋白质疫苗的研发提供参考依据。 方法：收集2010~2013年重庆医科大学附属儿童医院11岁以下儿童中分离的46株肺炎链球菌，用多重PCR进行血清型分型。同时PCR扩增肺炎链球菌的11个毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP，测序后分析碱基序列的突变情况。 结果：46株肺炎链球菌共检出13种血清型，其中19A（19.57%）为最常见的血清型，其次为23F和19F(各占15.22%)。临床菌株毒力基因ply、lytA、nanA、phtD、clpP、cps2A、bacteriocin、psaA、piaA、pcsB和stkP的碱基序列保守性分别为97.82 %、96.31 %、82.96 %、87.50 %、98.48 %、83.68 %、66.27 %、99.46 %、98.63 %、88.72 %和96.67 %。 结论：在重庆地区儿童感染的肺炎链球菌中，血清型19A分布比例最高，本地区儿童接种肺炎链球菌疫苗时应首选含有19A血清型荚膜多糖抗原的PCV13疫苗。毒力因子ply、stkP、piaA、lytA、clpP和psaA基因在临床菌株中保守性较高，具有作为肺炎链球菌疫苗候选蛋白质的潜力。