2023, 41(09):641-645.
摘要:摘要:目的基于 多重数字PCR( dPCR)技术检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆游离DNA( efDNA)中表皮生长因子受体(EGFR)基固突变,评估其检测性能及临床应用价值。方法选取不 同浓度EGFR-19Del .1858R .T790M突变的质粒样本作为研究对象,对基于多重dPCR的新平台进行性能验证(包括检测精密度、灵敏度、空白限与线性范围)。收集2019年6月至2020年11月复旦大学附属中山医院呼吸科确诊的49例NSCIC患者标本,采用多重dPCR和Super-ARMS方法分别检测cIDNA标本中EGFR基固突变水平,使用卡方检验比较两组间的差异,并进一步比较检测结果的一致性。结果多 重dPCR平台检测1858R、19Del .1790M 3种常见突变,在10% .5%、1%的检测精密度均达到厂商声明的CV<15%;对于3种常见突变位.点在不同检测限(0.5% .0.1% .0.05%)的检測均报告阳性。1858R 、19Del .1790M突变的检测空白限分别为0.038 2.0.000和0.053。1790M. 19Del .L858R突变百分比在0.05%~ 10%(0.05% .0.1% .0.5%、1%、10%)时,实测值与预期百分比的线性回归方程中的R'值分别为0.997 7,0.9954和0.998 4,P<0.01,相关性显著。49例临床样本中,基于多重dPCR与Super-ARMS技术检测S7681、G719X .19Del .1790M. 20ins. L858R 突变的方法总符合率分别为100% .100% .100% .97.96% .93.62%和89.80%。两方法检测1858R(x2 =0.425,P>0.05) ,T790M(x2 = 0.089 ,P>0.05)、19De(Xx =0,P>0.05) 20ins(x2 =0.211,P>0.05)结果差异均无统计学意义。结论多 重dPCR新平台检测dDNA EGFR基因常见突变的性能较好,在评估突变丰度中具有优势,可为肿瘤精准治疗提供实验依据。
2023, 41(09):646-650.
摘要:摘要:目的探讨临床分 离气单胞菌属细茵(Aeromonas spp. )喹诺酮类药物耐药机制。方法收集从北京友谊医院2017年腹泻患者粪便标本中分离的气单胞菌,采用微量肉汤稀释法检测其对喹诺酮类药物的敏感性,提取菌株核酸进行PCR扩增,测序分析气单胞茵喹诺酮耐药决定区(quinolone-resistancedeter mining region, QRDR)及喹诺酮耐药质粒相关( plasmid-mediated quinolone resistance, PMQR)基因。结果共收集 111株气单胞菌,其中7株(6.3%)对萘啶酸(NAL)和环丙沙星(CIP )均耐药,54株(48.6%)对NAL耐药但对CIP敏感,50株(45.0%)对NAL和CIP均敏感。QRDR测序结果显示,NAL耐药菌株gyrA基因第83位发生丝氨酸(Ser)突变,突变为异亮氨酸(le)、缬氨酸(Val)或酪氨酸(Tyr)。对NAL-CIP耐药的菌株中,除了 gyrA基因突变外,parC基因第87位Ser突变为Ile。 CIP 敏感的104株菌株中,仅有7株parC基因第87位Ser突变。PMQR基因检测结果显示,QnrS基因检出率为7.2%(8株) ,aac(6')-lb-cr 基因检出率为6.3%(7株),且QnrS和aac(6' )-1b-cr基因检出 主要集中在CIP耐药菌株中,CIP耐药菌株PMQR基因检出率为85.7%。结论气单胞菌喹诺酮低水平耐药主要与 gyrA基因第第83位突变或QnurS基因有关。gyrA基因第83位突变和parC基因第87位突变Ser87lle联合PMQR基因存在时,可能与气单胞茵对喹诺酮的高水平耐药相关。
2023, 41(09):651-655.
摘要:摘要:目的探讨 肾透明细胞癌( clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)患者尿液细胞外囊泡( extracellular vesicles, EVs)中 miR-126-5p及miR-150-5p联合检测的临床应用价值。方法收集 2022年5月至2023年2月于南京大学医学院附属金陵医 院泌尿外科初诊的ccRCC患者以及年龄.性别相匹配的健康人对照晨尿标本各48例,分离尿液EVs后运用实时荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR ,qRT-PCR)检测EVs中miR-126-5p和miR-150-5p的水平变化,评估其对于ccRCC患者辅助诊 断效能以及与临床肾功能指标的相关性;采用生物信息学预测miR-126-5p和miR-150-5p参与ccRCC发生、发展的潜在机制。 结果与健康人对照相比 ,ccRCC患者尿液EVs中miR-126-5p[ 0.70( 0.39,1.30) vs 0.40(0. 16, 0.71) fmol/L] 和miR-150-5p . [ 15.41(8.07 ,29.86) vs 5.66(3.66. ,9.13) fmo/L]水平显著增高(P均<0.01);ROC曲线分析结果显示,尿液EVs miR-126-5p和 miR-150-5p用于筛查ccRCC及I期患者的ROC曲线下面积( AUCROC)分别为0.690( 95% CI:0.585 ~ 0.794), 0.734 (95% CI: 0.630~0.839)和0.787( 95% CI:0. 692 ~ 0.881 ) ,0.736(95% CI:0.602 ~0.870)。两种miRNA联合筛查ccRCC及I期患者的 AUCROC分别为0.815(95% CI :0.724 ~0.905)和0.855(95%CI:0.776-0.946)。Speaman 相关性分析显示,尿液EVs miR-126-5p 和miR-150-5p均与血清肌酐水平显著相关(r=-0.476,P=0.001;r=-0.345,P=0.016)。生物信息学分析表明, miR-126-5p和 miR-150-5p可参与调节多种癌症通路。结论ccRCC 患者特别是早期患者尿液EVs miR-126-5p和miR-150-5p水平较健康人 对照显著升高,二者联合检测有望辅助筛查早期ccRCC。
2023, 41(09):656-660.
摘要:摘要:目的分析南京地区 脑脊液培养阳性标本病原菌分布及耐药性,为临床合理用药和预防医院感染提供参考依据。方法 回顾性收集2020年1月至2022年12月南京医科大学附属儿童医院及附属脑科医院送检的脑脊液样本,对分离的病原菌 分布及耐药性进行分析。结果成人组脑 脊液标本阳性率(12.8% ,346/2 703)显著高于儿童组(7.2% ,265/3 680),两者主要 病原菌分布存在显著差异。分离的革兰阳性菌中,除凝固酶阴性葡萄球菌外,几童组以肺炎链球菌为主,成人组以金黄色葡 萄球菌为主;分离的革兰阴性菌中,儿童组以大肠埃希菌为主,成人组以鲍曼不动杆菌为主。在耐药性方面,两组分离的凝固 酶阴性葡萄球菌对青霉素、红霉素耐药率均较高,肺炎链球菌对红霉素、 克林霉素耐药率较高,两组均未检出利奈唑胺、万古 霉素耐药菌株。儿童组检出的主要病原菌对氨基糖苷类和喹诺酮类抗生素耐药率较低,而成人组检出的主要病原菌对此两 类抗生素耐药率较高,两者具有显著差异。两组检出的鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率较高,均未检出对替加环 素耐药的肺炎克雷伯茵菌株。结论南京地区儿童 与成人在病原菌分布和耐药率存在显著差异,医院感染管理部门应引起 重视。病原菌的鉴定及药敏结果为临床合理治疗和预防医院感染提供了依据。
2023, 41(09):661-666.
摘要:摘要:目的探讨 环状RNA hsa_ eirc_ 0003056 在肝癌细胞系中的表达及功能。方法分别采用过表达 质粒和敲减质粒转染HepG2和sk-hep-1肝癌细胞系,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell试验检测细胞迁移及侵袭细胞数,流式细胞仪检测细胞 周期和凋亡水平。结果与 对照组相比,hsa_ _circ_ 0003056 过表达组细胞增殖倍数显著升高,迁移及侵袭数明显增多,G,期细胞比率及凋亡率明显降低;而敲减组细胞增殖倍数及侵袭数均显著降低,G,期细胞比率及凋亡率显著升高。结论 hsa_eirc.0003056可促进肝癌细胞系的迁移和侵袭,同时可以加快细胞周期进程,促进细胞增殖降低细胞凋亡。
2023, 41(09):667-673.
摘要:摘要:目的探讨术前 血清清蛋白-胆红素指数( AlbI)和系统性免疫炎症指数(SII)与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理参数及预后的关系。方法收集 2020年3月至2022年3月在郑州人民医院就诊的120例NSCLC患者的一般及临床资料,检测中性粒细胞计数( NEUT#)、淋巴细胞计数(LYM#)、 血小板计数(PLT)、血清清蛋白( Alb)以及总胆红素(T-Bil)水平,计算SII( NEUT#xPLT/LYM#)和Albl(-0.085xAlb+0.66xlogT-Bil)。随访1年,并记录患者预后生存和复发情况。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,建立C0OX回归模型分析预后影响因素;绘制ROC曲线评估Albl 和SII单项及二者联合对预后的预测价值。结果AlbI、SII 均与NSCLC的分化程度和N分期相关,且Albl还与年龄、TNM分期相关。Kaplan-Meier 分析结果显示Albl和SII与肿瘤复发无明显相关性(X2=2.524,P=0.112;x2 =1.486, P=0.223); Albl和SII高水平患者的死亡率均显著高于低水平患者(x=22.592 ,P=0.00;2= 16.833, P=0.000)。COX回归分析显示,Albl( HR=2.424, 95% CI:1.081~5.432,P=0.032)、SII( HR= 1.002,95% CI : 1.000~ 1.004, P=0.019)以及AlbL-SII 联合( HR= 8.356,95%CI:1.365~ 51.142,P=0.022)是预测患者1年内生存的独立影响因素;ROC曲线评估NSCLC患者预测价值的曲线下面积(AUCROC)分别为0.713(0.623 ~0.792) .0.787(0.703 ~0.857)和0.895( 0.826~ 0.943),对患者预后生存均有较好的预测价值,且AlbI-SII联合检测高于Albl和SII单项检测(Z= 3.668 ,P=0.000 2;Z= 2.680 ,P=0.007) ,其敏感性为90.20%,特异性为73.91%。结论AlbI .SII均与NSCLC病理进展相关;AlbI.SII单项及AllbI-SII联合均是患者预后生存的独立影响因素,对患者预后生存具有较好的预测价值,且AlbI-SII 联合预测价值更优,值得临床推广。
郭鹏飞,王恺敏,孙丽妹,蔡俊珂,史文雯,王雯,夏婧,丁黎明,俞蕾
2023, 41(09):674-678.
摘要:摘要:目的分析轻型新冠病毒感染者康复 后抗体水平特点及影响因素,为预防及控制新冠病毒感染提供依据。方法随机.选取2023年1月5日至5月22日在上海市第十人民医院体检或住院人群检测后剩余血清样本,采用化学发光免疫分析试剂盒检测新冠病毒IgG IgM和中和抗体,收集相关临床信息,并使用SPSS 26.0软件进行统计分析。结果共纳入 210例轻型感染者康复后血清样本,患者中位年龄为41(33,59)岁,中位感染时间为54(29,64)d;其中 男性103 例(49%),女性107例(51%);无基础病80例(38.1%),有基础病130例(61.9%)。抗体水平受到多种因素的影响,其中性别、基础疾病和疫苗接种剂次3个因素对抗体水平具有重要的影响。女性轻型感染者体内IgG和中和抗体水平高于男性,而IgM水平低于男性;有基础疾病的轻型感染者体内IgG和中和抗体水平低于无基础疾病者,而IgM水平高于无基础疾病者;接种过新冠疫苗的轻型感染者体内IgG和中和抗体水平高于未接种人群,而加强接种人群IgG和中和抗体水平更高。轻型感染者体内抗体水平与感染时间、年龄、BMI等之间无显著相关性。结论女性轻型 感染者可能具有更高的免疫保护水平和更低的感染风险。有基础疾病的轻型感染者可能具有更低的免疫保护水平和更高的感染风险。加强新冠病毒疫苗接种可以产生更高水平的抗体。
2023, 41(09):679-683.
摘要:摘要:目的分析 长链非编码RNA( LncRNA) H19和微小RNA-625-5p( miR-625-5p)在消化性溃疡(PU)合并幽门螺杆菌(HP)感染患儿血清中的表达水平及意义。方法选取2021 年2月至2023年2月在泉州市儿童医院治疗的160例PU患儿,其中90例患儿合并HP感染(阳性组),70例未合并HP感染(阴性组),另收集同期160例体检健康儿童为健康人对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组LncRNA H19和miR-625-5p的相对表达水平;Pearson法分析PU合并HP感染患儿LncRNA H19和miR-625-5p的相关性; Logistice 回归分析LncRNA H19、miR-625-5p与PU患儿HP感染的关联;ROC曲线分析LncRNA H19和miR-625-5p表达对PU患儿HP感染的诊断价值。结果与健康人对照组相比,HP阴性组、阳性组PU患儿血清LncRNA H19水平依次显著升高( P<0.05) , miR-625-5p水平依次显著降低(P<0.05);与HP感染I型相比,HP感染II型PU患儿血清LncRNA H19水平显著降低(P<0.05) ,miR-625-5p水平显著升高( P<0.05) ;LncRNA H19与miR-625-5p间存在结合位点,且PU合并HP感染患儿血清LncRNA H19与miR-625-5p水平呈显著负相关(r=-0.536,P<0.05)。Logstic 回归分析发现,LncRNA H19是影响PU患儿HP感染的危险因素( P<0.05), miR-625-5p是PU患儿HP感染的保护因素(P<0.05);LncRNA H19、miR-625-5p诊断PU患儿HP感染的ROC曲线下面积( AUCROC)分别为0.870和0.895,二者联合诊断的AUCROC为0.935,优于其各自单独诊断(Zz者联合1neEVA m9 = 1.991 ,P=0.023 ;-_w_-25.5= 1.707,P=0.044)。结论PU 合并HP感染患儿血清LncRNA H19水平升高, miR-625-5p水平降低,二者对PU合并HP感染具有一定的诊断价值。
2023, 41(09):684-687.
摘要:摘要:肺炎克雷伯茵碳青霉烯酶( Kebsella pneumoniae carbapenemases, KPC)能 水解几乎所有的β-内酰胺类抗生素,是临床上最重要的碳青霉烯酶,常见于以肺炎克雷伯菌为代表的肠杆菌科细菌。自首次分离以来,KPC酶已产生多种亚型,其编码基因位于质粒和转座子等可移动元件上,并迅速传播至世界各地。产KPC酶的细菌所引起的感染非常棘手,给患者带来巨大危害。该文就KPC酶的结构和流行特点、耐药特征、传播机制、感染人群分布及检测技术等方面进行综述,以期为临床合理用药及阻止产KPC酶细菌的传播提供依据。
2023, 41(09):688-691.
摘要:摘要:近年来,越来越多的研究提示miRNA可以作为肿瘤诊断和治疗的新靶点。其中miR-429作为miR-200家族成员,兼具. 抑癌性和促癌性。miR-429 在多数肿瘤中作为抑癌因子,上调miR-429的表达后,可抑制下游与增殖、迁移、侵袭等相关靶基 因的表达,亦可阻碍肿瘤的.上皮细胞间质转化(EMT)过程和细胞周期进程,以此调控肿瘤细胞的增殖、迁移。miR-429也可提 高肿瘤细胞的药物敏感性。除此之外,miR-429在体液中稳定表达,通过提取并检测患者体液中miR-429表达水平的变化,有 助于肿瘤的早期诊断和患者预后的评估。该文对miR-429在肿瘤中的作用机制的相关研究进行了综述,结合肿瘤发生、增殖、 迁移、侵袭、周期等多方面因素进行探讨,综合分析miR-429在肿瘤发生、发展过程中的临床意义,最终解析其调控肿瘤细胞的 机制,以期为推动miR-429在临床转化中的应用提供理论依据。
2023, 41(09):692-699.
摘要:摘要:目的探讨影响儿童重症肺炎 的危险因素并构建风险列线图模型,评估并验证该模型的可行性。方法收集2020年1月至2022年1月兰州大学第一医院诊断为支气管肺炎(188例)和重症肺炎(112例)住院儿童的临床资料共300例为建模组,分别设为儿童轻症肺炎组和儿童重症肺炎组。另收集2022年3月至4月.2023年3月至4月兰州大学第一医院诊断为支气管肺炎(56例)和重症肺炎(67例)住院儿童的临床资料共123例为验证组。建模组与验证组为同一纳入及排除标准,收集患儿临床资料,比较两组资料后用多因素Logistic 回归分析筛选儿童重症肺炎的危险因素,采用R软件构建预测儿童重症肺炎的列线图模型,并评价列线图模型的校准度、区分度和获益率,计算模型的简化应用。结果ICU住院史 、住院时长、C反应蛋白(CRP)、喘息、单核细胞百分比、心血管并发症为儿童重症肺炎独立危险因素(P<0.05)。利用独立危险因素构建的列线图预测模型采用Bootstrap法重复抽样1000次对列线图模型进行内部验证,校正曲线趋近于理想曲线,C-index=0.925,Hos-mer-Lemeshow拟合优度检验显示x = 11.060,P=0.198,预测模型的ROC曲线下面积( AUCROC )为0.925( 95% CI:O.895 ~0.955),临床决策曲线(DCA)评估显示获益率良好,并用R软件再次构建模型的简化应用及验证,验证结果与实际一致性较高。结论利用 ICU住院史、住院时长、CRP、喘息、单核细胞百分比、心血管并发症这6项独立危险因素构建的儿童重症肺炎的风险列线图模型具有较好的预测价值,可为临床儿童重症肺炎的防治提供参考。
2023, 41(09):700-705.
摘要:摘要:目的了 解衢州市人民医院肛周感染患者来源肺炎克雷伯菌(KP)的分子及耐药性特征,为临床诊断及治疗提供依据。方法对该院 2018年1月至2022年6月肛周感染患者分离的46株KP进行药敏试验;利用llumina测序平台对KP分离株进行全基因组测序,明确其分子血清型、多位点序列分型(MLST)、毒力与耐药基因等分子特征;基于核心基因组cgMLST构建最小进化树(MST),分析菌株间亲缘关系。结果感染 KP的肛周疾病患者主要为40~64岁男性(56.52%),合并糖尿病者(41.30%)易感。46株KP中筛选出2株碳青霉烯类耐药菌株(CRKP)和4株产ESBLs 菌株,大多数KP对临床常用抗生素敏感。01K1-ST23 KP是主要的分子血清型和MLST分型菌株,MST显示菌株间亲缘较远。毒力和耐药基因显示,50%KP毒力.评分≥4分,Aerobactin、Yersiniabactin .Salmochelin .rmpADC及rmpA2携带率均大于50%。2株CRKP中,1株同时携带blarpc.2和blaDN.,另1株携带blaxD和较多的毒力基因,其他耐药基因与其表型一致性较高。结论该院肛周感染来源 KP大多为高毒力菌株,且已出现高毒力合并多重耐药菌株,临床需要高度专注并进行持续性监测。
2023, 41(09):706-709.
摘要:摘要:目的比较细 胞色素P450( cytochrome P450, CYP450)的同工酶CYP2C19在高原世居藏族和移居汉族人群中的不同基因型及等位基因分布特点,为高原地区抗血小板药物氯吡格雷使用前是否进行基因检测提供依据。方法选取2021年1 月 至12月在西藏自治区人民医院就诊的藏、汉人群(分别为200例、120例),采用荧光定量PCR检测藏、汉人群CYP2CI9基因多态性,并比较高原地区藏、汉人群基因型和代谢型的分布特点。结果CYP2CI9 在高原地区藏、汉人群中*1/*1.* 1/ *2. *1/*3. *2/*2.*2/ *3、*3/*3基因型分布频率分别为49% .36.5%、6.5% .7.5% .0.5% .0%和47.5%、39%.4% .6%、2.5%、1%,等位基因*1、*2. *3分布频率分别为70.5%、26% .3.5%和69.1%、26.7% .4.2%,两组间基因型和等位基因分布差 异无统计学意义(P>0.05);快代谢(EM,*1/ *1)、中间代谢(IM, * 1/ *2. *1/ *3)、慢代谢(PM, *2/ *2、*2/*3. *3/ *3)分布频率分别为49%、43% .8%和47.5% .42.5%、10%,两组间差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论高原世居藏族人群中 CYP2C19基因代谢型和基因型与移居汉族人群比较无差异,且中间代谢型及慢代谢型人群占比超过50%。在高原地区藏、汉人群中使用氯吡格雷之前有必要进行CYP2CI9基因型检测,并根据基因型结果调整用药。
2023, 41(09):710-714.
摘要:摘要:目的分析未成年发热患者发 生甲型流感病毒( influenza A vinus, INFA)感 染的独立危险因素,构建简单、有效的临床预测模型,以预测患者发生INFA感染的风险。方法选取2022年6月13日至7月5日于邵阳学院附属第一医院发热门诊就诊的未成年患者1001例,收集患者的基本资料、血常规、超敏C反应蛋白和鼻咽拭子流感病毒抗原检测结果。首先通过Las-so回归筛选预测因子,然后进行多因素Logistie 回归,建立未成年发热患者发生INFA感染的风险预测模型,并用列线图展示模型。采用ROC曲线和校准曲线评价预测模型的区分度和校准度;使用决策曲线分析(DCA)评估预测模型的临床有效性。采用Boot-strap法重抽样1 000次,对模型进行内部验证。结果年 龄、红细胞压积(HCT)、 血小板分布宽度(PDW)、 血小板压积(PCT)、淋巴细胞数( Lym#)和中性粒细胞数(Neut#)是未成年发热患者发生INFA感染的风险预测因子。依据预测因子绘制列线图,构建临床预测模型。列线图模型的ROC曲线下面积( AUCROO )为0.728( 0.697~0.759) ,敏感性为71.89% ,特异性为64.39% ,约登指数为0.363,内部验证C-指数为0.720。结论构建 的临床预测模型较好,可以为临床医生初步识别INFA感染提供依据。
2023, 41(09):715-717.
摘要: