摘要:摘要:目的 使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对非01/0139)群霍乱弧菌(NOVC)进行鉴定和聚类分析,评估MALDI-TOF MS作为NOVC鉴定和聚类方法的可行性。方法﹐采用MALDI-TOF MS搭载V5数据库、V12数据库、高致病性菌种数据库和V5数据库联合自建预测图谱对NOVC进行鉴定,采用主成分分析(PCA)和核心图谱(MSP)聚类对NOVC进行分析。结果MALD-TOF MS搭载V5数据库或V12数据库均将NOVC错误鉴定为易北河弧菌,而高致病性菌种数据库或V5数据库联合自建预测图谱可对NOVC正确鉴定;MALDJ-TOF MS PCA聚类可将NOVC与其他菌种鉴别,并对NOVC进行种内细化区分,展示NOVC间距离关系;部分NOVC预测图谱与建库参考菌株极度相似,MSP聚类对NOVC种间差异无法区分。结论―MALDI-TOF MS对 NOVC的鉴定能力受其数据库限制,高致病性菌种数据库或辅以自建预测图谱可准确鉴定NOVC;PCA聚类对NOVC种间和种内鉴别以及同源性分析具有一定的参考意义。

摘要:摘要:目的︰筛选可用于临床辅助诊断溃疡性结肠炎( ulcerative colitis ,UC)的血清代谢标志物。方法﹐收集2022年9月至2024年3月在南京鼓楼医院消化内科住院的29例UC患者,31例克罗恩病( crohn's disease,CD)患者和21例相匹配的健康人对照者(healthy control,HC)的血清样本。利用超高效液相色谱-串联傅立叶变换质谱(ultra-high performance liquid chromatog-raphy -quadmupole orbitrap mass spectroneter Exactive HF-X,UHPLC-Q Exactive HF-X)技术对血清样本中的代谢物进行检测和分析,并构建偏最小二乘判别分析( partial least squares discrimination analysis,PL.S-DA)模型,根据变量权重值( variable impotantin projection ,VIP)>1,P值<0.05 ,FC>1.2筛选在UC中呈显著高表达的代谢物。通过京都基因与基因组百科全书(Kyoto Ency-clopedlia of Cenes and Cenomes ,KECC)数据库进行通路富集分析,以揭示代谢物所涉及的生物学途径,并计算ROC曲线下面积(AUCROC)以评估血清差异代谢物的诊断效能。结果3组样本共鉴定出1 522种代谢物,其中白细胞色素(VIP=1.964,P<0.05 ,FC=1.916)、2,3,4,5-四氢吡啶-2,6-二甲酸(VIP=1.74,P<0.05 ,FC=2.65),JN-乙基马来酰亚胺(VIP=1.519,P<0.05,FC=1.597)和5,6-二羟咧噪(VIP=3.018,P<0.05,FC=1.575)4种代谢物在UC中显著上调,其区分UC,CD时的AUC"分别为0.788(95%C1;0.655~0.921),0.773(95%C1;0.639~ 0.907),0.834(95%C1;0.720~0.949)和0.899(95%CI0.821~0.977) ,而区分UC,HC时的AUC"分别为0.966(95%CI,0.924~ 1.000),0.926(95%CI,0.857~0.995),0.969(95%C1,0.928~ 1.00)和0.910(95%C1,0.830~0.990)。KECG通路分析显示,UC中上调的代谢物富集于酪氨酸代谢,甘油磷脂代谢及花生四烯酸代谢等生物学途径。结论―UC患者的血清代谢模式发生显著变化,上述4种差异代谢物可作为鉴别诊断UC,CD与HC的有效生物学标志物。

摘要:摘要:目的探讨结缔组织病相关间质性肺疾病(CTD-ILD)合并EB病毒(EBV)血症患者的临床病理参数及危险因素。方法收集2023年1月至2024年4月于南京鼓楼医院呼吸与危重症医学科住院治疗的CTD-ILD患者,根据EBV DNA检测结果，进一步分为EBV DNA(+)组和EBV DNA(-)组,并对两组患者临床病理参数进行分析。结果在162例接受EBV DNA检测的CTD-JILD患者中有28例合并EBV血症。EBV DNA(+)组患者清蛋白水平显著低于EBV DNA(-)组[ (32.7±4.1 ) g/L vs(34.8±3.8)g/L,t=2.559,P<0.05],氧合指数显著低于EBV DNA(-)组[ (268.5±94.0) mmHg vs ( 323.2±120.9) mmHg ,t=2.062,P<0.05],一氧化碳弥散量占预计值水平显著低于EBV DNA(-)组[ (30.9±15.3) % vs ( 44.9±18.8)% ,t=2.127,P<0.05],乳酸脱氢酶(LDH)水平显著高于EBV DNA(-)组[ (369.1+206.2)U/L vs (298.8±128.7)U/L,t=2.335,P<0.05]。EBVDNA(+)组患者ILD急性加重发生症状较EBV DNVA(-)组多见(P<0.05)。多因素Logistic分析显示,蜂窝影和低氧合指数是CTD-ILD发生EBV血症的独立危险因素。结论CTD-JILD患者合并EBV血症后氧合更差,更易出现ILD急性加重。胸部HRCT蜂窝影和低氧合指数是发生EBV血症的独立危险因素。

摘要:摘要:目的﹑探究卵巢癌(OC)患者外周血中髓源性抑制细胞(MDSCs)及其亚群多形核髓源性抑制细胞(PMN-MDSCs),早期髓源性抑制细胞(e-MDSCs)、单核髓源性抑制细胞(M-MDSCs)及凝集素型氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)阳性PMN-MDSCs的比例,并分析其与患者临床病理参数的关系。方法﹒采用流式细胞术检测38例OC患者(OC组)和46例体检健康者(健康人对照组)外周血中MDSCs及其各亚群比例;利用ELISA法检测各组血清IL-10、TGF-8水平;进一步根据OC组LOX-1*PMN-MDSCs在MDSCs比例的中位数将其分为LOX-1高表达组和低表达组。结果OC组外周血单个核细胞(PBMC)中MDSC.比例,PMN-MDSCs比例及LOX-1*PMN-MDSCs比例均显著高于健康人对照组(U=492,P<0.001;t=8.741,P<0.000 1;U=223,P<0.000 1) ;OC组M-MDSCs比例及e-MDSCs比例均显著低于健康人对照组(1=4.366,P<0.000 1;t=6.927,P<0.000 1)。0C患者淋巴结转移组LOX-1'PMN-MDSCs比例显著高于未转移组(1=2.249,P<0.05)。OC组血清ⅡL-10.TGF-β水平显著高于健康人对照组(P<0.05);LOX-1高表达组血清TGF-β水平显著高于低表达组(t=2.302,P<0.05)。结论―OC患者外周血中LOX-1*PMN-MDSCs比例显著升高,并与淋巴结转移密切相关。

摘要:摘要:目的探讨微管相关蛋白4( microtubule-associated protein 4,MAP4)在胰腺癌( pancreatic adenocarcinoma,PAAD)患者组织中的表达水平及其临床意义。方法采用免疫荧光技术检测于聊城市人民医院就诊的60例PAAD患者组织中MAP4的表达水平。获取TCCA和GTEx 数据库中179例PAAD组织和332例正常胰腺组织的转录组数据,分析MAP4 mRNA的表达水平及其与患者预后的关系。通过生信分析MAP4的表达水平与肿瘤干性指标、肿瘤浸润免疫细胞以及免疫检查点的相关性。使用小干扰RNA技术沉默PAAD细胞系MiaPaCa-2和 PANC-1 中MAP4的表达,并通过CCK-8和Transwell 试验评估其对细胞增殖,迁移和侵袭能力的影响。结果免疫荧光技术结果显示,MAP4在PAAD组织中的表达水平显著高于正常胰腺组织( P<0.05)。生信分析结果表明,MAP4 mRNA在PAAD组织中的表达水平显著上调(P<0.05),且其高表达与患者较短的无病间期和无进展间隔显著相关(P<0.05)。MAP4的表达水平与RNA相关肿瘤干性指数呈显著负相关(r=-0.55,P<0.05 ) ,但与巨噬细胞和树突状细胞浸润呈显著正相关(r>0.5,P<0.05)。体外实验结果证实,沉默MAP4显著抑制了PAAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论MAP4在PAAD组织中呈高表达,其表达水平与患者预后、肿瘤干性和免疫细胞浸润密切相关。MAP4通过调节肿瘤细胞生物学行为和免疫微环境参与PAAD的进展,为PAAD的诊断和治疗提供了潜在的新靶点。

摘要:摘要:目的 探讨可溶性淋巴细胞活化基因3( soluble lymphocyte activation gene-3,sLAG-3)在乙型肝炎肝硬化( hepatitis B-r-lated cirhosis ,HBV-LC)患者血清中的表达水平及临床意义。方法收集2022年1月至2023年3月苏州大学附属第一医院感染科就诊的46例慢性乙肝( chronic hepatitis B,CHB)患者以及56例HBV-LC患者的临床资料,另选取同期42例体检健康者作为健康人对照组。检测各组血清sLAG-3,乙肝e抗原(HBeAg),透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(lanminin,LN),丙氨酸氨基转移酶(ALT')、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及乙肝病毒核酸(HBV-DNA)等指标,并计算肝纤维化4因子指数( fibrosis-4 index,FIB-4)、AST和血小板比率指数(AST to platelet ratio index , APRI)。采用Spearman 相关性分析血清sLAG-3与各项实验室指标之间的相关性;采用ROC曲线评估血清sLAC-3水平对CHB进展为HBV-LC的诊断效能。结果CHB组,HBV-ILC组和健康人对照组之间血清sLAG-3水平差异存在统计学意义(H=28.7,P<0.0O1) ,且 HBV-LC组血清sLAG-3水平高于CHB组(U=789.0,P<0.001)。Spearman 相关性分析结果显示,HBV-IC组血清sLAG-3水平与ALT, AST,APRI FIB-4,HA 、LN水平呈正相关,其相关系数(r)分别为0.282(P=0.004) ,0.433( P<0.001),0.618( P<0.001 ),0.596(P<0.001),0.519(P<0.001 ) ,0.230( P=0.020)。血清sLAG-3水平诊断CHB进展为HBV-IC的ROC曲线下面积(AUC")为0.69,敏感性为75.0% ,特异性为65.2%。结论 sLAG-3在CHB,HBV-IC患者血清中呈高表达,并与疾病进展显著相关,对HBV-LC的诊断具有一定的临床应用价值。

摘要:摘要:病原体的快速、准确诊断对感染性疾病的有效控制和治疗至关重要,基于核酸的检测方法因具有高灵敏度、高特异性被广泛应用于实验室检测和临床诊断。目前,定量聚合酶链式反应(qPCR)已成为核酸诊断的金标准,然而,该方法对仪器设备和操作者技能要求较高并且容易发生气溶胶污染,不适用于病原体的即时检测。成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)及CRISPR相关蛋白(Cas)系统(简称为CRISPR-Cas)克服了其他核酸检测方法的局限性,为病原体核酸的即时检测提供了新工具。该文从CRISPR-Cas系统的组成及作用机制、基于不同类别Cas蛋白的检测方法以及检测方法的发展趋势3个方面对基于CRISPR-Cas系统的病原体核酸检测方法进行总结,旨在为进一步提升上述方法的可操作性以及开发更多新的检测方法提供思路。

摘要:摘要:目的探讨炎症标志物C5a调控M2型巨噬细胞极化的作用机制及其在肺癌预后评估中的临床应用价值。方法﹐分别利用C5a刺激佛波酯(PMA)处理的人单核细胞白血病细胞系THP-10,6,12,24和48 h或0,1,2,3,6和12 h后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定M2型标志物CD163和CD206的mRNA表达水平; Westerm blot测定组蛋白乙酰基转移酶——通用控制非抑制蛋白5(CCNS)的表达水平;免疫共沉淀( co-IP)测定巨噬细胞关键转录因子CATA结合蛋白3(CATA3)乙酰化及其与CCN5,EIA结合蛋白p300(Ep300/p300)的结合能力;利用CCN5抑制剂丁内酯3预处理巨噬细胞后行C5a刺激,采用Westerm blot和co-P技术分别测定CD163和CD206的表达水平,CATA3的乙酰化及其与CCN5的结合能力;通过KM plotter数据库分析肺癌组织中C5a受体1(CSaR1)与GCN5的表达水平在肺癌预后评估中的临床意义。结果 在PMA诱导贴壁的巨噬细胞中,C5a上调巨噬细胞中CD163和CD206的mRNA水平,CCN5的表达水平,GATA3的乙酰化以及两者的结合能力，但不影响GATA3与p300的结合能力;抑制CCNS活性不仅能显著降低CATA3的乙酰化及其与GCNS的结合能力,还能下调CD163和CD206的表达水平;高表达CSaR1或CCNS肺癌患者的总体生存率明显降低。结论―C5a通过促进CCNS乙酰化CATA3,促进M2型巨噬细胞极化,肺癌组织中C5aRl和GCNS的表达对患者的预后评估具有一定的临床应用价值。

摘要:摘要:目的︰分析复发性流产(recurrent spontaneous abortion ,RSA)患者血清细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)环状RNA(circular RNAs,circRNAs)的表达及临床意义。方法收集2021年5月至2023年3月就诊于山东大学齐鲁医院的3例RSA患者和3例正常妊娠者(对照)血清样本,采用基因表达谱芯片筛选血清EVs中差异表达的eircRNAs。收集10例RSA患者和10例对照为训练集,80例RSA患者和64例对照为验证集,利用实时荧光定量PCR( real-time quanitative polymerase chain reac-tion ,RT-PCR)检测两组间差异circRNAs 的表达水平,采用ROC曲线评价差异circRNAs对RSA的诊断价值。结果采用基因表达谱芯片共检测出血清EVs中存在57563个circRNAs,且与对照组相比,RSA患者中存在差异表达的为3 516个(其中2 377个上调,1139个下调)。qRT-PCR在训练集和验证集中的检测结果显示,RSA 组血清EVs hsa_circ_0054403的表达水平[2.07(1.00,6.68)]显著高于对照组[ 1.00(0.42,1.46),U=1 239,P<0.01 ];而 hsa_circ_0020897 [0.33(0.11,1.40) vs 1.00( 0.46,3.66)]和hsa_circ_0072745[ 0.49(0.22,1.60) vs 1.00(0.51,7.93)]的表达水平显著低于对照组(U分别为1 712和1714,P均<0.01)。ROC曲线显示,血清EVs hsa_circ_0054403,hsa_circ_0020897和hs_circ_0072745对RSA具有较高的预测价值,其ROC曲线下面积( AUC")分别为0.758,0.666,0.664,敏感性和特异性分别为47.5%和100.0% 、50.0%和81.2% 、62.5%和70.3%。上述3个circRNAs联合检测时,其AUCG为0.842,敏感性和特异性分别为73.7%和79.7%。结论hsa_circ_00514403 ,hsa_circ_0020897,hsa_circ_0072745在RSA患者血清EVs中呈异常表达,可作为预测RSA的潜在标志物。

摘要:摘要:目的﹑观察白藜芦醇对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响,探究其作用机制及其与免疫细胞浸润的相关性。方法运用网络药理学和生物信息学(CEPIA和KMPLOT数据库)预测白藜芦醇调控乳腺癌的靶基因,验证其在乳腺癌中的表达水平及与免疫细胞浸润的相关性;采用CCK-8法检测白藜芦醇对乳腺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡水平,细胞划痕试验检测对细胞迁移能力的影响,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测相关靶基因mRNA的表达水平，采用Pearson 相关分析各基因的表达水平与免疫细胞浸润的相关性。结果乳腺癌组织中TP53 ,VEGFA基因的表达水平均明显高于正常组织(Z分别为-4.181,-8.763,P<0.05)。在CEPIA数据库中乳腺癌组织CDKNIA基因的表达水平明显高于正常组织(Z=-2.135,P<0.05) ,在KMPLOT'数据库中乳腺癌组织HIFlα基因的表达水平明显高于正常组织(Z=-2.269,P<0.05)。Pearson相关分析显示,TP53基因的表达与B细胞浸润呈正相关(parial.cor=0.102,P<0.01);HIFla基因的表达与CD8*T细胞,CD4*T细胞、单核细胞、中性粒细胞和树突状细胞浸润呈正相关( partial.cor分别为0.39,0.159,0.284,0.325,0.294,P<0.01);VECFA基因的表达与中性粒细胞浸润呈正相关( partal.cor=0.141,P<0.01) ;CDKNIA基因的表达与CD8*T细胞、单核细胞、中性粒细胞和树突状细胞浸润呈正相关( partialL.cor分别为0.081,0.209,0.1 1,0.09,P<0.01)。白藜芦醇可抑制乳腺癌细胞的增殖能力,在其作用48 h后乳腺癌细胞ICg和IC;.值分别为150 umol/L和50 umol/L;此外,白藜芦醇还可将乳腺癌细胞阻滞于C。期,诱导细胞凋亡以及抑制其迁移。白藜芦醇处理乳腺癌细胞24h后,随着药物浓度的增加(50 umol/L组和150 umol/L组) ,TP53和HlF'la基因mRNA的表达量逐渐增加,两组间差异具有统计学意义(P<0.05);而作用48 h时VEGFA基因mRNA的表达量明显减少,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论TP53 ,HIFIa ,VECFA和CDKNIA基因是白藜芦醇调控乳腺癌的作用靶点,主要参与调控乳腺癌的免疫细胞浸润。白藜芦醇抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞周期阻滞、凋亡以及抑制细胞迁移,是通过调控P53-HIF1w/CDKN1A-VEGFA信号通路实现的。

摘要:摘要:目的―探讨简阳地区急性呼吸道感染儿童偏肺病毒(HMPV)感染情况及其临床病理参数。方法﹑选取2023年3月至2024年2月就诊于简阳市人民医院的急性呼吸道感染住院患儿2669例,采用多重PCR及毛细管电泳技术检测13项呼吸道病原体,收集HMPV感染患儿的临床资料并进行统计学分析。结果在2669例急性呼吸道感染患儿中共有209例检出HMPV,阳性率为7.83%。阳性患儿主要集中于5岁以内儿童(73.21%) ,以咳嗽、发热、喘息、气促为主要临床表现。单纯HMPV感染率为58.85% ,混合细菌感染率为26.69% ,混合病毒感染率为13.88%。混合感染组白细胞(WBC),淋巴细胞(LYM)、血小板(PLT),C反应蛋白(CRP),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白l(cTn I),降钙素原(PCT')水平均显著高于HMPV单纯感染组(P<0.05 ),而血红蛋白(H),总蛋白(TP)、肌酐(Gr)水平显著低于HMPV单纯感染组(P<0.05)。相比于非重症肺炎组,重症肺炎组的WBC,HIb,PLT,CRP等水平显著升高(P<0.05)。多因素Logistic 回归分析显示,年龄<3岁、合并感染、CRP≥20 mg/L是发生重症HMPV肺炎的危险因素(P<0.05)。结论HMPV是引起简阳地区儿童急性呼吸道感染的重要病原体之一,部分实验室指标水平升高与感染的严重程度相关。早期完善细菌学检查和炎症指标的检测,有利于指导临床治疗。

摘要:摘要:目的探讨酪氨酸3单加氧酶/色氨酸5单加氧酶激活蛋白((YWHAZ)在乳腺癌组织中的表达水平及其对乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖,迁移以及侵袭能力的影响。方法﹑采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测96例乳腺癌患者癌组织中YWHAZ基因的表达水平;采用Pearson法分析癌组织中YWHAZ的表达水平与患者临床病理参数及预后的关系;通过CCK-8法、细胞划痕试验、Transwell试验验证下调YWHAZ对MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,采用Western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadlherin和Vimentin表达水平的变化。结果﹐三阴性乳腺癌(2.659+0.214,t=2.815,P=0.012)和非三阴性乳腺癌(1.822±0.165,t=5.079,P=0.001)患者癌组织中YWHAZ的表达水平较癌旁组织均显著上调;乳腺癌组织中YWHAZ的表达水平与血管浸润、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、病理分型以及复发情况有关(P<0.05);在乳腺癌TNM I~Ⅳ期患者中,高水平YWHAZ患者的无复发生存率(X'=31.10,P<0.000 1)和总体生存率(X'= 18.99,P<0.000 1)较低水平YWHAZ患者均显著缩短;YWHAZ.水平是乳腺癌患者预后较差的独立危险因素;下调YWHAZ能够抑制MCF-7细胞增殖(F=10.73,P=0.000 4),迁移(1=20.88,P=0.002 3)和侵袭(t=13.72,P=0.000 2)能力; Westerm blot证实下调YWHAZ表达后，E-cadlherin蛋白水平升高(4.478±0.832,l=8.45,P=0.013 7) ,但Vimentin蛋白水平下调(0.549土0.143 ,t=6.86,P=0.020 6)。结论YWHAZ.异常高表达与乳腺癌发生、发展以及不良预后密切相关，下调YWHAZ能够抑制乳腺癌细胞系MCF-7增殖、迁移,侵袭以及EMT进展。

摘要:摘要:目的探讨翻转课堂联合教学阅片模式在研修生丝状真菌形态学教学中的应用效果以及对该教学模式的评价。方法选取广东省人民医院2022年批次进修微生物检验专业的15位研修生为对照组,2023年批次的15位研修生为实验组。选取“曲霉和毛霉目真菌形态学鉴定"两部分教学内容,实验组采用翻转课堂联合教学阅片模式,对照组采用传统教学模式,比较两组研修生在教学实施前后的理论成绩,操作成绩,阅片成绩和总考核成绩,并采用问卷星调查实验组研修生对于该教学模式的评价。结果﹐实验组操作成绩,阅片成绩和总成绩中位数分别为40分,30分和95.5分,而对照组对应成绩中位数分别为36分,27分和85.5分,实验组研修生在操作,阅片和总成绩上的得分明显高于对照组研修生(P<0.05)。结论翻转课堂联合教学阅片模式有助于提高研修生的丝状真菌形态学教学效果,满意度高,可为后续的丝状真菌形态学教学提供参考。

摘要:摘要:该文报道了1例特殊免疫表型的血管免疫母细胞T淋巴瘤患者的诊疗过程。患者74岁,男性,因“下肢水肿”就诊,外周血涂片可见胞浆空泡状的异常淋巴细胞,外周血流式细胞术显示,异常T淋巴细胞跨系表达B淋巴细胞标志——CD20,且丢失T淋巴细胞标志——膜表面CD3(mCD3)。后续结合病理活检、染色体分析及分子生物学分析等综合检查,确诊为血管免疫母细胞T淋巴瘤。血管免疫母细胞T淋巴瘤少见且预后差,病理活检为诊断金标准,但存在局限性。该案例证实,外周血形态学联合流式细胞学适用于早期、低创伤性筛查血管免疫母细胞T淋巴瘤,针对如跨系表达CD20这类特殊免疫表型开展靶向治疗,有望为该病的治疗提供新思路。