摘要:摘要:目的建立一种基 于离心式微流控技术的检测流感病毒分型的直扩PCR法。方法设计特异性引物探针, 采用离心式微流控芯片对流感病毒不同分型进行直扩荧光PCR检测,进一步评价该方法灵敏度、特异性、重复性和线性关系;用该直扩荧 光PCR法检测576例临床标本,并用核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行验证。结果离心式 微流控直扩PCR法的总体最低检出限为500 copies/mL;与常见呼吸道病原体无交叉反应;精密度均小于4.34%;具有良好的线性关系(R2均>0.98); 576例临床标本中检出甲型流感病毒通用型75例,其中H1NI 26例,H3亚型49例;乙型流感病毒通用型74例,均为Victoria系。与对照试剂比较，离心式微流控PCR法在流感病毒不同分型的灵敏度、特异性总符合率均高于92.9%，两种方法检出阳 性率(IAV、H1N1、H1、H3、IBV和IBV-V)差异均无统计学意义(x2值分别为3.200 .0.500、0.500、1.333、2.250、2.250,P均> .0.05),具有极好的一致性( Kappa值均>0.96)。结论建立的离心式微流控 直扩PCR法操作简便,灵敏度和特异性较高,可为流感病毒的临床诊断和流行病学调查提供有效的检测工具。

摘要:摘要:目的建立基于量子 点荧光微球的三段式杂交反应( threesegment hybridization, TSH)法并用于前列腺癌( prostate cancer, PC)微小核糖核酸( miRNAs)检测。方法制备二 氧化硅微球( Bead)和量子点荧光微球( Qbead),分别经过表面改性及生物偶联寡核苷酸H1和H2制备成为Bead-Hl和Qbead-H2;利用Bead 和Qbead上偶联的寡核苷酸( H1和H2)和靶标miRNA之间的互补配对建立TSH法,检测产物的荧光强度并建立标准曲线;分别用TSH法和实时荧光定量逆转录PCR (qRT-PCR) 检测7例PC患者临床组织样本miR-21的表达水平,比较两者之间的差异性并进行统计学分析。结果建立的 TSH法对miR-21的最低检测限为0.16 pmol/L,且具有区分碱基突变的能力;其检测PC患者临床组织样本miR-21结果与qRT-PCR结果的相关性显著(r=0.983 ,P<0.001)。结论建立的 TSH法可用于PC患者miR-21水平检测。

摘要:摘要:目的探讨滤泡辅助性 T细胞(Th)在柯萨奇病毒A6型手足口病( HFMD)患儿外周血中的表达水平及作用。方法采集2022年6月至2023年8月杭州市儿童医院收治的A6型HFMD患儿33例作为HFMD组,选择同期体检健康儿童26例作为健康人对照组,利用流式细胞术检测HFMD患儿和体检健康儿童外周血中的Th频数,分析并比较二者之间的关系。结果HFMD组和健康人对照组CXCR5*CD4*细胞占CD4* T淋巴细胞的频数分别为3.95(2.31 ,6.21)%和1.44(0,94 ,2.43)%,两组之间差异有统计学意义( P<0.001)。HFMD组中ICOS* CXCR5* CD4*和PD-1* CXCR5*CD4* Tfh细胞频数分别为1.44(0.81,2.86)%和1.64(0.65 ,4.05)%,而在健康人对照组分别为0.84(0.27,1 .46) %和0.47(0.13,1.12)%,两组之间差异有统计学意义(P<0.05);且两者均与CXCRS*CD4*细胞水平呈显著正相关(P均<0.05)。结论Tih 细胞在柯萨奇病毒A6型肠道病毒感染引起的HFMD患儿免疫反应中具有重要的作用。

摘要:摘要:目的分析临床 多重耐药革兰阴性细菌的耐药现状,探究胶体金免疫层析法对碳青霉烯类耐药细菌快速检测和分型的临床应用价值。方法收集临床分离的 100株多重耐药革兰阴性细菌,采用药敏纸片扩散法检测8种临床抗菌药物(多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、美罗培南、头孢噻肟/他唑巴坦、替加环素磷霉素)对多重耐药革兰阴性细茵的抗菌效果;采用荧光定量PCR和胶体金免疫层析法分别检测待测菌株5种主要碳青霉烯酶型( KPC .0XA-48、VIM、IMP和NDM)。结果药敏试验结果 显示试验茵株对常用抗生素的耐药率从高到低依次为左氧氟沙星(70%)、头孢噻肟/他唑巴坦(65%)、头孢哌酮/舒巴坦(43%).美罗培南(42%)、阿米卡星(36%)、磷霉素(11%)、多黏菌素B( 7%)、替加环素(0%)。药敏试验结果中碳青霉烯类耐药细菌42株,荧光定量PCR鉴定出33株,其中KPC型19株、IMP型10株、NDM型4株;胶体金免疫层析法检测出33株不同酶型,其中KPC型19株、IMP型10株、NDM型4株,与荧光定量PCR结果一致,其敏感性和特异性均为100.0%。结论减少 多重耐药细菌对耐药率较高抗菌药物的使用,合理选用敏感性高的抗菌药物,可以延缓多重耐药细菌的产生,为临床治疗和控制院内感染提供新思路。胶体金免疫层析法操作简单,能够快速进行KPC .0XA-48、VIM .IMP和NDM5种主要碳青霉烯类耐药革兰阴性细茵的定性检测,可以帮助临床早期优化抗菌药物治疗。

摘要:摘要:目的探讨 中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞与单核细胞比值( LMR)、血小板和淋巴细胞比值(PLR)、系统免疫炎症指标(SII)联合CA153在辅助诊断乳腺良恶性肿瘤中的临床应用价值。方法收集 2015年至2019年南通大学附属 医院就诊的440例初诊乳腺癌女性患者与544例乳腺良性疾病女性患者的外周血标本,比较两组上述各项炎症指标，并分析其与患者临床病理参数之间的关系;采用ROC曲线分析各项指标对乳腺良恶性肿瘤的鉴别诊断效能。结果乳腺 癌组NLR、LMR、PLR及SII的表达水平分别为1.79(1.43,2.31) ,5. 12( 4.08 ,6. 36), 119.70(97.42, 149.80)和367.30( 286.20 ,506.30) ,乳腺良性疾病组的表达水平分别为1.44( 1.14,1.76) ,5.21(4.24, 6.38) , 109.00( 87.02, 132.40)和300.40( 224.00, 390.10),乳腺癌组NLR、PLR及SII的表达水平均显著高于乳腺良性疾病组(P均<0.001)。此外,NLR与乳腺癌患者年龄(P=0.004)、淋巴结转移(P=0.035) .TNM分期相关(P=0.047);LMR和PLR仅与乳腺癌患者年龄相关(P=0.008 ,P=0.024);SII与乳腺癌患者年龄(P=0.000 2)和TNM分期相关(P=0.041);上述炎症指标与CA153之间均无相关性(P均>0.05)。NLR对乳腺癌鉴别诊断的ROC曲线下面积(AUCHOC)为0.716,显著高于其他指标;NLR、LMR、PLR和SII分别与CA153联合检测鉴别诊断乳腺癌的AUCROC均高于四者单独检测。结论乳腺癌患者 NLR、PLR .SII水平均显著高于乳腺良性疾病患者,NLR与CA153联合检测可提高乳腺癌辅助诊断效能。

摘要:摘要:目的了 解肺结核合并下呼吸道感染患者CD4*T淋巴细胞计数水平、下呼吸道病原菌构成及其耐药情况,为临床制定治疗方案提供依据。方法选取2019年6 月至2022年5月南京市第二医院收治的肺结核合并下呼吸道感染者261例作为感染组,另选取单纯肺结核者162例作为单纯组,体检健康者83例作为健康人对照组。采用流式细胞仪测定3组外周血CD4*T淋巴细胞计数,对感染组患者的痰或肺泡灌洗液进行细菌培养，VITEK-2compact全自动微生物分析仪分析病原菌构成,并进行药敏试验分析病原茵的耐药性。结果与健康人对照组相比,单纯组与感染组的CD4"T淋巴细胞数均明显降低(Z分别为2.344与7.813,P<0.05);与单纯组相比,感染组CD4*T淋巴细胞数明显降低( Z= 6.680,P<0.01);感染组中合并两种及以上菌株感染者CD4T淋巴细胞数低于合并一种菌株感染者,且多重耐药者CD4*T淋巴细胞数低于非多重耐药者(P<0.05)。合并菌株数和耐药性均与CD4*T 淋巴细胞数呈显著负相关(r分别为-0.3489与-0.354 5,P均<0.01)。感染组患者下呼吸道标本细菌培养共分离出病原菌314株,其中革兰阴性菌154株(49.04%) ,依次为肺炎克雷伯茵、阴沟肠杆菌、鮑曼不动杆菌、铜绿假单胞茵、大肠埃希菌;真菌153 株( 48.73%) ,以白色念珠菌为主,革兰阳性菌7株(2.23%)。药敏试验结果显示,鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌对头孢替坦耐药率为100.0%;肺炎克雷伯菌、大肠杆菌对头孢唑林、头孢曲松、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率较高,对哌拉西林、亚胺培南耐药率最低,阴沟肠杆菌对妥布霉素、庆大霉素、头孢曲松耐药率较高。真菌对氟康唑敏感率最高,对制霉菌素的敏感率最低。结论肺结核患者 合并下呼吸道感染时CD4*T淋巴细胞计数较低,发生多重感染和多重耐药时CD4*T淋巴细胞计数更低,两者呈负相关,且下呼吸道感染的病原菌以革兰阴性菌和真菌为主。

摘要:摘要:目的探究 胃癌(GC)患者血清环状RNA circ-PVT1 和miR-423-5p的水平变化及其与淋巴结转移的关系。方法选取2020年6月至2022年6月湖州市第一人民医院收治的GC患者100例,根据治疗后淋巴结转移情况分为转移组(64例)和未转移组(36例)。取同期胃炎、胃溃疡、胃息肉等患者100例作为良性病变组,同期体检健康者100 例作为健康人对照组。采用qRT-PCR检测各组血清circ-PVT1、miR-423-5p水平，分析血清circ-PVT1、miR-423-5p 水平与GC患者治疗后淋巴结转移的关系;Logistice回归分析GC患者治疗后淋巴结转移的影响因素;ROC曲线分析血清eirc-PVT1、miR-423-5p水平对GC患者治疗后淋巴结转移的预测价值。结果与健康人 对照组相比，良性病变组和GC组患者血清ceirc-PVT1 水平( 1.04+0.30 vs 1.47士0.39 vs 1.83+0.54) 显著上调,miR-423-5p水平( 1.02+0.28 vs 0.85+0.20 vs 0.51+0.14)显著下降(F分别为87.933、 146.594,P<0.05);与良性病变组相比,GC组患者血清circ-PVT1 水平显著上调,miR-423-5p水平显著下降。血清circ-PVT1 、miR-423-5p水平单独及二者联合诊断GC的ROC曲线下面积( AUCROC)分别为0.729 、0.817、0.869,其中二者联合检测的AUCROC显著高于单独检测(Z分别为3.211、2.133,P<0.05)。与淋巴结未转移组相比,淋巴结转移组GC患者血清cire-PVT1 水平( 1.66+0.51 vs1.92+0.58)显著.上调,miR-423-5p水平( 0.74+0.22 vs 0.38+0.16)显著下降(P<0.05)。Logistic 回归分析结果显示,肿瘤直径、分化程度.TNM分期、高水平circ-PVT1是GC患者治疗后淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05),高水平miR-423-5p是GC患者治疗后淋巴结转移的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示，血清circ-PVT1 、miR-423-5p水平单独及二者联合预测GC患者淋巴结转移的AUCROC分别为0.707、0.753、0.841,二者联合预测AUCROC显著高于单独预测(Z分别为3.595、5.167,P<0.05)。circ-PVT1 和miR-423-5p 存在靶向关系,且GC患者血清circ-PVT1水平与miR-423-5p 水平呈显著负相关(r=-0.546,P<0.05)。结论GC 患者血清eire-PVT1水平升高,miR-423-5p水平降低,且均与GC治疗后淋巴结转移密切相关,二者联合对GC治疗后淋巴结转移有较高的预测价值。

摘要:摘要:目的探讨患者无菌 部位侵袭性真菌感染(IFI)的菌种分布、药物敏感性,临床特征及预后不良危险因素。方法收集2019年7月至2023年6月于承德医学院附属医院从血液、胸腔、腹腔等无菌部位培养物分离出的真菌菌株,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱( MALDI-TOF MS)等方法进行鉴定。酵母菌采用ATB Fungus 3酵母样真菌药敏试剂盒检测抗真菌药物敏感性。利用东华医院信息管理系统收集患者的临床和实验室资料,并进行统计分析。结果175 株真菌菌株主要由酵母菌( 169/175 , 96.57%)和丝状真菌(6/175,3.43%)构成,白念珠菌是IFI最常见致病菌(91/175,52.00%)。单因素分析显示，入住ICU、中心静脉置管、机械通气、连续性肾脏替代治疗( CRRT)、 感染性休克及感染热带念珠茵是患者预后的影响因素(P<0.05)。多因素Logistic回归分析发现机械通气与感染热带念珠菌是患者预后不良的独立危险因素。降钙素原(PCT)是IFI患者预后不良的可靠预测指标。药敏结果显示多数光滑念珠菌和热带念珠菌的耐药株出现唑类交叉耐药的现象。结论临床需重视非白念珠菌,尤其是重视光滑念珠菌和热带念珠茵对唑类药物的耐药率及交叉耐药。

摘要:摘要:目的探讨肝硬化 上消化道出血患者血清miR-210、miR-140水平与患者病情严重程度及预后的关系。方法选取2018年2月至2022年6月在西昌市人民医院就诊的203例肝硬化患者作为研究对象,依据是否伴随上消化道出血分为出血组96例,非出血组107例,选择同期体检健康的100例健康志愿者作为健康人对照组。采用qRT-PCR对各组miR-210、miR-140的表达水平进行检测;Speaman相关性分析血清miR-210、miR-140与患者肝功能分级、出血严重程度及血液指标的相关性;多因素COX回归分析肝硬化上消化道出血患者预后的影响因素,采用Kaplan-Meier法分析肝硬化上消化道出血患者血清miR-210、miR-140水平与预后的关系。结果与健康人 对照组相比,出血组与非出血组患者国际标准化比值(INR)、纤维蛋白.原(Fib)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶时间( APTT)、凝血酶原时间(PT)及血清miR-210水平显著升高,清蛋白( Alb)及血清miR-140水平显著下降(P<0.05);与非出血组比较,出血组患者病程、Fib 、APTT、肝功能Child分级评分及血清miR-210水平显著.上升,Alb及血清miR-140水平显著下降( P<0.05);不同肝功能分级以及不同病情严重程度肝硬化上消化道出血患者血清miR-210、miR-140水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示,血清miR-210水平与肝功能分级及出血严重程度呈显著正相关,miR-140水平与肝功能分级及出血严重程度呈显著负相关(P<0.05);肝硬化上消化道出血患者在治疗后血清miR-210水平降低，血清miR-140水平升高(P<0.05);多因素COX分析结果显示,病程、肝功能Child分级评分、血清miR-210、miR-140是肝硬化上消化道出血患者预后的影响因素(P<0.05 ); Kaplan-Meier法分析结果显示，血清miR-210高表达患者6个月内总生存率(73.21% ,41/56)显著低于低表达患者( 90.00% , 36/40),差异有统计学意义(X2 =4.516,P=0.034) ;miR-140高表达患者6个月内总生存率(92.11% ,35/38)显著高于低表达患者(72.41% ,42/58),差异亦有统计学意义(x2=5.984 ,P=0.014)。结论肝硬化. 上消化道出血患者血清miR-210. miR-140水平 与病情严重程度密切相关，检测血清miR-210、miR-140水平有助于评估患者的预后。

摘要:摘要:目的探讨 急性冠脉综合征( ACS)患者血清高密度脂蛋白3(HDL3)水平与全球急性冠状动脉事件注册( GRACE)评分的相关性，并分析其在ACS患者短期风险评估中的临床应用价值。方法选取 2019年1月至2020年6月解放军第901医院收治的拟行冠状动脉造影术患者248例,其中ACS患者128例,冠状动脉粥样硬化患者(冠脉硬化组)56例,冠状动脉造影正常患者(冠脉正常组)64例。根据GRACE评分规则将冠状动脉异常患者分为低危组53例、中危组75例和高危组56例。采用比色法测定各组患者血清HDL3、HDL-C .LDL-C、TG、TC水平;免疫比浊法测定血清糖化血红蛋白、超敏C反应蛋白水平;Pearman相关分析评估HDL3水平与GRACE评分的相关性;ROC曲线评估血清HDL3对ACS的临床辅助诊断价值;结合术后6个月内主要不良心血管事件(MACE)分析检测血清HDL3浓度对ACS患者的短期预后价值。结果ACS患者血清HDL3水平显著低于冠脉硬化组和冠脉正常组( P<0.001);在ACS患者中,高危组血清HDL3的表达水平显著低于中危组和低危组,而中危组显著低于低危组(P<0.05);Pearman相关分析显示，血清HDL3表达水平随GRACE评分的增加而降低,呈显著负相关(r=-0.49,P<0.01);ROC曲线显示血清HDL3对ACS的预测阈值为0.685 mmol/L, ROC曲线下面积(AUCROC)为0.841;低HDL3浓度ACS患者6个月内MACE的发生率显著高于高浓度患者(x2=5.368 ,P=0.021)。结论血清 HDL3具有较高的预测价值,可作为辅助ACS患者诊断和治疗监测的可靠指标。

摘要:摘要:代谢组学是对某一生物体内细胞或体液中代谢产物进行定性或定量分析研究的一门学科。恶性肿瘤通常导致生物体代谢异常,包括能量消耗增加和代谢产物的紊乱。代谢组学利用质谱、核磁共振波谱以及拉曼光谱等技术检测各种代谢物变 化,研究小分子代谢物和功能,全面地揭示恶性肿瘤发生、发展过程中生物体内的一系列生物化学改变。有助于提供恶性肿瘤状态的关键信息,帮助深入理解癌症发生的病理分子机制,在恶性肿瘤的早期发现、鉴别诊断和预后评估研究中具有重要 的前景。该文综述了代谢组学的检测技术的原理、分类、技术优缺点及其在恶性肿瘤的早期发现、鉴别诊断和预后评估等临床应用研究中的进展,以期更好理解代谢组学技术在恶性肿瘤诊疗领域的研究。

摘要:摘要:膀胱癌是我国常见的泌尿系肿瘤,但目前的诊断手段在早期诊断方面还有所不足，若能早期及时治疗,对提高膀胱癌患者的五年生存率有重大意义。质谱技术作为一种“指纹图谱”,在新的肿瘤标志物的挖掘中具有广泛的应用前景,而肿瘤是一 种始于线粒体代谢障碍的疾病,又因尿液与膀胱接触时间较长，故而是探索新的膀胱癌生物学标志物最为理想的样本之一。该文就基于质谱技术的尿液代谢组学在膀胱癌生物标志物挖掘中的研究进展作一综述。

摘要:摘要:目的针对一对耳聋夫妇和其 胎儿进行家系全外显子组检测，为该家系遗传咨询提供参考和依据。方法收集该家系的临床资料,采集孕妇和其配偶的外周血和孕妇羊水，并提取基因组DNA,应用家系全外显子组测序技术进行产前遗传学检测,发现疑似致病位点进行Sanger测序验证;通过Minigene技术针对可能导致异常选择性剪切突变位点进行分析。结果孕妇携带跨膜丝氨酸蛋白酶3基因( transmembrane serine protease 3 , TMPRSS3)的复合杂合疑似致病突变,孕妇配偶携带GJB2基 因c.235delC的纯合致病突变。胎儿携带TMPRSS3基因复合杂合突变,分别来源于父亲的意义未明的c.323-8T>C杂合突变以及来源于母亲的c.325 C>T杂合突变;采用Minigene技术检测发现c.323-8T>C杂合突变未导致明显的剪切改变。结论 TMPRSS3基因的复合杂合突变可能是导致孕妇耳聋的原因,GJB2基因纯合突变是导致孕妇配偶耳聋的原因,胎儿携带的TMPRSS3基因复合杂合突变不会导致耳聋,夫妇再生聋儿的几率很小。

摘要:摘要:目的观察乳康饮(RuKangYin,RKY)刺激γδT细胞增殖对乳腺癌细胞MDA-MB-231的杀伤作用,为中医药治疗乳腺癌提供依据。方法实验分为以下 4组,I组:外周血单个核细胞( PBMC)对照组;I组: PBMC+植物凝集素(PHA)组; I组:PBMC+唑来膦酸(Z0L)组;IV组:PBMC+RKY组。在各组培养0d和14d时,用流式细胞术检测各组γ8T细胞占PBMC的百分比。将用免疫磁珠分选的γδT细胞与荧光染料羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的乳腺癌MDA-MB-231细胞以10:1 的比例共培养,测定γ8T细胞对乳腺癌MDA-MB-231细胞的杀伤力。结果培养0d时,I组~ IV组γδT细胞占.PBMC百分比分别为(3.81+0.27)%、(4.19+0.41)% .(3.94+0.13)%、(4.16+0.11)%,各组间差异无统计学意义(F=1.462,P=0.296)。培养14d时,I组~IV组γδT细胞占PBMC百分比分别为(4.70+0.29)%、(31.09+ 1.95)%、(25.91+3.77)%、(28.84+2.54)%,各组间差异有统计学意义(F=71.985, P=0.000)。I组~ IV组对MDA-MB-231细胞的杀伤率分别为( 1.17+0.86)%、( 1.56+0.13)%、(1.47+0.09)% .(2.01+0.16)%,各组间差异有统计学意义(F= 24.649,P=0.000)。 结论RKY可以刺激γ8T细胞增殖,提高对MDA-MB-231细胞的杀伤力,为乳腺癌的中医药治疗提供实验依据。

摘要:摘要:目的探讨 血清白细胞介素-2R(IL-2R)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)与炎症指标血清淀粉样蛋白A(SAA)以及全血C反应蛋白(CRP)在成人甲型流感患者、普通流感人群及健康人群中的表达水平差异。方法选取2023年2月20日至3月20日杭州市第一人民医院发热门诊收治的成人甲型流感患者50例(甲流组)、普通流感患者50例. (普通流感组)及健康人群50例(健康人对照组)。检测各组血清IL-2R、IL-10、TNF-a、SAA、CRP水平,并比较3组间各指标的差异。采用Pearson相关分析血清IL-2R JIL-10、TNF-a. SAA水平与全血CRP水平的相关性。结果甲流组和普通流感组血清IL-2R、IL-10、TNF-c. SAA以及全血CRP的水平均显著高于健康人群组(P<0.05),而甲流组和普通流感组各项指标水平差异均无统计学意义。甲流组血清IL-2R、IL-10、SAA水平与全血CRP水平呈显著正相关(r分别为0.618 ,0.386, 0.486,P<0.01),而血清TNF-a水平与全血CRP水平无明显相关性。结论血清 IL-2R、IL-10、SAA水平与甲流感染早期病情严重程度具有一定的相关性,但鉴别诊断甲流病毒感染仍需进行甲流病毒核酸或特异抗原检测。

摘要:

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