摘要:摘要:目的﹑基于GoogleNet ,ResNet101和Vgg193种深度学习模型,对血流感染病原菌(金黄色葡萄球菌、粪肠球菌)进行高置信度的识别,比较模型间的性能与分类能力,探讨深度学习模型对血流感染病原菌快速识别的应用可行性。方法﹐将革兰染色及摄像预处理后的细菌图像和空白对照图像输入模型,进行训练与验证,共采集1 682张金黄色葡萄球菌,1723张粪肠球菌和688张空白对照显微图像,对其中1344张金黄色葡萄球菌,1 376张粪肠球菌和544张空白对照图像进行训练,余下的图像用于验证。根据模型间的分类参数评估出性能最佳的模型。结果ResNetI01模型识别三类验证集图像的交叉嫡损失值(0.008 710 3)最低, Epoch值(93)最大且准确率(99%)最高;CoogleNet模型识别三类验证集图像的交叉嫡损失值为0.063 89,Epoch值为86,准确率为98.6% ;Vgg19模型识别三类验证集图像的交叉嫡损失值为0.035 682,Epoch值为86,准确率为97.7%。结论ResNetl01模型在对三类验证集图像的分类上性能最佳;深度学习模型可对金黄色葡萄球菌和粪肠球菌的革兰染色图像进行准确、可信的快速识别。

摘要:摘要:目的 检测乳腺癌患者血清tRNA衍生物tRF-17-79MP9PP(tRF-17)的表达水平,并分析其与患者预后的相关性。方法选取2016年6月至2019年12月本院收治并确诊的T0例乳腺癌患者及25例健康人对照组的血清标本,记录患者的临床资料和数据。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清tRF-17的表达水平;绘制ROC曲线并分析tRF-17对乳腺癌的临床筛查价值;采用Spearman 相关分析tRF-17与血液炎症指标以及肿瘤标志物的相关性,随访截止日期为2023年4月,使用单因素和多因素COX回归分析乳腺癌预后不良的影响因素。结果﹐与健康人对照组的14.09(5.14,21.34)相比,乳腺癌患者血清tRF-17的表达水平[3.99(0.70，10.46)]显著降低,差异有统计学意义(Z=-3.575,P<0.01 ) ;其筛查乳腺癌的ROC曲线下面积(AUC"%)为0.742(95%C1 ;0.635~0.849，P<0.01)。tRF-17高表达组乳腺癌患者的平均生存时间显著高于低表达组(75.97个月vs 56.06个月， log-rank P<0.01)。COX比例风险模型分析提示,淋巴结转移和血清tRF-17表达水平均是影响患者预后的独立危险因素(HR=1.723,95%C1,1.084~2.739,P<0.05 ;HR=0.189,95%CI,0.041~0.862,P<0.05)。结论―乳腺癌患者血清tRF-17呈低表达,其表达水平是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素,或可成为一种评估患者预后的生物学标志物。

摘要:摘要:目的探讨分拣蛋白1( sotilin 1 ,SORTI )基因作为小儿脓毒血症新的诊断生物学标志物的临床应用价值。方法﹐从GEO数据库中获取了3个小儿脓毒血症相关的微阵列数据集(CSE13904,CSE26378和CSE26140) ,分析SORTI基因在正常样本和脓毒血症样本中的表达差异,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)在65例临床外周血样本中对其进行验证。使用基因集富集分析(CSEA)探讨SORTI基因相关的分子机制和生物学过程。结果在CSE13904,CSE26378,CSE26440数据集和临床外周血样本中,SORTI基因在脓毒血症样本中的表达水平均高于正常样本。与常用的炎症指标如降钙素原(PCT),C反应蛋白(CRP),白细胞(WBC)和中性粒细胞百分比(Neu%)相比,SORTI基因对小儿脓毒血症具有更高的诊断效能(AUc"C=0.863)。此外,SORTI基因可通过TNF-&/NF-kB信号通路参与小儿脓毒血症的发生、发展。结论SORTI基因对小儿脓毒血症具有一定的诊断价值,但需要在临床工作中进一步证实。

摘要:摘要:目的﹑探讨过敏性鼻炎(AR)患者血清25-羟基维生素D[25(OH)D],II-22水平与玉屏风颗粒治疗效果的相关性。方法选取2019年2月至2020年2月于本院就诊的AR患者196例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组(包括无效组、有效组、显效组),采用ELISA法检测两组血清25(OH)D和IL-22的表达水平并进一步比较两组的疗效。结果观察组的总体有效率(89.80%)显著高于对照组(76.53%) ,差异有统计学意义(=9.010,P=0.011)。治疗3个月后,观察组血清25(OH)D水平显著高于对照组(t=5.189,P=0.000) ,但血清IL-22水平显著低于对照组(1=2.345,P=0.020)。此外,治疗3个月后,无效组、有效组和显效组血清25( OH)D水平依次增加,但血清IL-22水平依次降低(F分别为167.486,21.801,P<0.001)。经Pearson 相关性分析发现,治疗3个月后AR患者血清25(OH)D与Il-2水平呈显著负相关( r=-0.431,P<0.05)。结论玉屏风颗粒对AR患者具有较好的疗效,且治疗效果越显著,患者血清25(OH)D水平越高,血清IL-22水平越低。关键词:过敏性鼻炎;玉屏风颗粒;25-羟基维生素D;白细胞介素-22

摘要:摘要:目的﹑探讨慢性乙型肝炎(CHB)非活动期携带者(IC)外周血单个核细胞(PBMCGs)中焦孔素(CSDM)分子成员基因和蛋白质的表达水平及其临床意义。方法收集2023年3月至8月于杭州市上城区中医院就诊的IC组患者22例以及性别和年龄相匹配的体检健康者(HC组)22例,利用实时荧光定量PCR(qgRT-PCR)检测两组外周血PBMCs中CSDM mRNA的表达水平,并对差异表达的蛋白质分子进行Westerm blot分析。结果IC患者外周血PBMCs中CSDMA(t=0.323 ,P=0.323)、CSDMB(t=42,P=0.243) , CSDMC(1=57,P=0.847)和PJVK(1=44,P=0.684)mRNA的表达水平与HC组比较差异均无统计学意义,而CSDMD(t= 19,P=0.019)和CSDME(t=20,P=0.023 )mRNA的表达水平均显著高于HC组。Western blot 结果显示,IC组患者PBMCs中 CSDMD(P=0.016)和CSDME(P=0.008)蛋白水平亦显著高于HC组。结论―持续的HBV感染可能影响GSDM分子的表达水平,不同GSDM分子在HBV感染中的作用机制存在差异。

摘要:摘要:目的探讨南宁地区儿童肺炎支原体肺炎(Myoplasma pneumorniae pneumonia ,MPP)的临床特征及重症肺炎支原体肺炎( severe Myoplasma pneumoniae pneumonia,SMPP)的危险因素并构建风险预测模型。方法收集2019年1月至2022年12月广西自治区妇幼保健院收治入院的6264例社区获得性肺炎(communit -acquired pneumonia,CAP)患儿的临床资料,其中包括MPP患儿1212例,分析其流行病学特点;进一步选取实验室指标完整的258例MPP患儿,根据病情严重程度分为轻症组(MPP组)106例和重症组(SMPP 组)152例,比较两组之间各项实验室指标的差异;经多因素逐步Logistic 回归分析,排除共线性问题,构建SMPP风险预测模型,并绘制ROC曲线以检验其预测效能。结果CAP患儿中以2019年(478例,39.4%)的MPP患儿占比最高,此外,学龄期组(175例,54.0%)、女童(577例,23.7%)和夏季(354例,29.2%)的MPP患儿占比较高(P均<0.05);通过Logistic回归筛选出住院时间,中性粒细胞百分比(Neu%） 清蛋白(Alb)和总T淋巴细胞(CD3*T)4项指标并建立联合预测儿童SMPP的模型,该模型的ROC曲线下面积(AUC")为0.925(95% C1,0.894~0.956,P<0.001) ,敏感性为0.816,特异性为0.906。结论﹐儿童MPP多发生在学龄期,以女童,夏季多见。基于住院时间、Neu% 、Alb , CD3"T指标建立的Logistic 回归模型对儿童SMPP具有良好的预测效能。

摘要:摘要:目的―探讨类风湿关节炎患者血清外泌体淀粉样蛋白A(SAA)含量与疾病活动度的相关性,并分析其是否具有免疫活性。方法﹐采用疾病活动评分DAS28-ESR将97例RA患者分为缓解期组(4例)和活动期组(53例)。采用ELISA法检测各组血清SAA和基质金属蛋白酶3(MMP-3)的含量;差速超速离心法提取血清外泌体, Westem blot和纳米颗粒示踪法鉴定提取的外泌体,BCA法检测外泌体蛋白质浓度,ELISA法检测外泌体中SAA的含量。采用Ficll-密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞(PBMCs) ,ELISA法分别检测无外泌体刺激的PBMCs与外泌体刺激的 PBMCs细胞培养上清液中Il-6及Ⅱl-8的浓度。结果﹑活动期组RA患者血清外泌体蛋白质浓度显著高于缓解期组(P<0.01);活动期组患者血清外泌体SAA浓度显著高于缓解期组(P<0.01);RA患者血清外泌体SAA与DAS28-ESR 、ESR, CRP ,SAA及 MMP-3均具有正相关关系(p值分别为0.45,0.42,0.57,0.62,0.37,Р均<0.05)。活动期组血清外泌体诱导PBMCs产生的lL-6水平显著高于缓解组与空白对照组(P均<0.05);活动期组和缓解期组血清外泌体诱导PBMCs产生的lL-8水平显著高于空白对照组(P均<0.05)。结论 RA患者血清外泌体SAA水平与疾病活动度相关,具有评估RA患者疾病进程的潜能;RA患者血清外泌体具有免疫活性,其促炎效应与疾病活动性相关。

摘要:摘要:淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症(lymphoplasmacytic lymphoma/Waldenstrom macroglolulinenia ,LPL/WM)是一种以血液中出现大量单克隆丙种球蛋白(IgM)为特征的、少见的惰性成熟B细胞淋巴瘤。其诊断标准包括血清中检测到单克隆性IgM,骨髓中浆细胞样或浆细胞分化的小淋巴细胞呈小梁间隙侵犯,特征性的免疫表型,除外其他已知类型的淋巴瘤以及90%以上的MYDS8 L265P突变。其发病机制与家族易感性,丙型肝炎、自身免疫病、意义未明的单克隆免疫球蛋白病(MGUS)以及MYDS8基因突变相关。实验室检查主要涵盖骨髓细胞学、血清学、组织学,免疫表型和基因突变。LPL/WM需要与IgM-MGUS、冒烟型WM(SWM)及其他淋巴增殖性疾病(LPD)进行鉴别诊断。LPL/WM治疗的优选方案包括BR[苯达莫司汀+利妥昔单抗(R)]、BDR(硼替佐米+地塞米松+R)、伊布替尼单药或伊布替尼+R(1类推荐)、RCD(R+环磷酰胺+地塞米松),泽布替尼单药(1类推荐)等。

摘要:摘要:溃疡性结肠炎(ulcenative colitis,UC)是炎症性肠病的一种,其病因尚不完全清楚,一般认为其发病机制与遗传易感宿主的肠黏膜和菌群相互作用下产生的异常免疫反应有关。研究发现在UC患者的血清中存在针对结肠上皮细胞反应的 IgG自身抗体,相比于传统的对内窥镜检查结果的观察以及组织学的综合评估,整合素αvβ6自身抗体检测对UC的预测、诊断、鉴别诊断、治疗和预后判断等方面具有较好的临床应用价值,其中整合素avβ6自身抗体相比于小肠杯状细胞抗体,pANCA自身抗体更具敏感性和特异性。整合素抗体阻断白细胞向肠道黏膜归巢,拮抗炎症性肠病炎症反应,是一种很好治疗手段。整合素及其抗体在UC的诊断与治疗中具有良好的应用前景。

摘要:摘要:细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是指来源于人,动物、植物和微生物的细胞旁分泌脂质双层亚细胞颗粒,存在于脊椎动物的生物体液中。EVs通过传递各种信号分子,介导牙周组织细胞间的信息交流和物质传递。多项研究报道了来自牙周致病菌的EVs可引发牙周炎,加重对牙周组织的破坏,甚至传播到远隔器官引起全身性疾病。然而,牙源性间充质干细胞衍生的EVs已被证实可以调节牙周局部免疫微环境,促进牙周组织的再生和修复,可被用于牙周炎的“无细胞”治疗。该文阐述了EVs在牙周炎中的双重作用机制,并对EVs在牙周炎治疗中的应用策略进行了综述。

摘要:摘要:目的﹑建立并鉴定面肩肱肌营养不良症(FSHD)患者外周血单个核细胞(PBMC)来源的诱导多能干细胞(iPSCs) ,初步探讨其骨骼肌分化能力,评估该细胞模型应用于疾病机制研究的可行性。方法收集1例FSHD患者的PBMC,用含4个重编程转录因子(OCT4,SOX2 ,KLF4和c-MYC)的仙台病毒感染PBMC并获得FSHD患者来源的iPSCs,继续诱导其骨骼肌分化。通过基因组光学图谱技术、核型、免疫荧光染色,实时荧光定量PCR等分析iPSCs和骨骼肌细胞特性。结果成功获得FSHD患者来源的iPSCs ,其可表达多能干性标记。FSHD-iPSC核型及D4Z4拷贝数结果与患者的临床背景一致,并在体外可定向诱导分化为骨骼肌细胞,该细胞同时表达DUX4致病基因以及调节基因。结论FSHD患者来源的PBMC可重编程为iPSCs，FSHD-iPSC可分化为疾病相关的肌源组细胞及肌管细胞,为FSHD发病机制的体外研究提供了良好的细胞模型,并为寻找该病的有效治疗手段提供了工具。

摘要:摘要:目的﹑探讨前列腺素家族( prostaglandins ,PCs)成员对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic faty liver disease ,NAFLD)的影响。方法﹐以人肝癌细胞系HepC2细胞为研究对象。试验设为对照组(Ctrl),脂肪变组(FFA),前列腺素B2( PGB2,10 ug/mL)处理组,15-酮基-前列腺素E2(15-keto-PCE2,10 ug/mL)处理组,8-异前列腺素F2a(8-iso-PCF2a ,10 ur/mL.)"处理组。采用噻唑蓝(MTT)试验检测细胞活性,油红О染色检测脂质沉积,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎性因子基因的表达情况，Western blot检测磷酸化胰岛素受体底物( p-IRS)蛋白的表达水平。另取15只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,随机分为基础组(CD组, n=5,10%低脂饲料喂养16周),高脂组(HFD组,n=5,60%高脂饲料喂养16周,建模NAFID),PCB2组(n=5,60%高脂饲料喂养16周后,每天给予尾静脉注射PCB2 20 ug/kg,持续2周)。采用小鼠葡萄糖耐量试验(IPCTT)检测小鼠的糖耐量水平,HE染色验证小鼠肝脏脂肪变程度。结果油红О染色结果显示,PCs对NAFLD的脂质沉积没有显著影响,但PCs能够缓解NAFLD伴随产生的炎症。qRT-PCR结果显示,FFA 组Ⅱl-lB水平[(2.274±0.550)倍]与对照组相比显著升高(P=0.002 8) ,而在50 ug/ mL.PCB2,10 u.g/mL. l5-keto-PCE2和10 ug/mL.8-iso-PCF2α的作用下,Il-lβ分别降低至[(0.720+0.036)倍,P=0.003 1,(0.857+0.225)倍,P=0.006 4和( 1.767±0.725)倍,P=0.0297]。Western blot 结果显示,经过PGs处理, -IRS蛋白的表达水平增加。CD组小鼠体重为(28.560+2.028)g,HFD组小鼠体重升高至(49.300±0.667)g,而PCB2组显著降低至(40.840+4.043)g,各组间差异有统计学意义(P=0.001 7) ;此外,PCB组葡萄糖耐量结果优于HFD组。HE染色结果显示,与HFD组比较,PCB2组肝脏脂肪变的程度降低。结论PCs中的 PGB2,15-keto-PGE2、8-iso-PCF2α可通过缓解IL-Iβ个导的炎症,上调p-IRS表达,促进胰岛素信号传导,减轻胰岛素抵抗,缓解NAFLD的发生、发展。

摘要:摘要:目的―探讨组蛋白甲基化转移酶Zeste同源物增强子2( enhancer of zeste homolog 2,IZH2)调控卵巢癌(ovariamn cancer,OC)生物学行为的机制,为寻找OC治疗的新靶点提供实验支持。方法﹐采用EZH2小干扰RNA ( small interfered RNA,siRNA)在不同OC细胞系中敲减FZH2,并使用qRT-PCR ,Western bot分析干扰siEZHD2 mRNA和蛋白质的效率。进一步采用CCK-8法、细胞划痕试验、Transwell试验以及流式细胞术检测干扰EZH2后对OC细胞增殖、迁移及侵袭能力和凋亡水平等生物学行为的影响。采用Western blot分析干扰EZH2后,早期生长反应因子1( early growth response 1,ECRI )和H3K27me3蛋白的表达水平,并分析EZH2调控OC细胞生物学行为的机制。结果﹒转染silZH2后,OC细胞系中EZHI2 mRNA的表达水平显著低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且 A2780细胞中EZH2蛋白的表达水平亦明显下调(P<0.05)。Westerblot检测结果表明,ECR1以及H3K27me3蛋白水平出现了不同程度地降低。转染siEZH2-1后,转染组A2780细胞的增殖能力显著低于阴性对照组(P<0.05);细胞划痕试验和Transwell试验结果显示,转染siHZH2-1后细胞的迁移和侵袭能力显著减弱(P<0.05) ;流式细胞术结果显示,转染siEZH2-1后细胞凋亡水平显著增强( P<0.05)。结论EZH2在OC细胞系中高表达，并促进A2780细胞的增殖,迁移、侵袭和抗凋亡。但EZH2并非通过其H3K27me3转移酶功能调控ECRI的表达而调控影响OC的生物学行为。

摘要:摘要:目的探讨多黏菌素耐药基因( mobile colitin resistance , mcr)在肺炎克雷伯菌中的流行分布特点。方法﹐使用Aspera软件从NCBI基因组数据库下载肺炎克雷伯菌的基因组序列,采用CheckM v1.1.3和Quest 5.0.2软件进行质量过滤,使用Prokka v1.13对基因组进行注释。从NCB网站下载所有mcr 基因序列,采用makeblastdb命令构建数据库,再采用自编写的Perl脚本程序从注释文件提取所有基因核苷酸序列为Query ,进行本地BLASTN分析,获得mcar阳性的菌株。从PubMLST网站下载肺炎克雷伯菌7个管家基因的基因序列文件和Profiles文件为数据库,采用自编写的Perl脚本程序提取基因核苷酸序列为Query ,进行本地BLASTNV分析,确定每个基因组的序列类型(ST')。使用自编写的perl程序从下载的肺炎克雷伯菌基因组GenBank文件中批量提取菌株元信息(如分离源,样本类型、国家和日期等)以分析mcr 阳性菌株的分布特点。使用卡方检验对比不同ST型之间mer分布的差异。结果在本研究纳入分析的全球11 429个肺炎克雷伯菌基因组中,207株细菌中检出229个mcr。mcr变异体共有6种, 认mer-l(87/229,38.0% ) ,mcr-8(59/229,25.8%)和mcr-9(59/229,25.8%)为主;207株细菌检出76种ST型,以ST15(21/207,10.1%) ,ST43( 17/207,8.2%) ,ST11(16/207,7.7%)和ST147(16/207,7.7%)为主。87株mer-l阳性菌株有31种ST,以ST43(17/87,19.5%)和ST15(10/87,11.5%)为主;59株mcr-8菌株有17种ST, 以ST43(17/59,28.8%)和ST11(9/59,15.3%)为主;59株mer-9菌株有27种ST,以ST147(11/59,18.6%)和ST274(11/59,18.6%)为主。不同的ST型携带的mcr变异体之间的差异亦有统计学意义。mcr阳性肺炎克雷伯菌来自全球五大洲的28个国家,以中国(68/207,32.9%)和泰国(45/207,21.7%)为主,主要来源于人体(100/207,48.3%) ,流行时间集中于2015年至2018年。结论在全球肺炎克雷伯菌中, mer的流行以mcr-l ,mcr-8,mer-9为主。mer-l的流行以ST15和ST43为主, mer-8的流行以STI1和ST43为主, mcr-9的流行以ST147和ST274为主。加强该类细菌的监测对于预防院内感染控制具有重要作用。

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