2018(10):1-4.
摘要:外源性生物素对生物素-链酶亲合素免疫分析系统的干扰,近几年引起了关注。对使用该系统方法进行检测的常规项目,如激素、心肌标志物和肿瘤标志物检测结果受到生物素不同程度的干扰,导致结果异常,甚至造成疾病的误诊或误治。本文对生物素的应用及其干扰生物素-链酶亲合素免疫分析系统的情况及其对策进行概述。
2018(10):725-728.
摘要:摘要:目的 探讨原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者外周血单核细胞极化情况及其临床意义?方法 收集PBC 患者33 例和健康人对照28 例?用流式细胞术检测外周血单核细胞M1 和M2 比例及M2 / M1 比值,并在PBC 患者与健康人对照间以及早期和晚期PBC 患者之间进行比较?结果 PBC 患者外周血单核细胞M2 比例明显高于健康人对照(P = 0. 001),而 M1 比例及M2 / M1 比值在疾病组和健康人对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)?早期PBC 患者外周血单核细胞M1 比例明显高于中晚期PBC 患者(P<0.001),M2 比例和M2 / M1 比值则明显低于中晚期患者(P < 0. 001)?在 PBC 患者中,外周血单核细胞 M1比例与碱性磷酸酶(ALP)和总胆汁酸(TBA)水平间相关性有统计学意义(rs = 0. 565?- 0. 394,P < 0. 05),与丙氨酸氨基转移酶(ALT)?直接胆红素(D-Bil)和,γ-谷氨酰基转移酶(GGT)之间无相关性;M2 只与ALP 呈正相关,相关性有统计学意义(rs =0.588,P<0.001);M2 / M1 比值与ALP?D-Bil?GGT 及TBA 间相关性均有统计学意义(P< 0.05)?结论 PBC 发生发展过程中,单核巨噬细胞的极化状态动态变化,早期炎症阶段主要向M1 极化,中晚期纤维化?硬化阶段主要向M2 极化?
梁艳 , 秦保东 , 史虹 , 张振成 , 仲人前 , 杨再兴
2018(10):729-731.
摘要:摘要:目的:探讨血清游离TAM受体家族分子在原发性胆汁性胆管炎(PBC)中的水平变化及其临床意义。 方法:收集PBC患者64例和健康人对照57例。用ELISA法检测血清Gas6、蛋白S、sTyro-3、sAxl和sMer的水平,在PBC患者和健康人对照间进行结果比较,在PBC中分析这些分子与肝功能生化指标的相关性。 结果:PBC患者血清蛋白S水平明显低于健康人对照(P<0.001),而sMer和sTyro-3水平明显高于健康人对照(P<0.001),Gas6和sAxl水平在两组之间差异无统计学意义。在PBC患者中,血清sMer和sTyro-3与碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)之间呈正相关,相关性有统计学意义(P<0.05),但Gas6、蛋白S和sAxl与肝功能生化指标之间无相关性。 结论:血清蛋白S、sMer和sTyro-3水平在PBC中明显改变,sMer和sTyro-3可能反映PBC病情,而血清Gas6和sAxl在PBC中无明显改变。
邓蕾 , 庞舒尹 , 杨丽媛 , 代玉梅 , 刘云峰 , 张锐忠 , 刘海英
2018(10):732-737.
摘要:摘要:目的 筛选胆道闭锁(biliary atresia,BA)自身免疫相关靶抗原,建立疾病差异性抗原谱,寻找疾病诊断及发病机制研究线索?方法 以20 例BA 患儿?5 例疾病对照组患儿(包括婴儿肝炎综合征2 例?胆总管囊肿3 例)和5 例正常儿童对照组的血清为探针,采用全基因组蛋白质芯片技术进行检测,并进行生物学聚类分析和 GO 功能分析?结果 通过比较BA 组与对照组,共筛选出存在明显差异的免疫响应蛋白281 个,其中IgG 响应105 个,IgM 响应176 个,IgG 和IgM 同时响应的26 个;依据差异倍数≥2?表达稳定的标准得出49 个高响应蛋白?GO 功能分析发现差异抗原主要涉及调控细胞发育?增殖?凋亡及胆道形成?其中CENP6?UBQLN3?PDCD2?SPEG 和RBPJ 蛋白在BA 组中阳性率显著高于正常对照组(100% vs 0%,P < 0. 05)?结论 成功建立BA 相关自身抗原差异谱,为BA 的早期诊断?发病机制的阐明提供新的科学依据,但仍需更为深入的鉴定和更多临床样本的验证?
曹季军 , 李勇 , 王金湖 , 张悦梅 , 徐国新 , 许国华 , 龚燕萍 , 邓正泊 , 仲人前 , 蒋廷旺
2018(10):738-742.
摘要:摘要:目的 以定性和定量方法检测原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者自身抗体,比较方法学间的差异及其临床意义?方法选择2016 年8 月—2018 年7 月在常熟市第二人民医院?太仓市第一人民医院和张家港市第一人民医院就诊的 PBC 患者 74例?分别以多重微珠流式免疫荧光法?免疫印迹法和间接免疫荧光法检测抗线粒体抗体和抗核抗体,分析各自身抗体在 PBC中的分布?不同方法学间的符合度及其与肝功能各指标间的关系?结果 所有PBC 患者均为抗线粒体抗体M2 阳性,抗核抗体中anti-gp210 和anti-SP100 阳性率分别为22.9%?20.3%;微珠流式免疫荧光法和免疫印迹法检测结果中除抗RNP?Scl-70 和 Centromere B(Cent B)抗体之外其他自身抗体的符合率均超过90%,其中 AMA-M2 和抗Sm 抗体的两种方法检测结果符合率为100%;AMA-M2 定量结果与肝功能各指标间相关性无统计学意义(P > 0. 05);anti-gp210 阳性组患者AMA-M2 浓度?碱性磷酸酶(ALP)和总胆红素(T-Bil)较阴性组显著升高(P< 0.05);anti-SP100 阳性组患者SSA 60?SSB?RNP?RibP?dsDNA?Histone?PCNA 和Cent B 抗体表达水平较阴性组显著升高(P<0.05)?结论 PBC 患者自身抗体定量和定性检测结果间具有良好的相关性,AMA-M2 定量检测结果anti-gp210 的关系提示其可能与患者病情严重程度和临床预后有关?
2018(10):743-746.
摘要:摘要:[HTK]miRNAs是一类内源性单链非编码RNA,在肝脏疾病的发生与发展中发挥重要的调控作用。很多研究发现miRNAs 在乙型病毒性肝炎、肝癌、自身免疫性肝病等各种肝脏疾病患者中表达异常,且与肝脏疾病的病程相关。miRNAs不仅具有较好的稳定性,而且在不同肝脏疾病患者不同类型的样本中都能够检测到,因此miRNAs的异常表达可能为肝脏疾病的诊断提供新方向。
2018(10):747-750.
摘要:目的 分析液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)检测载脂蛋白C-Ⅰ、C-Ⅱ和C-Ⅲ的酶解效率,为准确定量蛋白质提供依据。方法 对不同载脂蛋白C含量的混合人血清样品进行变性、还原、烷基化等前处理,经胰蛋白酶酶解,用LC-MS/MS定量检测目标肽段;分析多肽释放图谱和样品间多肽释放的相关性。结果 肽段TP(apo C-Ⅰ)、TY(apo C-Ⅱ)和GW(apo C-Ⅲ)的响应值较高。酶解1 h时,ES和DA即达释放峰值;3 h时,TY释放最充分;而TP、GW和EF的释放速度相对较慢,在8 h达最高值。TP、TY和GW达峰值后,峰面积随酶解时间延长而逐步下降。apo C-Ⅰ释放出的2条肽段EF和TP在5份样品之间一致,r=0.9939(3 h)和0.9929(20 h);apo C-Ⅱ(ES和TY肽段)和apo C-Ⅲ(DA和GW肽段)的相关性位于0.9761-0.9973之间。结论 apo C-Ⅰ、apo C-Ⅱ和apo C-Ⅲ肽段的酶解效率受肽段自身特性和酶解环境影响,合适的选择代表性肽段和酶解条件将有助于准确定量。
2018(10):751-755.
摘要:目的 评价荧光染色在快速诊断真菌性鼻-鼻窦炎中的应用效果。方法 对96例2017年7月至2018年4月首都医科大学附属北京同仁医院临床诊断为真菌性鼻-鼻窦炎的术中取材真菌团块组织少量,拉片制成薄层涂片,滴适量荧光染料,加盖玻片,室温放置5分钟,在荧光显微镜下从低倍至高倍观察真菌结构。常规进行乳酸酚棉蓝染色及10%KOH湿片处理,以真菌培养结果作为金标准。结果 荧光染色、乳酸棉兰染色、10%KOH湿片标本一次镜检阳性率分别为95.83%(92/96),93.75%(90/96)及91.67%(88/96),差异无统计学意义;涂阴标本再次涂片染色镜检,除10%KOH漏检2例外,荧光及乳酸棉兰染色均可捕捉到真菌结构。培养阳性的65例标本,荧光着色理想,可见清晰的真菌结构,尤其对曲霉菌属与暗色真菌属菌丝区分良好,直接荧光染色拟诊与培养结果一致。有3例经乳酸棉兰及10%KOH湿片观察到特征性顶囊结构及分生孢子判断为烟曲霉及链格孢属,结果与培养一致,而荧光染色此类结构着色不清。结论 荧光染色法可用于鼻窦真菌的快速拟诊,但在观察真菌特征性产孢及产色素结构上,与常规方法相比并无显著优势。
宋淑圣 , 于娟 , 孙宁 , 李昂 , 吕幸 , 周莹 , 陈芳芳 , 杨阳 , 张立平 , 李晓军
2018(10):756-759.
摘要:摘要:目的:探讨3种长链非编码RNA(lncRNA)HOTAIR、XIST和H19在类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)和健康人对照组血清中的差异表达。 方法:收取50例RA疾病组、50例SLE疾病对照组和60例健康人对照组血清,共160例血清标本,提取血清总RNA,利用RT-qPCR方法分析HOTAIR、XIST和H19 3种lncRNA表达情况。用Spearman相关性分析探讨RA患者疾病活动指数(DAS28)与HOTAIR表达量的相关性。 结果:RA组与健康人对照组和SLE疾病对照组相比,血清HOTAIR表达量显著增加(P<0.01),XIST在RA和对照组之间表达量差异无统计学意义;RA患者血清中HOTAIR表达值与DAS28评分呈正相关(R2=0.27,P=0.002),且DAS28评分≥5.1的疾病高度活动组的HOTAIR表达值显著高于3.2<DAS28评分<5.1的疾病活动组(P<0.01);血清HOTAIR表达量与血清C反应蛋白(CRP)存在正相关关系(R2=0.192,P=0.002)。 结论:LncRNA HOTAIR在RA患者血清中的表达量显著性升高且与DAS28评分呈显著正相关关系,血清中HOTAIR有可能成为诊断RA的潜在生物标志物。
2018(10):760-762.
摘要:摘要:目的:调查60株化脓性链球菌毒力基因存在状况及毒力基因携带模式。 方法:60株化脓性链球菌分离自2014年1月至2017年10月南京医科大学附属淮安第一医院与南京中医药大学附属医院急性扁桃体炎患者的病灶部位拭子标本。采用PCR及序列分析的方法分析侵袭性酶毒力基因(hylA、speB、endoS)、超抗原毒力基因(smeZ)、免疫逃逸毒力基因(sic)及黏附素毒力基因(prtF1)等6种毒力基因,并基于阳性检出模式进行毒力基因分类。 结果:侵袭性酶speB、endoS基因和超抗原smeZ基因检出率均达100%,hylA检出率为50%,sic检出率为23.3%,prtF1未检出。根据毒力基因检测结果,60株化脓性链球菌可分为4种类型,检出hylA、speB、endoS、smeZ等4种毒力基因有29株(48.3%),检出speB、endoS、smeZ等3种毒力基因17株(28.3%),检出speB、endoS、smeZ、sic等4种毒力基因13株(21.7%),检出hylA、speB、endoS、smeZ、sic等5种毒力基因1株(1.7%)。 结论:临床分离化脓性链球菌侵袭性酶speB、endoS基因和超抗原smeZ基因检出率均达100%,推测其可能是化脓性链球菌感染导致感染灶局部炎症和坏死的原因之一。
2018(10):763-766.
摘要:摘要:[HTK]近年来,由于广谱抗菌药物、免疫抑制剂的广泛使用,以及实体器官移植、骨髓移植、侵袭性治疗、恶性肿瘤、HIV患者、各种基础疾病逐年增多等原因,真菌感染患者明显增多,死亡率也逐年上升。C型凝集素受体(C-type lectin receptors, CLRs)主要表达在树突状细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等免疫细胞表面,可识别真菌细胞壁β-葡聚糖、甘露聚糖等,激活下游信号通路,促进免疫细胞分泌IFN-γ、IL-6、TNF-α等多种促炎细胞因子,并启动适应性免疫应答,清除感染真菌。鉴于CLRs在真菌感染免疫应答中发挥的关键作用,该文对CLRs的功能及机制研究进展作一综述。
2018(10):767-770.
摘要:环状RNAs(circular RNAs,circRNAs)是RNA家族中的新成员,作为高效微小RNA(microRNA,miRNA)海绵,抑制miRNA活性,进而上调miRNA靶基因的表达,参与包括肿瘤在内的多种疾病的发生、发展和预后。研究显示,circRNAs可能参与造血分化过程,并在白血病诊断与治疗中扮演重要角色。该文就circRNAs的来源、功能、检测方法以及在造血和白血病中的最新研究进展作一综述,以期为白血病诊断、预后和个体化治疗提供新思路。
2018(10):771-773.
摘要:目的 探讨规范化建立与实践POCT质量与能力体系。方法 全面运用质量管理工具分析影响POCT质量与能力的要因。建立POCT管理组织架构,文件化质量目标、制度及流程,对项目的POCT方式和仪器性能进行评估;对POCT管理与操作人员进行培训,自制POCT操作人员能力评估表对POCT操作人员进行能力评估;通过持续的质量管理督查,从档案管理、仪器管理、试剂管理、质控管理、结果/危急值记录、废弃物处置、检测人员资质、临床满意度共8个维度进行督查评分,确认管理效果,并持续改进。结果 以便携式血糖仪为例,管理前后各检测浓度结果正确度、精密度均有明显改善(P<0.01);人员能力评估8个维度总体评分,均有明显提升,活动成长均为正向增长;通过持续的质量管理督查,针对问题持续改进,管理后督查合格率明显提高。结论 POCT质量与能力体系可通过建立组织架构,明确职责和流程;制定POCT质量管理制度和标准操作手册;通过持续的指导培训考核,提高POCT操作人员的能力,保证检验质量;通过不断的质量管理督查,发现问题和不足,持续改进,提高临床满意度,更有效地服务于临床。
2018(10):774-778.
摘要:摘要:目的:研究伤寒沙门菌小RNA(sRNA) S2959对细菌动力以及生物膜形成能力的影响。 方法:利用Red重组系统制备伤寒沙门菌sRNA S2959缺陷株(△S2959),同时制备sRNA S2959缺陷株的空载体株(△S2959-pBAD)和回补株(△S2959-pS2959)等相关菌株。通过sRNA S2959缺陷株和野生株的生长曲线实验观察sRNA S2959缺失后对细菌生长的影响;通过细菌sRNA S2959缺陷株、空载体株、回补株的泳动能力实验和生物膜实验观察sRNA S2959对细菌动力以及生物膜形成能力的影响;再用定量PCR(qPCR)方法检测细菌鞭毛相关基因在sRNA S2959相关菌株中的表达水平。 结果:成功制备sRNA S2959缺陷株和回补株;sRNA S2959缺陷株和野生株在LB和TSB液体培养基中的生长曲线无明显差异;与野生株相比,sRNA S2959缺陷株的泳动能力和生物膜形成能力下调(P<0.05),而回补株的泳动能力和生物膜形成能力较缺陷株显著增加(P<0.05);qPCR结果显示,高表达sRNA S2959后,细菌鞭毛相关基因(flhD、fliA和fljB)的mRNA水平分别上调大约4、3和6倍。 结论:伤寒沙门菌sRNA S2959促进鞭毛的表达,进一步上调伤寒沙门菌动力以及生物膜的形成能力。
徐蓉 , 慎惠 , 黄媛媛 , 何丽华 , 倪丽君 , 郭建 , 吴文娟
2018(10):783-787.
摘要:摘要:目的:建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)在常规临床微生物鉴定中的性能验证方法,指导临床实验室规范微生物鉴定程序。 方法:选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共115株,包含革兰阳/阴性球菌30株、革兰阳/阴性杆菌31株、真菌30株,厌氧菌、苛养菌各12株,所有菌株均经Vitek Compact鉴定和/或细菌16S rDNA、真菌ITS DNA测序分析验证。任意选择3种MALDI-TOF MS微生物鉴定系统厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱,采用检测系统推荐方法进行菌株鉴定,进行准确度验证试验。精密度验证:选取标准菌株和临床菌株10株,1位操作者使用3个检测系统对10株菌株分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d;3位操作者使用3个检测系统对10株菌株每d分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d,从而验证鉴定结果的重复性。 结果:厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱对标准/质控菌株(除外厌氧菌)的鉴定符合率为100%;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100%;对革兰阴/阳性杆菌的种水平鉴定符合率分别为100%、100%、96.77%;对革兰阳性球菌的种水平鉴定符合率分别为96.67%、96.67%、100%;对真菌的种水平鉴定符合率均为90%一致;对苛养菌的种水平鉴定符合率均为100%;[JP2]对厌氧菌鉴定符合率为91.67%种水平一致。精密度验证试验结果重复性100%。 结论:3种MALDI-TOF MS[JP]系统在革兰阳/阴性球菌、革兰阳/阴性杆菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度符合要求,验证通过。本文建立的微生物鉴定质谱仪性能验证方案可满足综合性医院临床微生物实验室常规鉴定基本要求。
2018(10):788-791.
摘要:目的 本研究目的在于了解我国血气项目危急值报告及时性现况,给其相关QIs的质量规范设定提供基线数据,调查危急值未报告原因并给临床实验室提供相关建议。方法 于2015年7月通过网络平台向参加卫生部临床检验中心室间质评计划的实验室发放调查表。涉及的质量指标包括:危急值未报告率、危急值报告不及时率、危急值报告临床未确认率、危急值报告时间中位数和第90百分位数(P90)。同时对各实验室危急值未报告原因进行调查。数据收集后采用自主研发的专用统计分析软件进行统计。 结果 本次调查应答率为86.81%。大部分参加实验室为三级综合医院。几乎全部实验室都对实验室人员进行了相关培训。多数参与调查实验室危急值未报告率、报告不及时率和报告临床医生未确认率均为0.00%(6σ)。危急值报告规定时间多在10~20 min或30~40min之间,大多数实验室都能在15min以内完成危急值报告。实验室危急值未报告的常见原因包括“实验室工作人员报告遗漏”,“通讯设备故障或无法接通”,“申请单信息不全,缺少临床医生联系方式”和“重复出现危急值”等。结论 参与调查临床实验室危急值报告及时性情况较为满意。建议临床实验室可参考本次调查结果和其他发表的文献,与临床商议将危急值报告时间规定在15~30 min之间。加强信息系统建设,通过内部纵向监测和外部横向比较,识别危急值报告不及时原因,以持续提高实验室服务质量。
2018(10):792-794.
摘要:摘要:目的:分析儿童患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性及分子流行病学分型特征。 方法:采用Vitek 2自动仪对2010—2016年无锡市儿童医院各类临床标本分离出的91株MRSA进行鉴定,并分析MRSA耐药表型模式;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对MRSA菌株做分子流行病学分型。 结果:根据试验菌株对庆大霉素、克林霉素等6种抗菌药物的药敏结果差异,按照将药敏结果完全相同的菌株分为一型,共将91株MRSA分为12个型别;所有MRSA菌株均可进行PFGE基因分型,得到A~I等共9个PFGE基因型别。当MRSA的耐药谱相同或相似时,其 PFGE的基因型也相同或相近,符合率达到80%以上;当PFGE的基因型相同或相近时,耐药谱也相同或相似,符合率达到90%以上。 结论:儿童医院MRSA暴发感染期间MRSA耐药特征相同或相似的菌株之间存在PFGE基因型别内在联系。
2018(10):795-797.
摘要:摘要:目的:探讨奇异劳特普罗菌(Lautropia mirabilis)的生物学特性。 方法:对一住院患者多次合格痰样本中分离的1株奇异劳特普罗菌行革兰染色、抗酸染色等形态学观察;采用微量生化反应管验证其生化反应;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)及16S rDNA测序对其进行鉴定。 结果:该菌在5% CO2 35 ℃血平板上培养24~48 h形成大小不等、白至浅黄色、粗糙、不溶血、干燥、呈“咬琼脂”现象的菌落;革兰染色呈革兰阴性不规则球状体,抗酸染色阴性;主要微量生化反应阳性结果包括脲酶、葡萄糖、麦芽糖、硝酸盐还原试验,[JP2]阴性结果包括乳糖、蔗糖、苯丙氨酸脱氨酶、VP、吲哚、鸟氨酸、赖氨酸、枸橼酸、甘露醇;MALDI-TOF MS鉴定结果为奇异劳特普罗菌(Lautropia mirabilis,Score 2.130),16S rDNA鉴定确证为奇异劳特普罗菌(Lautropia mirabilis)。 结论:该菌菌落及镜下菌体形态不规则,目前基于MALDI-TOF MS的鉴定手段快速且准确。
2018(10):798-799.
摘要: