摘要:新冠肺炎疫情是百年来全球发生的最严重的公共卫生事件，其持续爆发凸显了快速准确的诊断分析是大流行得到控制的密钥。该文结合新型冠状病毒核酸检测现状和当前最新标准指南，对不同分子诊断技术进行评述，并对这些技术在未来传染病暴发中的应用和发展提出建议。

摘要:外泌体含有特异性的蛋白质、脂质、核酸和代谢物等，参与多种病理生理过程。筛选与检测其特异性的分子标志物已成为液体活检的主要内容之一，在疾病诊断、疗效监测与预后判断中彰显出重要的临床意义。随着外泌体高通量组学筛选、分离及检验技术的发展，新的外泌体分子标志物不断被发现，为临床重大疾病诊疗提供了新的依据，外泌体分子标志物检测将成为疾病精准诊断和个体化治疗的新方向。

摘要:目的?探讨利用高分辨熔解曲线技术对21羟化酶缺乏症患者中致病基因热点突变筛查的可行性及临床应用价值。方法?针对CYP21A2基因上的4个热点突变c.293-13A/C>G(I2G)、c.518T>A(p.I173N)、c.955C>T(p.Q319X)及c.1069C>T(p.R357W)设计相应的特异性引物，应用高分辨熔解曲线技术进行分析，并结合DNA测序技术进行验证。结果?高分辨熔解曲线技术能对CYP21A2基因上的该4个热点突变明确分型，且与基因序列测序结果比对准确性良好；对基因突变型标本进行3次重复检测，Tm值变异系数为0.168%～0.620%。结论?高分辨熔解曲线检测技术可用于健康人群或高危人群CYP21A2基因热点突变的筛查，是一种高效、准确、低成本的筛查方法，具有一定的临床应用价值。

摘要:目的?探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)治疗中利妥昔单抗耐药与Smarcal1、PP2A-B55-α、PP2A-B56-α蛋白表达的相关性。方法?选取2种“双重打击”淋巴瘤衍生的细胞系，活化B细胞样(ABC型)OCI-LY10(LY10)和生发中心B细胞样型(GCB型)OCI-LY18(LY18)，利用“梯度加药法”构建利妥昔单抗耐药细胞系(LY10RR及LY18RR)；采用CCK-8法检测不同浓度利妥昔单抗分别干扰亲本及耐药细胞后的细胞存活率并计算半数生长抑制浓度值(IC50)；AnnexinⅤ/PI双染法检测50 μg/mL利妥昔单抗分别干扰亲本及耐药细胞48 h后的凋亡比率；western blot检测细胞耐药后对Smarcal1、PP2A-B55-α和PP2A-B56-α蛋白表达的影响；在耐药细胞系中分别干扰Smarcal1和PP2A-B55-α的表达以及过表达PP2A-B56-α，采用CCK-8法检测不同浓度利妥昔单抗对转染后耐药细胞活力的影响。结果?经不同浓度利妥昔单抗处理48 h后，LY10及LY10RR细胞IC50分别为(0.91±0.07) μg/mL和(287.40±26.30) μg/mL，耐药指数为315.58；LY18及LY18RR的IC50分别为(4.73±0.24) μg/mL和(532.10±37.95) μg/mL，耐药指数为112.41，二者差异具有统计学意义(t值分别为10.51和15.18，P均<0.001)；经50 μg/mL利妥昔单抗处理48 h后，LY10RR和LY18RR的凋亡率与对照组的细胞凋亡率相比，差异均无统计学意义(t值分别为2.86和2.90，P值分别为0.06和0.05)，而利妥昔单抗处理48 h后，LY10和LY18的凋亡率明显高于对照组细胞的凋亡率，且差异有统计学意义(t值分别为10.50和9.86，P均<0.001)。与亲本细胞相比，在发生利妥昔单抗耐药细胞系中，Smarcal1和PP2A-B55-α表达量增加，PP2A-B56-α表达水平下降，且差异均具有统计学意义(P均<0.05)。耐药细胞系转染并经不同浓度利妥昔单抗处理后，sh-Smarcal1组、sh-PP2A-B55-α组细胞存活率均明显低于sh-NC组，oe-PP2A-B56-α组细胞存活率明显低于oe-vector组(P均<0.01)。结论?成功构建并鉴定稳定的对利妥昔单抗耐药的LY10RR和LY18RR细胞模型，并证实了Smarcal1、PP2A-B55-α及PP2A-B56-α蛋白异常表达与DLBCL的利妥昔单抗耐药形成相关。

摘要:目的?对1例超声检查提示为Dandy-Walker综合征和先天性心脏病的胎儿进行遗传学分析。方法?取引产胎儿的皮肤样本，进行单核苷酸多态性微阵列分析(single nucleotide polymorphism array, SNP array)，并采用多重连接依赖探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)进行验证。胎儿父母外周血样本进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)分析。结果?SNP array分析结果显示胎儿染色体6p25.3p25.1存在5.4 Mb缺失，Xq28存在4.2 Mb重复，均为致病性拷贝数变异。MLPA验证结果与SNP array结果一致。胎儿父母外周血的FISH分析结果显示未发现相关片段的缺失、重复或易位等异常。结论?胎儿6p25.3p25.1缺失和Xq28重复均为新发变异，可能与超声提示Dandy-Walker综合征和先天性心脏病有关。

摘要:目的?探讨血清胃泌素释放肽前体(pro-GRP)对小细胞肺癌(SCLC)的诊断及预后价值。方法?选取2018年1月至2021年1月吉林大学第一医院经病理组织学确诊为肺癌的2 584例患者，其中SCLC 132例，非小细胞肺癌(NSCLC)2 452例。采用电化学发光免疫分析法(Roche Cobas e601)检测各组血清pro-GRP、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白片段19(CYFAR21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC)等肿瘤标志物的表达水平，采用ROC曲线评估各肿瘤标志物单项及联合检测诊断肺癌的临床效能；连续监测132例SCLC患者血清pro-GRP和NSE水平的变化，分析血清pro-GRP和NSE水平与患者预后的符合度。结果?SCLC组pro-GRP水平显著高于其他各亚组(P<0.05)。pro-GRP诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUCROC)、敏感性、特异性分别为0.976、76.6%、99.7%，5项标志物联合检测诊断肺癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及总有效率均高于单项检测(P均<0.05)。对于化疗有效的患者，第2个周期后血清pro-GRP水平显著低于基线水平(P<0.001)。对于耐药复发或进展的患者，pro-GRP水平升高时间较NSE提前。结论?pro-GRP可能作为SCLC诊断及疗效监测指标。

摘要:目的?分析唐筛高风险和临界风险孕妇中非21/18三体染色体异常的检出情况，为唐筛高风险和临界风险孕妇后续产前诊断技术的选择提供依据。方法?纳入唐筛高风险孕妇2 555例及唐筛临界风险孕妇473例，均选择羊水穿刺进行羊水染色体微阵列分析(CMA)或低深度全基因组拷贝数变异(CNVseq)检测，分析非21/18三体的染色体异常的检出情况。结果?唐筛高风险孕妇中致病性或倾向致病性非21/18三体的染色体异常43例(1.68%)；其中染色体拷贝数变异(CNVs)占86.05%(37/43),性染色体异常占11.63%(5/43)；唐筛临界风险孕妇中致病性或倾向致病性非21/18三体的染色体异常9例(1.90%)；其中CNVs占77.78%(7/9),性染色体异常占22.22%(2/9)。结论?唐筛高风险或临界风险对非21/18三体染色体异常的检出率与21/18三体综合征的检出率相一致，进行产前诊断时应纳入CMA或CNVseq技术。

摘要:目的?探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中长链非编码RNA(LncRNA) linc00342的表达及临床意义。方法?选取2015年6月至2016年9月于赣榆区人民医院接受ESCC根治术的89例ESCC患者的癌组织及癌旁组织为研究对象，采用实时荧光定量PCR检测LncRNA linc00342的表达水平，并分析肿瘤组织中LncRNA linc00342的表达水平与患者临床病理参数的关系；ROC曲线评价LncRNA linc00342对ESCC的诊断价值；采用Kaplan-Meier法进行生存分析；多因素Cox回归分析影响ESCC患者预后不良的危险因素。结果?ESCC患者癌组织和癌旁组织中LncRNA linc00342的相对表达量分别为3.16±1.27和1.64±0.51，二者差异有统计学意义(t=10.478，P<0.001)；LncRNA linc00342的表达水平与TNM分期(χ2=2.592，P=0.011)、淋巴结转移(χ2=2.240，P=0.028)有关；Kaplan-Meier生存分析显示，LncRNA linc00342高表达和低表达患者的累积生存率分别为21.74%、55.81%，差异有统计学意义(Log-rank?χ2=20.896，P=0.000)；单因素分析显示，TNM分期(χ2=8.616，P=0.003)、淋巴结转移(χ2=4.732，P=0.030)及LncRNA linc00342表达(χ2=17.092，P=0.000)是影响ESCC患者预后不良的危险因素；LncRNA linc00342表达预测ESCC的ROC曲线下面积为0.903(95%CI：0.874～0.938，P<0.001)；多因素Cox回归分析结果显示，临床分期为Ⅲ～Ⅳ期(HR=1.943，95%CI：1.280～2.950，P=0.002)、淋巴结转移(HR=1.884，95%CI：1.241～2.860，P=0.003)、LncRNA linc00342高表达(HR=2.107，95%CI：1.361～3.262，P=0.001)是影响ESCC患者预后不良的独立危险因素。?结论?LncRNA linc00342在ESCC组织中表达上调，是影响ESCC发生及预后不良的潜在生物学指标。

摘要:目的?分析三阴性乳腺癌(TNBC)术后患者新辅助化疗(NAC)后血清miR-335、miR-146a的表达水平，并探讨其临床意义。方法?选取2016年6月至2018年6月盘锦市中心医院术后并经NAC治疗的TNBC患者84例作为TNBC组，以同期就诊的非三阴性乳腺癌患者84例作为非TNBC组，另收集体检健康者84例作为健康人对照组。根据NAC治疗后是否病理完全缓解(pCR)，分为pCR组32例和非pCR组52例。采用实时荧光定量法(RT-qPCR)检测各组血清miR-335、miR-146a的表达水平，并进行临床病理参数分析；Pearson检验分析血清miR-335与miR-146a表达水平的相关性，Kaplan-Meier法分析NAC治疗后miR-335、miR-146a表达水平与TNBC患者3年生存率的关系，Cox回归分析影响TNBC患者NAC治疗后预后的危险因素。结果?健康人对照组、非TNBC组、TNBC组血清miR-335的表达水平依次为1.02±0.12、0.81±0.20和0.43±0.08，而血清miR-146a的表达水平依次为1.01±0.12、0.87±0.22和0.56±0.11，3组间差异均有统计学意义(F分别为370.678、178.430，P均<0.01)；与健康人对照组相比，非TNBC组、TNBC组血清miR-335、miR-146a的表达水平均降低(miR-335的t值分别为13.520、37.984，miR-146a的t值分别8.121、26.102，P均<0.05)；与非TNBC组相比，TNBC组血清miR-335、miR-146a的表达水平均降低(t值分别为24.464、17.981，P均<0.05)。TNBC患者行NAC治疗前以及行NAC治疗4、6个疗程后血清miR-335的表达水平依次为0.43±0.08、0.51±0.10、0.75±0.17，血清miR-146a的表达水平依次为0.56±0.11、0.70±0.18、0.83±0.21，3组间差异均有统计学意义(F值分别为154.278、51.860，P均<0.01)；与NAC治疗前相比，NAC治疗4、6个疗程后血清miR-335、miR-146a的表达水平均升高(miR-335的t值分别为5.967、23.867，miR-146a的t值分别7.466、14.399，P均<0.05)；与NAC治疗4个疗程后相比，NAC治疗6个疗程后血清miR-335、miR-146a的表达水平均升高(t值分别为17.900、6.933，P均<0.05)。TNBC患者NAC治疗前、NAC治疗4、6个疗程后血清miR-335与miR-146a的表达水平均呈正相关(r分别为0.493、0.385、0.402，P均<0.05)，且二者均与淋巴转移、脉管瘤栓有关(P<0.05)。非pCR组血清miR-335的表达水平低于pCR组(0.38±0.06 vs 0.51±0.09，t=7.947，P<0.05)，且血清miR-146a的表达水平低于pCR组(0.50±0.09 vs 0.66±0.12，t=6.956，P<0.05)。TNBC患者经NAC治疗后miR-335低表达组的3年生存率明显低于miR-335高表达组(13.64% vs 32.50%，χ2=4.260，P<0.05)，miR-146a低表达组的3年生存率亦明显低于miR-146a高表达组(11.90% vs 33.33%，χ2=5.509，P<0.05)。有脉管瘤栓、miR-335及miR-146a低表达是影响NAC后TNBC患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论?miR-335、miR-146a可作为评价NAC疗效及TNBC患者预后的血清学指标。

摘要:目的?分析血清微小RNA-211(miR-211)对糖尿病视网膜病变(DR)的诊断价值及其影响因素。方法?收集2018年12月至2020年10月于新疆维吾尔自治区人民医院就诊的DR患者90例作为DR组，以单纯2型糖尿病患者(未合并DR)45例作为NDR组，另选45例体检健康者作为健康人对照组。收集所有受试者年龄、性别、血糖、既往史及病程等信息并进行统计学分析；采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定血浆中miR-211的相对表达量；采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。比较各组受试者及不同分期DR患者血清VEGF水平和miR-211相对表达量的差异，采用多因素Logistic回归分析对DR患者miR-211表达的影响因素进行筛选；采用Pearson相关分析法分析miR-211与血糖指标及血清VEGF水平的相关性。结果?DR组和NDR组患者空腹血糖水平、糖化血红蛋白水平和糖尿病病程均高于健康人对照组，且DR组高于NDR组(P<0.05)；NDR组和DR组患者血清VEGF水平和miR-211的相对表达量均高于健康人对照组，且DR组高于NDR组(P<0.05)；增生型糖尿病视网膜病变(PDR)组患者血清VEGF水平、miR-211相对表达量、糖化血红蛋白和空腹血糖水平均显著高于非增生型糖尿病视网膜病变(NPDR)组(P<0.05)；多因素Logistic回归分析结果显示，DR分期、空腹血糖、糖化血红蛋白、血清VEGF及病程均是DR患者血浆中miR-211相对表达量的影响因素，且DR患者糖化血红蛋白、空腹血糖及血清VEGF水平与miR-211的相对表达量均呈正相关；ROC曲线评估miR-211对DR的诊断效能结果显示，血浆中miR-211诊断DR的AUCROC(95%CI)为0.839(0.785～0.894)。结论?miR-211的表达受DR分期、空腹血糖、糖化血红蛋白、血清VEGF及病程影响，且与糖化血红蛋白、空腹血糖及血清VEGF水平呈正相关，对DR具有较高的诊断效能。

摘要:目的?检测食管癌患者血清miRNA-21-5P的表达水平，探讨miRNA-21-5P对食管癌患者的鉴别诊断价值。方法?选取2019年12月至2020年3月于朝阳市中心医院就诊的食管鳞癌患者50名(疾病组)及食管炎患者20名(相关疾病对照组)，采集食管炎患者血清样本及组织样本，以及食管鳞癌患者治疗前血清样本、术中食管鳞癌组织及癌旁组织。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组血清及组织样本中miRNA-21-5P的表达水平，分析miRNA-21-5P表达水平与食管鳞癌患者临床病理参数的关系，采用ROC曲线评估其对食管鳞癌的鉴别诊断价值。结果?食管鳞癌患者血清miRNA-21-5P的表达水平(3.60±0.09)显著高于食管炎患者(1.01±0.05)，差异有统计学意义(t=24.43，P<0.05)；食管鳞癌患者癌组织中miRNA-21-5P的表达水平(4.36±0.29)显著高于癌旁组织(1.31±0.16)，差异亦具有统计学意义(t=20.10，P<0.05)；而食管癌患者组织中miRNA-21-5P的表达水平显著高于食管炎患者组织(t=20.100，P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，组织中miRNA-21-5P筛查食管鳞癌的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.767(95%CI:0.650,0.859)，当cut-off值为0.39时，其敏感性88%,特异性为75%。血清miRNA-21-5P筛查食管鳞癌的AUCROC为0.671(95%CI:0.549,0.779)，当cut-off值为0.63时，其敏感性为80%,特异性为66%。结论?miRNA-21-5P在食管鳞癌血清中的诊断价值与组织相当，或可用于对食管鳞癌的鉴别诊断。

摘要:复发性流产是指与同一性伴侣连续发生3次及3次以上的自然流产，其发病原因和机制有许多未明确之处。目前，临床上复发性流产检测指标的诊断和预测效能不佳，对于原因明确的部分复发性流产和不明原因的复发性流产，其治疗仍然是妇产科领域的难点和挑战。多项病例-对照研究发现，复发性流产(recurrent spontaneous abortion, RSA)患者血液、绒毛和蜕膜等组织中microRNA(miRNA)的表达水平存在差异性，而miRNA本身具有相对较好的稳定性和组织特异性，故而miRNA被认为有潜力成为复发性流产的诊断标志物。该文综述了miRNA在复发性流产中的研究进展，总结并探讨了目前研究的不足以及可以改善的环节，以期通过更严谨的人群研究设计及更灵敏的检测技术，筛选出复发性流产特异性miRNA标志物，从而提高复发性流产诊断和预测效能, 并在体内外实验中阐明其可能的生物学机制。

摘要:支气管哮喘(bronchial asthma，简称哮喘)是一种遗传和环境因素相互作用导致的多基因遗传病。前基因时代，定位克隆法与候选基因法发现的重率高且有价值的易感基因共25个。伴随人类基因组技术的发展，全基因组关联研究广泛应用，众多哮喘易感基因位点相继被发现，且基因位点共同作用能增加易感风险。尽管基因对哮喘及其相关性状有重要作用，但多种环境暴露也同样影响哮喘的发生。该文就儿童哮喘易感基因研究方法、近年来发现的主要易感基因、基因位点间交互作用及环境因素等作一综述。

摘要:目的?探讨精神分裂症患者CYP2C19、CYP2D6基因多态性对氯氮平(CZ)代谢的影响。方法?采用实时荧光定量PCR检测224例精神分裂症患者的CYP2C19与CYP2D6基因型，根据CYP2C19的代谢类型，将患者分为快代谢型、中间代谢型和慢代谢型，根据CYP2D6的代谢类型，将患者分为快代谢、中间代谢型和中低代谢型。高效液相色谱技术检测各组患者氯氮平及其代谢产物去甲氯氮平(NCZ)的血药浓度。分别计算各组基因型分布和等位基因频率、CZ、NCZ、CZ+NCZ总血药浓度以及NCZ/CZ比值。结果?224例精神分裂症患者CYP2C19等位基因*1、*2和*3的基因频率分别为62.3%、33.9%和3.8%。CYP2D6等位基因*1、*2、*4、*10和*41的基因频率分别为22.3%、11.8%、0.7%、61.2%和4.0%。CYP2C19快代谢型NCZ/CZ比值为0.41±0.31，CYP2C19中间代谢型NCZ/CZ比值为0.39±0.19，CYP2C19慢代谢型的NCZ/CZ为0.30±0.12，CYP2C19快代谢型、CYP2C19中间代谢型NCZ/CZ比值高于CYP2C19慢代谢型，差异有统计学意义(F=9.11，P<0.05)。结论?CYP2C19可影响CZ的代谢，且CYP2C19慢代谢型显著降低CZ代谢率。CYP2D6对CZ代谢影响不显著。

摘要:目的?探讨尿液中人补体因子H相关蛋白(hCFHrp)在膀胱癌的诊断、病理分级和临床分期中的应用价值。方法?回顾性分析2020年4月至12月西京医院收治的69例膀胱癌患者、30例泌尿系良性病变患者及30例体检健康者，采用微孔板化学发光法检测各组尿液hCFHrp水平。分析其与膀胱癌患者临床病理参数的关系，ROC曲线分析其诊断膀胱癌的临床价值。结果?膀胱癌组、良性疾病组及健康人对照组尿液hCFHrp的中位浓度及阳性率逐渐下降，差异有统计学意义(H=73.17，P<0.001；χ2=60.14，P<0.001)。hCFHrp水平及阳性率随着膀胱癌患者的WHO病理组织学分级、TNM分期及肿瘤大小的升高而升高(P<0.01)。尿液hCFHrp诊断膀胱癌的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.922，当cut-off值为89.03 U/mL时，敏感性为76.80%，特异性为95.00%。结论?尿液hCFHrp可用于膀胱癌的早期筛查，其表达水平与疾病的严重程度密切相关，具有较高的临床诊断价值。

摘要:目的?探讨分析前标本处理因素对血液乙肝表面抗原(HBsAg)检测的影响。方法?收集300例献血者的血液标本作为研究对象，采用ELISA法进行HBsAg检测。采用配对t检验统计分析对比离心温度为常温(18～27 ℃)和4 ℃、采集后储存0 h和8 h离心、离心后2～8 ℃储存2 h和2～8 ℃储存2 h后离心、抗凝管和促凝管、常温(18～27 ℃)和2～8 ℃储存5种因素对检测结果的影响。结果?离心温度、标本采集到离心间隔、储存温度3种因素的t值分别为6.120、-5.694、3.691，对HBsAg检测结果的影响差异有统计学意义(P<0.05)。离心温度、标本采集到离心间隔、离心和储存顺序、标本管类型、储存温度5种因素复合标准差分别为0.005 5、0.004 5、0.002 6、0.002 0、0.004 9，影响程度由大到小依次为离心温度、储存温度、标本采集到离心间隔、离心和储存顺序、标本管类型。结论?离心温度、标本采集到离心间隔、储存温度3种因素对检测结果有显著影响。环境温度升高和全血标本长时间不分离导致标本不合格，从而对检测结果准确性产生影响，在日常工作中应采取有效措施避免上述因素。

摘要:目的?采用生物信息学方法构建并验证肺腺癌免疫基因预后风险模型，探究该模型对早期肺腺癌患者预后的预测潜力。方法?将癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas，TCGA)来源的肺腺癌及正常组织数据作为训练集，将基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus，GEO)来源的肺腺癌及正常组织数据作为测试集。根据免疫学数据库和分析平台(Immunology Database and Analysis Portal，ImmPort)中提供的免疫相关基因，利用生物信息学手段根据训练集数据建立预后风险模型并在测试集中进行外部验证。采用该模型对38例临床早期肺腺癌患者的转录组数据进行分析，评估高、低危组患者的临床病理参数差异。结果?构建了包含12个差异表达免疫基因(CYBB、ARG2、UTS2、LIFR、SHC3、CTLA4、FGF2、SEMA7A、INHA、GPI、ANGPTL4、TNFRSF11A)的肺腺癌预后风险模型；在训练集中，该模型ROC曲线下面积(AUCROC)为0.759；在测试集中，AUCROC为0.707。对于训练集及测试集中的早期肺腺癌患者，该模型也有良好的预后预测能力。在早期肺腺癌临床样本中，高风险患者与更大的肿瘤直径及更差的病理分型有关。结论?该模型在训练集及测试集中都表现出良好的预后预测能力，并对临床早期肺腺癌患者预后有一定的提示作用。这些免疫基因能够为早期肺腺癌诊断、患者预后评估及新的治疗靶点研究提供方向。