摘要:摘要:男性不育备受全球关注,精液分析是评估男性生育力的关键,其结果准确性影响临床决策。室间质量评价(EQA)是监控实验室分析质量的重要手段,对于精液分析,国外起步于1990年,中国2009年开始探索并取得进展。但目前精液分析EQA面临诸多挑战,EQA提供者存在项目覆盖范围有限,质评物制备困难,指定值确定方法不统一、可接受范围标准不一致等问题;参加者存在参与率低,标准化操作与室内质量控制落实不力,对EOA结果利用率低等情况;监管体系亦不够完善。建议EQA提供者拓展项目,改进质评物制备技术、统一标准,参加者提高参与度和检测质量,监管部门完善政策和体系建设,以推动精液分析EQA发展,促进精液分析结果互认,提升医疗服务水平。

摘要:摘要:目的 初步探讨CRISPR-Cas9基因编辑技术在修复抗凝血酶(AT)基因SERPINCI c.318_319insT突变中的应用价值。方法通过CRISPR在线设计网站设计并合成单链向导RNA( sgRNA ) ,构建AT c.318_319insT突变体和CRISPR-Cas9修复体,将野生型AT' c.318_319insT突变体和CRISPR-Cas9修复体的基因片段转入慢病毒表达载体中,采用PCR及测序法验证。将构建成功的慢病毒重组质粒转染至人胚肾细胞HEK293T中。细胞培养后,裂解HEK293T细胞,用ELISA法和westem blot法比较野生型、CRISPR-Cas9修复体和突变体的细胞裂解液中AT抗原(AT:Ag)含量;用细胞免疫荧光实验对重组AT蛋白进行体外表征。结果 AT c.318_319insT突变体和CRISPR-Cas9修复体构建成功,HEK293T细胞体外实验显示,以细胞裂解液中野生型的AT:Ag设为100% ,CRISPR-cas9修复体AT':Ag为47% ,AT c.318_319insT的AT:Ag为22%6 , western blot和细胞免疫荧光实验的结果与之相符。结论﹐细胞体外实验验证CRISPR-Cas9基因编辑技术能有效原位修复抗凝血酶基因SERPINCIc.318_319insT突变,为CRISPR-Cas9基因编辑技术应用于临床血栓性遗传病的基因治疗提供实验支持。

摘要:摘要:目的﹐分析缺血性脑卒中(IS)患者血清高密度脂蛋白3亚型胆固醇(HDL3-C)水平,探讨其对患者病情和预后评估的临床价值。方法连续选取2023年1月至6月于东部战区总医院神经内科确诊的S患者124例和健康对照者47例,检测研究对象血清HDL3-C,总胆固醇(TC),三酰甘油(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及血糖(Clu),白蛋白(Alb),白介素6(IL-6),降钙素原(PCT)水平;计算IS患者入院时的美国国立卫生研究院卒中量表(NHSS)评分、出院时的改良Rankin量表(MRS)和Bathel指数(Bl)评分;IS患者随访Ⅰ年,详细记录其卒中后遗症及再次发生急性脑血管事件的发生时间。采用Spearman相关性分析探讨IS患者血清HDL3-C水平与其他临床、生化参数的相关性;采用Logistic回归分析血清HDL3-C评估IS发生风险的临床价值。采用Cox回归分析血清HDL.3-C评估IS患者预后的临床价值。结果与对照组相比,S组患者血清HDL3-C ,HDIL-C和Alb水平降低(P均<0.05) ,但TCG ,Clu水平均升高(P均<0.05)。IS患者血清HDL3-C水平与TC(r=0.231 ,P=0.003) ,HDL-C(r=0.831,P<0.001 ) 、 Alb(r=0.451,P<0.001)及出院B评分(r=0.216,P=0.018)呈正相关,而与TC(r=-0.396,P<0.001)、ILl-6(r=-0.290,P=0.013)及入院NHSS评分(r=-0.187,P=0.041),出院MRS评分(r=-0.227,P=0.012)呈负相关。多因素Logistic 回归分析显示,校正年龄、性别和'TC 、TG、LDL-C JHDL-C水平的影响后,低HDL3-C( OR=0.853,95%CI=0.740~0.984,P=0.030)水平仍然与IS发生风险独立相关。Cox回归多因素分析显示，校正年龄,性别及'TC、TG ,HDL-C, LDL-C的影响后,降低的初始HDL.3-C水平仍然与IS患者预后不良独立相关(HR=0.710,95%CI=0.517~0.976,P=0.035)。结论﹐IS患者血清HDL.3-C水平降低,且与预后不良独立相关;HDL.3-C对评估IS患者病情及预后有一定的参考价值。

摘要:摘要:目的﹐寻找与精液高黏稠性形成相关的miRNAs ,探讨其在精液高黏稠性形成过程中的可能作用。方法选取5例高黏稠精液(高黏稠组)和5例黏稠度正常精液(对照组) ,对2组精液分析后离心获得精浆,采用基于lumina技术平台的高通量测序技术进行深度测序,筛选并比较⒉组精浆miRNAs的表达差异;并通过实时荧光定量PCR(qRKT-PCR )对差异性表达的miRNAs进行验证与靶基因预测,采用基因本体(CO)及KECCG通路进行功能显著性富集分析。结果﹒高黏稠精液组和对照组间显著差异表达的miRNAs 共计82种,其中76种表达上调,6种表达下调。qRT-PCR 验证结果显示差异性miRNAs( miR-449a ,miR-517a-3p和miR-1257)的表达趋势与高通量测序结果基本一致。CO功能分类注释显示, miRNAs 靶基因在分子功能上主要富集于泛素样蛋白连接酶结合,激酶活性和离子跨膜转运活性,在生物过程中主要参与神经元凋亡过程调控、离子跨膜运输调控等,在细胞组分上主要参与细胞膜,高尔基体膜和吞噬小泡的形成等。KECC通路富集分析显示靶基因主要富集于ErtbB,neurotrophin ,与信号分子相互作用、信号转导以及癌症相关等信号通路。结论―高黏稠精液中存在多种差异表达的miRNAs分子,可为寻找一种或一组用于高黏稠精液诊断及治疗效果评估的分子标记物提供依据。

摘要:摘要:目的―探讨精子非整倍体与不明原因复发性流产的相关性。方法选取2021年11月至2023年12月因复发性流产于西北妇女儿童医院生殖医学中心就诊的患者的男性配偶,在排除夫妻双方染色体结构或数目异常,女方年龄≥37岁和其他女性流产因素后的34名男性作为实验组。选择30名生育过健康子女或仅因女方因素不育且精液参数正常的男性作为对照组。对2组进行常规精液分析,并采用荧光原位杂交技术(FISH)检测精子非整倍体。结果2组在年龄,精液体积,精子浓度、前向运动精子百分率和正常形态精子百分率上差异均无统计学意义(P均>0.05)。但实验组的总缺体率[(2.10±1.93 ) % vs(0.54+0.27)%],总二倍体率[(0.25±0.27)%e vs (0.05±0.05)%]以及18号染色体[(0.77±1.15)% vs (0.18±0.21)%],性染色体[(2.79+2.38)% vs (0.78±0.52)%],13号染色体[ (0.79土0.99) % vs (0.21±0.22)%]和21号染色体[ (1.24±1.68 )% vs(0.22±0.19)%]的二体率均高于对照组(P均<0.05)。以对照组精子非整倍体率的均值加2倍标准差(+2s)作为参考区间上限,实验组18号,13号,21号,性染色体精子二体率和总二倍体率超出阔值的占比分别为41.18%,35.29%6 ,41.18%,55.88%和47.06% ,其中以性染色体的二体率异常占比最高。结论 精子非整倍体率可能是导致女方不明原因复发性流产的相关因素,对男性生育力评估和男性不育诊断具有一定的临床意义。

摘要:摘要:目的通过分析1例Alport综合征家系的临床表现与基因型特征,明确该家系的致病基因,为其家系的遗传咨询及指导夫妻双方再次妊娠提供全面的理论基础。方法基于对先证者既往全外显子组基因检测报告的深入复审,并紧密结合报告中的突变位点信息,对该先证者的家族成员进行Sanger测序验证。同时,全面评估先证者的临床表现及家族史,以此为依据对既往全外显子组基因检测报告进行重分析。结果﹐针对先证者携带的COLAA4基因上第35号内含子区的杂合突变(COL4A4;NM_0000924,c.3289+1G>A) ,在家系验证中发现有临床表现的先证者的父亲(Ⅲ7),大舅祖父(I2),小舅祖父(I5)、祖母(6)和姑母(Ⅲ6)存在COL4A4;c.3289+1G>A杂合突变;没有临床表现的先证者的母亲(Ⅲ8) ,太祖母(2),姨祖母(Ⅱ3),舅祖父(I4),祖父(7)该位点未发现突变。此外,对于先证者携带的COL4A3基因上第27号外显子区的杂合突变(COLAA3;NM_000914;c.1956A>G),在家系验证中发现先证者的父亲(Ⅲ7)无COL4A3,c.1956A>G突变;先证者的母亲(Ⅲ8),外祖母(9)和姨母(Ⅲ9)虽没有临床表现但均携带该位点杂合变异。结论﹐明确COLA44NM_0000924,c.3289+1G>A剪接位点突变是该家系的致病原因,结合高通量测序技术和Sanger测序可以有效诊断Alport综合征,为夫妻双方再次妊娠提供遗传咨询。

摘要:摘要:目的﹑探讨串联质谱技术检测羊水异戊酰基肉碱(C5)和C5与乙酰基肉碱(C2)比值(C5/C2)在携带异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)基因意义未明变异位点的异戊酸血症(IVA)产前诊断中的应用价值。方法﹐回顾性分析107例孕18~18*周正常胎儿羊水代谢物水平,建立C5和C5/C2的参考区间。以1个IⅣA患者家系中2例胎儿(胎龄18°周和18*周)为研究对象，先证者携带父母来源的1个疑似致病性缺失和Ⅰ个意义未明的错义突变。采用串联质谱非衍生化法检测胎儿羊水C5和C5/C2水平,同时进行ⅣD基因检测。结果﹑107例正常胎儿羊水C5和C5/C2的0.5% ~99.5%参考区间分别为0.036~0.259Lmol/L和0.024~0.091。先证者家系中,1例胎儿羊水C5和C5/C2明显高于参考区间上限,基因型与先证者一致,诊断为IVA,后终止妊娠;另1例胎儿羊水C5和C5/C2正常,仅携带父源性突变,诊断为携带者,生后临床表型正常,新生儿足跟血串联质谱结果正常。结论﹐串联质谱技术检测羊水C5和C5/C2水平与IVD基因诊断具有良好的一致性,可作为携带意义未明变异IVA家系产前诊断的生化辅助手段。

摘要:摘要:系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的慢性自身免疫病,其中狼疮性肾炎(LN)是常见且严重的脏器受累之一。尽管肾活检仍然是诊断LN的金标准,但有创性限制了其在疾病动态监测中的应用。因此,寻找无创的生物标志物用于IN的早期诊断和疾病活动度的动态监测显得尤为重要。该文详细阐述了自身抗体的产生机制及其致病机理,重点介绍了抗核小体组分抗体,抗补体抗体,与中性粒细胞胞外陷阱相关的抗体以及抗α-actimin ,抗 annexin Al ,抗 α-enolase等抗体在LN诊断、疾病活动度评估和预后判断中的价值,并阐明了IgG。亚型自身抗体的重要性及多种自身抗体联合应用的优势。通过总结自身抗体的致病机制及其临床应用研究进展,为IN的早期诊断,精准治疗和预后评估提供新的思路和潜在标志物。

摘要:摘要;家族性高胆固醇血症(FH)是严重的遗传代谢性疾病,临床分为纯合子FH( HoFH)和杂合子FH( HeFH) ,其中HFH较为罕见但病情严重,儿童时期即有极高的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,导致早发动脉粥样硬化性心血管病(AsCVD)甚至危及生命。早发现、早诊断,早治疗可有效控制病情发展,延长生命。但由于缺乏对HFH的认识和管理策略,导致HoFH漏诊或延迟诊断。近年来,国内外已出台多个FH相关指南或共识,但针对HoFH的指南报道较少。近期发表的《纯合子家族性高胆固醇血症早期筛查与管理中国专家共识(2024年)》,提出了HoFH早期筛查的具体实施举措以及早诊早治的综合办法。准确高效的血脂检测和基因检测已成为筛查HoFH的第一道关口,可帮助临床医生提高诊断和鉴别诊断水平,该文以检验医师的视角对该共识进行详细解读。

摘要:摘要:目的 探讨Sx30基因突变对精子生成及功能的影响。方法﹐用CRISPR-Cas9技术进行基因编辑以获得Sox30""突变小鼠,Sanger测序鉴定小鼠基因型。经精子计数,计算机辅助精子分析,苏木素-伊红染色,免疫荧光等技术分析Sox30突变对小鼠生精过程及活力的影响。结果相较于野生型Sox30小鼠,杂合Sox30"…*小鼠和纯合Sox30"3SP645小鼠的睾丸大小体质量和精子数差异均无统计学意义(P>0.5);精子动力分析显示,Sox30"5YPT135小鼠能动精子比例比Sox30小鼠下降约10%(P<0.05) ,但纯合小鼠的精子形成过程无明显异常。结论Sox30"充点突变虽对小鼠生精过程无明显影响,但在一定程度上影响小鼠精子的运动能力。

摘要:摘要:目的―探讨血浆12种细胞因子在胰腺癌患者中的表达及临床意义。方法﹐以2023年3月至2024年6月在青岛大学附属医院诊治的120例胰腺癌患者及68例健康对照者为研究对象。采用多重徵球流式免疫荧光发光法检测血浆12种细胞因子水平,即白细胞介素(IL)-1β、IL-2、ILl-4,、IL-5、Il-6、IL-8、IL-10、IL-12P、IL-17、干扰素(IFN)-ax , IFN-y和肿瘤坏死因子(TNF)-a水平;采用电化学发光法检测胰腺癌患者血清肿瘤标志物癌胚抗原( carcinoembryonic antigen,CEA),糖类抗原19-9( carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)和糖类抗原T2-4(CAT2-4)水平,用化学发光法检测糖类抗原242(CA242)水平,并用Spearman秩相关性检验分析表达水平发生变化的细胞因子与肿瘤标志物表达之间的相关性。结果胰腺癌组患者血浆9种细胞因子水平(ILl-1β、ILl-4,、IL-5,IL-6,Il-8,IL-10,IL-17、IFN-&和IFN-y)均高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05) ;晚期胰腺癌组血浆IL-1β、IL-6,ILl-8、IL-10和IL-17均高于早期组,差异有统计学意义(P<0.05) ;低分化胰腺癌组血浆Ⅲ-6水平高于高分化胰腺癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。晚期胰腺癌组血清CEA,CA19-9,CA242和CA72-4水平高于早期组,低分化胰腺癌组血清CEA水平高于中分化胰腺癌纽,差异均有统计学意义(P均<0.05)。胰腺癌患者经4周期化疗后,疾病控制组血浆IL-8水平较治疗前降低,而疾病进展组血浆I-6,IL-8和Il-10水平较治疗前升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);胰腺癌患者血浆IL-6水平与血清CEA水平(r,=0.238,P<0.01)和血清CAI9-9水平(r,=0.186,P<0.05)呈正相关;血浆Ⅱl-10水平与血清CA72-4水平(r,=0.220 ,P<0.05)呈正相关。结论﹐血浆ⅡL-6等9种细胞因子可能参与了胰腺癌炎症微环境的形成、肿瘤细胞增殖和分化过程,其血浆水平测定有助于病情和疗效评估。

摘要:摘要:目的探讨数字化转型在优化唐氏综合征血清学筛查(唐氏筛查)检验前质量控制中的应用价值,并评估其对提高筛查效率和质量的实际效果。方法采用回顾性前后对照研究设计。对照组选取佛山市妇幼保健院产前诊断中心2017年9月1日至2018年4月30日(数字化系统实施前)连续10 000份唐氏筛查申请单;观察组选取2023年1月1日至2023年6月30日(数字化系统实施后)连续10000份唐氏筛查申请单。计算两组申请单错漏率,数据录入准确率和平均时长,以及临床开具申请单的平均耗时并进行统计分析。结果﹑数字化系统应用前, 10 00份申请单中出现错漏共计145例,错漏率为1.45%。与对照组相比,观察组申请单错漏率降低(0.42% vs 1.45% ,P<0.05);数据录入准确率提高( 100.00% vs 99.22% ,P<0.05);平均录入时长[(0.16±0.04) min vs ( 1.03+0.22) min,P<0.05]和开具申请单平均时长[(0.38±0.12) min vs ( 1.66+0.31) min,P<0.05]均缩短。结论将数字化转型应用于唐氏筛查的检验前质量控制,能够有效降低申请单填写错漏率,提高数据录入的准确性和时效性,缩短操作时间,从而优化大规模人群筛查流程,提升整体服务质量和效率。

摘要:摘要:目的︰分析全球范围内粪肠球菌的分布特征序列分型(ST)及wn基因的分布情况,为糖肽类耐药菌株的感染防控与临床治疗提供参考。方法﹐使用Aspera软件从NCBI批量下载截至2023年12月7日的所有粪肠球菌基因组序列数据,并通过Perl程序从下载的基因组序列文件中获取所有基因组的核苷酸序列和菌株元信息。耐药基因van 的序列数据来自NCBI病原细菌耐药基因数据库,并通过BLASTN软件比对分析,以确定ran耐药基因在各基因组中的分布情况。从pubMLST网站下载粪肠球菌的7个管家基因的等位基因序列文件,并使用自主开发的ST_tool工具对所有菌株进行ST。结果共获得2781株粪肠球菌基因组数据,分离时间跨度从1920年至2023年,整体分离率2019年达到最高峰。按地域分布,中国,美国和新西兰的粪肠球菌分离数量位居前三,分别占比15.61%(434株)、12.87%(358株)和5.57%(155株)。共771株茵株来源于人类样本,主要分离自尿液(168株),粪便(154株)和直肠拭子(69株)。2781株粪肠球菌共鉴定出359种ST,其中ST16(188株，7.29%) , ST6(178株,6.90%)和ST179(150株,5.82%)为主要分型。美国、中国和新西兰的优势流行分型分别为ST6( 10.71%) ,ST16(9.59%)和ST108(67.10%)。此外,282株粪肠球菌携带糖肽类耐药基因,主要为tanA型(207株)和vanB型(72株) ,其中ST108(100株)和ST6(43株)分别为van4型和vanB型的主要流行分型。结论﹐全球粪肠球菌分布存在显著的地域差异,糖肽类耐药基因vanA4型和vanB型在耐药菌株中较为普遍,且表现出多重耐药的进化趋势,提示临床需加强监测与防控措施。

摘要:摘要:目的了解杭州地区女性不孕症患者ToRCH感染情况。方法选取2021年1月至2023年12月就诊于杭州市妇产科医院生殖医学中心的1360例女性不孕症患者(原发不孕687例、继发不孕673例)和1024例同期孕早期健康对照,采用化学发光法检测血清ToRCH-IgM, IgG抗体。结果女性不孕症患者ToRCH-IgM总阳性率为5.15% ,原发不孕、继发不孕、孕早期对照组ToRCH-IgM总阳性率分别为4.37% ,5.94% ,3.52% ,继发不孕组ToRCH-IgM总阳性率高于孕早期对照组(P<0.05)。ToRCH各病原体IgM抗体中,继发不孕组单纯疱疹病毒VIⅡ型(HSVVIll)IgM阳性率高于孕早期对照组;ToRCH各病原体IgG抗体中,不孕组弓形虫(Tox),风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV ),HSVVllIrgG阳性率均高于孕早期对照组(P<0.05)。按照年龄进行分层分析,低龄组和高龄组中,不孕组和孕早期对照组间ToRCH各病原体lIgM抗体阳性率差异均无统计学意义;低龄组中,原发不孕组Tox-IgG ,继发不孕组RV,CMV JHSVI,HSVIIgG抗体阳性率均高于孕早期对照组;高龄组中,继发不孕组CMV ,HSVll lgG抗体阳性率高于孕早期对照组(P<0.05)。在不同季节组间,仅继发不孕组HSVI-IgM阳性率在夏季较高,差异有统计学意义(P<0.05)。ToRCH-IgM/IgG，感染模式中，继发不孕组混合感染更普遍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论杭州地区女性不孕症患者现症感染以HSVI-IgM为主,既往感染以CMV-IgG HSVI-IgC为主;应加强不孕症人群中ToRCH感染的筛查和监测,做到早期预防和治疗。

摘要:摘要:目的―探讨解脲脲原体(U)和沙眼衣原体(CT)感染与精子质量及辅助生殖结局的关联。方法﹐回顾性分析2021年1月至2024年12月在我院生殖与遗传中心接受UU和CT检测的男性患者,共纳入接受UU检测的患者5728例,接受CT检测的患者5644例。采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术检测UU和CT。根据UU检测结果将患者分为强阳性组,弱阳性组和阴性组;根据CT检测结果将患者分为阳性组和阴性组。统计分析不同组别间精子浓度,精子活动率、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率,精子DNA碎片指数以及配偶接受体外受精(IVF)者的受精率,种植率,优质胚胎率、妊娠率,流产率和活产率的差异。结果UU强阳性组精子浓度[ ( 54.00±39.50)×10 /mL.]低于弱阳性组[ (60.33±40.42)×10/mL.]和阴性组[ (60.93±42.26)×10/mL]( P<0.01)。UU强阳性组优质胚胎率高于阴性组,但缺乏临床意义。CT阳性组精子质量参数总体低于阴性组,但仅正常形态精子百分率降低[(4.28±3.03 )%e vs (5.07±3.26)% ,P<0.05]。结论UU强阳性和CT阳性可能与男性精子质量下降有关,临床诊疗中应予以重视。UU弱阳性与精子质量和辅助生殖结局无关联,临床中应注意鉴别,避免过度治疗。

摘要:摘要:目的建立儿童血细胞分析中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PIR),淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)和中性粒细胞/单核细胞比值(NMR)的参考区间。方法﹐参照WS/T779—2021标准,选择2022年1月至12月在南京医科大学附属儿童医院接受健康体检的28天~18岁儿童为参考人群,共计5 978例。依据《儿童血细胞分析参考区间》,分为28天~<6个月,6个月~

摘要:摘要:目的探讨外周血细胞形态学数字化教学平台的搭建及网络化教学模式在形态学教学中的应用效果。方法﹐以检验科的日常工作实景作为素材,构建包含150O余张形态学图片的数字化资源库,涵盖正常血细胞和异常血细胞。设计包含教学和考核2个环节的模块,搭建数字化平台及OMO( Online-Merge-Ofline)模式的在线网络教学模式。将2023年3月至2024年3月期间在同济医院检验科实习,进修的71名学生随机分为对照组(35名)和研究组(36名)。对照组采用传统教学模式,研究组采用网络化教学模式,比较两组学生的考核成绩并评估教学效果。结果研究组学生的考核成绩优于对照组,且与研究组学习前的成绩相比也有提升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论﹐在临床检验外周血细胞形态学实习带教中,数字化教学平台结合网络化教学模式能够有效提升教学效率,帮助学生提高阅片能力,同时激发学生对形态学课程的学习兴趣。

摘要:摘要:对Ⅰ例磁共振成像(MRI)提示可能为双眼先夭性青光眼的胎儿进行遗传学和临床特征分析。染色体G显带分析提示胎儿核型为46, XN, inv(2)( q23q24.3) t(2;3;11 ) ( q24.3 ; p22 ;pl5.5 ) ,为臂内倒位和复杂易位。中深度全基因组测序(CMA-seq)检测到16pl2.2区段存在569 999 lp缺失[ seq[CRCh37]del( 16)( p12.2p12.2) chrl6;g.21921001_22491000del] ,为可能致病性拷贝数变异(CNV),该区段为神经发育异常的易感位点。彩超提示双眼外凸,头颅MRI提示双眼先天性青光眼可能。产前诊断异常胎儿需结合细胞遗传学、分子遗传学和影像学检查进行综合分析,重视病理检查,告知检查局限性,以期做出全面的风险评估和遗传咨询。